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1. (WO2018016795) OROTATE OF ANTIVIRAL DRUG, PREPARATION METHOD THEREFOR, AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION CONTAINING OROTATE
Document

명세서

발명의 명칭

기술분야

1   2   3   4  

배경기술

5   6   7   8  

발명의 상세한 설명

기술적 과제

9   10  

과제 해결 수단

11   12   13   14   15   16   17   18   19   20   21   22  

발명의 효과

23   24   25   26   27  

도면의 간단한 설명

28   29   30   31   32   33   34  

발명의 실시를 위한 형태

35   36   37   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48   49   50   51   52   53   54   55   56   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67   68   69   70   71   72   73   74   75   76   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87   88   89   90   91   92   93   94   95   96   97   98   99   100   101   102   103   104   105   106   107   108   109   110   111   112   113   114   115   116   117   118   119   120   121   122   123   124   125   126   127   128   129   130   131   132   133   134   135   136   137   138   139   140   141   142   143   144   145   146   147   148   149   150   151   152   153  

청구범위

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도면

1   2   3   4   5   6  

명세서

발명의 명칭 : 항바이러스성 약물의 오로트산염, 이의 제조 방법 및 상기 염을 포함하는 약제학적 조성물

기술분야

[1]
본 발명은 화학식 1의 3-[({1-[(2-아미노-9 H-퓨린-9-일)메틸]사이클로프로필}옥시)메틸]-8,8-디메틸-3,7-디옥소-2,4,6-트리옥사-3λ 5-포스파논-1-일-피발레이트(베시포비르디피복실(besifovir dipivoxil))의 오로트산염, 그의 제조방법 및 상기 염을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
[2]
[화학식 1]
[3]
[4]

배경기술

[5]
상기 화학식 1의 유리 화합물(베시포비르디피복실)은 산이 부가되지 않은 화합물로써 대한민국 등록특허 제0441638호 및 국제공개특허 WO 02/057288호에 개시된 새로운 항바이러스 물질이다. 그러나 이 화합물은 열과 수분에 대해 매우 불안정하여 약제학적 조성물의 원료로 사용되기 어려운 화합물이다.
[6]
대한민국 등록특허 제0935904호에서는 이와 같은 문제점을 해결하기 위해 약제학적으로 허용되는 여러 종류의 염을 제조하였다. 이 과정에서 일부 염들은 결정성 고체로 얻기가 힘든 것으로 밝혀졌으며, 말레산염, p-톨루엔설폰산염, 메탄설폰산염, 나프탈렌설폰산염 및 에탄설폰산염의 경우에만 결정성 고체로 얻는데 성공하였고, 그 중에서 베시포비르디피복실 말레산 단일염이 그의 유리 화합물이나 기타 염에 비해 열에 대한 안정성이 현저히 우수하다고 기술하고 있다.
[7]
그러나 베시포비르디피복실 말레산염은 100 ℃ 이상의 고온에서 매우 불안정하여 6시간 만에 대부분 분해되어 여전히 안정성에서 불충분하며, 접촉할 경우에 발적, 통증, 각막, 진무름까지 동반하는 중증 자극을 일으킬 수 있는 말레산의 특징으로 인하여 제조과정에서 결막염 또는 급성 노출의 경우와 유사한 증상이 생길 수 있어(식품의약품안전평가원 독성정보 자료 참조), 안전에 있어서도 주의를 요한다.
[8]

발명의 상세한 설명

기술적 과제

[9]
본 발명의 일 과제는 독성 등의 문제가 없고, 100℃ 이상의 고온에서 열안정성을 나타내며 제조공정의 안전성, 용해도 및 보관 안정성이 개선된 베시포비르디피복실의 신규염을 제공하고자 한다.
[10]

과제 해결 수단

[11]
본 발명의 일 양태는 화학식 1로 표시되는 3-[({1-[(2-아미노-9 H-퓨린-9-일)메틸]사이클로프로필}옥시)메틸]-8,8-디메틸-3,7-디옥소-2,4,6-트리옥사-3λ 5-포스파논-1-일-피발레이트의 오로트산염(이하, 이를 '베시포비르디피복실 오로트산염'이라 한다)에 관한 것이다:
[12]
[화학식 1]
[13]
[14]
본 발명의 다른 양태는 화학식 2로 표시되는 3-[({1-[(2-아미노-9 H-퓨린-9-일)메틸]사이클로프로필}옥시)메틸]-8,8-디메틸-3,7-디옥소-2,4,6-트리옥사-3λ 5-포스파논-1-일-피발레이트(베시포비르디피복실)의 유리 화합물을 화학식 3으로 표시되는 오로트산(orotic acid)과 용매의 존재 하에 혼합하는 것을 포함하는 화학식 1의 베시포비르디피복실 오로트산염의 제조 방법에 관한 것이다:
[15]
[화학식 2]
[16]
[17]
[화학식 3]
[18]
[19]
[화학식 1].
[20]
[21]
본 발명의 또 다른 양태는 베시포비르디피복실의 오로트산염 및 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 바이러스 감염 치료 혹은 예방용 약제학적 조성물에 관한 것이다.
[22]

