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1. (WO2018045856) METHOD FOR DIRECTLY TRANSFORMING EXOGENOUS DNA INTO NON-GERMINATED SPORES OF PENICILLIUM AMAGASAKIENSE
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Pub. No.: WO/2018/045856 International Application No.: PCT/CN2017/096981
Publication Date: 15.03.2018 International Filing Date: 11.08.2017
IPC:
C12N 15/80 (2006.01) ,C12R 1/80 (2006.01)
Applicants: FUZHOU UNIVERSITY[CN/CN]; No.2 Xueyuan Road, Shangjie Town, Minhou Fuzhou, Fujian 350000, CN
Inventors: LIN, Jun; CN
Agent: HANQUAN DAILI YOUXIAN GONGSI; Floor 1, Building 15#, Xihong Road 528, Gulou Fuzhou, Fujian 350000, CN
Priority Data:
201610813612.109.09.2016CN
Title (EN) METHOD FOR DIRECTLY TRANSFORMING EXOGENOUS DNA INTO NON-GERMINATED SPORES OF PENICILLIUM AMAGASAKIENSE
(FR) PROCÉDÉ PERMETTANT DE TRANSFORMER DIRECTEMENT UN ADN EXOGÈNE EN SPORES NON GERMÉES DE PENICILLIUM AMAGASAKIENSE
(ZH) 一种直接转化外源DNA进入尼琦青霉未萌发孢子的方法
Abstract:
(EN) A method for directly transforming exogenous DNA into non-germinated spores of penicillium amagasakiense, comprising the three steps of: penicillium amagasakiense culture and spore collection, penicillium amagasakiense spores pretreatment, and electroporation of penicillium amagasakiense spores using the HDEN method; the obtained penicillium amagasakiense spores is introduced to a plasmid to be transformed. Using non-germinated spores as a starting material for the introduction of exogenous molecules, and using the HDEN electrotransformation technology for the introduction of exogenous DNA into penicillium amagasakiense resting spores, may eliminate the need for the complicated step of spore germination, as well as the step of preparing protoplast or Agrobacterium transformation. In addition, the method has a high transformation rate, and each transformation reaction system can reach at least 6000 positive transformants.
(FR) La présente invention concerne un procédé de transformation directe d'un ADN exogène en spores non germées de penicillium amagasakiense, comprenant les trois étapes de : culture de penicillium amagasakiense et collecte des spores, prétraitement des spores de penicillium amagasakiense, et électroporation des spores de penicillium amagasakiense à l'aide du procédé HDEN ; les spores de pénicillium amagasakiense obtenues sont introduites dans un plasmide à transformer. L'utilisation de spores non germées en tant que matière première pour l'introduction de molécules exogènes, et l'utilisation de la technologie d'électrotransformation par HDEN pour l'introduction d'un ADN exogène dans des spores au repos de penicillium amagasakiense, peut éliminer le besoin de l'étape compliquée de germination des spores, ainsi que de l'étape de préparation du protoplaste ou de transformation par Agrobacterium. De plus, le procédé présente un taux de transformation élevé, et chaque système de réaction de transformation peut atteindre au moins 6 000 transformants positifs.
(ZH) 一种直接转化外源DNA进入尼琦青霉未萌发孢子的方法,包括尼琦青霉培养和孢子收集、尼琦青霉孢子预处理以及使用HDEN法电击尼琦青霉孢子三个步骤,得到导入待转化质粒的尼琦青霉孢子。用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料,并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入尼琦青霉休眠孢子,可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤,省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等,并且转化率高,每个转化反应体系,至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JO, JP, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
African Regional Intellectual Property Organization (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Office (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
European Patent Office (EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Publication Language: Chinese (ZH)
Filing Language: Chinese (ZH)