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1. (WO2018082231) METHOD FOR ESTABLISHING CD36 MUTANT GENE STABLE EUKARYOTIC EXPRESSION CELL LINE CAUSING CD36 DELETION
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Pub. No.: WO/2018/082231 International Application No.: PCT/CN2017/075785
Publication Date: 11.05.2018 International Filing Date: 06.03.2017
IPC:
C12N 5/10 (2006.01) ,C12N 15/867 (2006.01) ,C12N 15/65 (2006.01) ,C12N 15/66 (2006.01)
[IPC code unknown for C12N 5/10][IPC code unknown for C12N 15/867][IPC code unknown for C12N 15/65][IPC code unknown for C12N 15/66]
Applicants:
南宁输血医学研究所 NAN-NING INSTITUTE OF TRANSFUSION MEDICINE [CN/CN]; 中国广西壮族自治区南宁市 科园大道18号李丽兰 LI, Lilan No.18 Ke Yuan Avenue Nanning, Guangxi 530003, CN
Inventors:
吴国光 WU, Guoguang; CN
李丽兰 LI, Lilan; CN
蒋丽红 JIANG, Lihong; CN
黎海燕 LI, Hanyan; CN
陈洁润 CHEN, Jierun; CN
Agent:
广西南宁明智专利商标代理有限责任公司 GUANGXI NANNING MINGZHI PATENT&TRADEMARK AGENT CO., LTD.; 中国广西壮族自治区南宁市 江南区淡村路5号黎明天 LI, Mingtian No.5, Dancun Road, Jiangnan District Nanning, Guangxi 530031, CN
Priority Data:
201610967814.101.11.2016CN
Title (EN) METHOD FOR ESTABLISHING CD36 MUTANT GENE STABLE EUKARYOTIC EXPRESSION CELL LINE CAUSING CD36 DELETION
(FR) PROCÉDÉ DE MISE EN PLACE D'UNE LIGNÉE CELLULAIRE D'EXPRESSION EUCARYOTE STABLE À GÈNE MUTANT (CD36) PROVOQUANT LA DÉLÉTION DE CD36
(ZH) 导致CD36缺失的CD36突变基因真核稳定表达细胞株的建立方法
Abstract:
(EN) Provided is a method for establishing a CD36 mutant gene stable eukaryotic expression cell line causing CD36 deletion, comprising the whole process of extracting total RNA from a CD36 deletion individual and conducting reverse transcription so as to obtain CD36 cDNA of whole segment of a CD36 mutant gene open reading frame; establishing a recombinant cloning vector containing the CD36 mutant gene cDNA and an EGFP fluorescent reporter gene, transforming the recombinant cloning vector into escherichia coli, and conducting plasmid amplification and identification; and transfecting the recombinant cloning vector into CHO-K1 cells, and conducting screening and identification so as to obtain the CD36 mutant gene stable eukaryotic expression cell line.
(FR) La présente invention concerne un procédé de mise en place d'une lignée cellulaire d'expression eucaryote stable à gène mutant (CD36) provoquant la délétion de CD36, comprenant le procédé complet d'extraction d'ARN total d'un individu à délétion de CD36 et la réalisation d'une transcription inverse afin d'obtenir l'ADN CD36 de segment complet d'un cadre de lecture ouvert de gène mutant (CD36); la mise en place d'un vecteur de clonage recombinant contenant l'ADNc de gène mutant (CD36) et d'un gène rapporteur fluorescent d'EGFP, la transformation du vecteur de clonage recombinant dans Escherichia coli, et la réalisation de l'amplification dans un plasmide et de l'identification; et la transfection du vecteur de clonage recombinant dans des cellules (CHO-K1), et la réalisation d'un criblage et d'une identification afin d'obtenir la lignée cellulaire d'expression eucaryote stable à gène mutant (CD36).
(ZH) 提供一种导致CD36缺失的CD36突变基因真核稳定表达细胞株的建立方法,包括从CD36缺失个体提取总RNA并反转录获取CD36变异基因开放阅读框全段的CD36 cDNA;建立包含CD36变异基因cDNA和EGFP荧光报告基因的重组克隆载体,并转化到大肠杆菌做质粒扩增与鉴定;将重组克隆载体转染CHO-K1细胞,筛选和鉴定获得CD36突变基因真核稳定表达细胞株的全过程。
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Publication Language: Chinese (ZH)
Filing Language: Chinese (ZH)