발명의 효과

[23]
본 발명의 베시포비르디피복실 오로트산염은 빛, 온도 및 습도에 따른 안정성이 우수하며, 특히 기존에 안정하다고 알려진 베시포비르디피복실 말레산염이 분해되는 100℃ 이상의 높은 온도에서도 매우 우수한 열안정성을 나타낸다.
[24]
본 발명의 베시포비르디피복실 오로트산염은 매우 우수한 안정성을 나타냄으로써 장기간 보존이 가능하며, 고온다습한 환경에서도 제제연구 및 보관이 용이하다는 장점을 가진다.
[25]
또한 본 발명의 베시포비르디피복실 오로트산염은 오로트산이 인체에 유해하지 않기 때문에 이의 제조 과정에서 작업자들이 안전하게 베시포비르디피복실 오로트산염을 제조할 수 있다.
[26]
본 발명에 따른 베시포비르디피복실 오로트산염의 제조 방법에 의해 제조된 베시포비르디피복실 오로트산염은 비교적 간단한 공정으로 매우 높은 순도, 예컨대 99 % 이상, 구체적으로는 99.5 % 이상, 보다 구체적으로는 99.9 % 이상의 순도를 갖는다.
[27]

도면의 간단한 설명

[28]
도 1은 본 발명의 베시포비르디피복실 오로트산염과 대조 화합물인 베시포비르디피복실 말레산염의 시간과 온도(100℃)에 따른 중량(%) 변화를 비교한 그래프이다.
[29]
도 2는 실시예 1의 베시포비르디피복실 오로트산염의 시차주사열량도(Differential Scanning Calorimeter)를 나타낸 것이다.
[30]
도 3은 비교예 1의 베시포비르디피복실 말레산염의 시차주사열량도(Differential Scanning Calorimeter)를 나타낸 것이다.
[31]
도 4는 실시예 1의 베시포비르디피복실 오로트산염의 분말 X-선 회절 분광도(Powder X-ray Diffraction pattern)를 나타낸 것이다.
[32]
도 5는 실시예 1의 베시포비르디피복실 오로트산염의 적외선 분광(FT-IR)을 나타낸 것이다.
[33]
도 6은 실시예 1의 베시포비르디피복실 오로트산염의 1H 핵자기 공명 스펙트럼(NMR)을 나타낸 것이다.
[34]

발명의 실시를 위한 형태

[35]
본 발명의 일 양태는 화학식 1로 표시되는 3-[({1-[(2-아미노-9 H-퓨린-9-일)메틸]사이클로프로필}옥시)메틸]-8,8-디메틸-3,7-디옥소-2,4,6-트리옥사-3λ 5-포스파논-1-일-피발레이트의 오로트산염(이하 이를 '베시포비르디피복실 오로트산염'이라 한다)에 관한 것이다:
[36]
[화학식 1]
[37]
[38]
특히 베시포비르디피복실의 오로트산염은 결정성 고체일 수 있으며, 구체적으로 분말 X-선 회절 분석에서 2θ = 2.97°, 8.84°, 10.16°, 15.47° 및 19.94° ± 0.2°의 X선 회절피크를 특징으로 하는 결정형일 수 있다. 보다 구체적으로 분말 X-선 회절 분석에서 2θ = 2.97°, 5.86°, 8.84°, 10.16°, 11.33°, 11.67°, 15.47°, 16.57°, 17.17°, 18.09°, 19.94°, 23.96°, 25.14°, 26.41° 및 27.69° ± 0.2°에서 X선 회절피크를 특징으로 하는 결정형일 수 있다.
[39]
화학식 1로 표시되는 3-[({1-[(2-아미노-9 H-퓨린-9-일)메틸]사이클로프로필}옥시)메틸]-8,8-디메틸-3,7-디옥소-2,4,6-트리옥사-3λ 5-포스파논-1-일-피발레이트(베시포비르디피복실)의 오로트산염은 약 1몰 당량의 3-[({1-[(2-아미노-9 H-퓨린-9-일)메틸]사이클로프로필}옥시)메틸]-8,8-디메틸-3,7-디옥소-2,4,6-트리옥사-3λ 5-포스파논-1-일-피발레이트의 양이온 유리 화합물 및 약 1몰 당량의 오로트산 음이온으로 구성될 수 있다. 또한 베시포비르디피복실 오로트산의 융점은 179.0℃ 내지 182℃ 의 범위이다.
[40]
화학식 1의 베시포비르디피복실 오로트산염은 수분, 광, 고온(예: 100℃ 이상) 등의 가혹 조건에서도 분해되지 않아 안정성이 우수하여 항바이러스용 약제학적 조성물로 사용시 보관 조건에 무관하게 활성 성분이 분해되지 않아 약효를 유지할 수 있는 이점이 있다. 또한 화학식 1의 베시포비르디피복실 오로트산염은 이의 유리 화합물이나 기타 염에 비해 용해도와 안전성이 개선되는 이점이 있다.
[41]
위와 같은 베시포비르디피복실 오로트산염의 개선된 물리 화학적 안정성과 용해도로 인해 바이러스 감염의 예방을 위해 혹은 치료를 위해 유용하게 사용될 수 있다. 특히 베시포비르디피복실 오로트산염의 개선된 물리 화학적 안정성으로 인해, 상기 활성 성분을 포함하는 고체 약제학적 제형에 유리하게 사용될 수 있다.
[42]
베시포비르디피복실 오로트산염은 고순도, 예컨대 99 % 이상, 구체적으로는 99.5 % 이상, 보다 구체적으로는 99.9 % 이상의 순도, 예컨대 99.91 % 내지 99.98 %의 순도를 가질 수 있다.
[43]
본 발명의 다른 양태는 화학식 1의 베시포비르디피복실의 오로트산염의 제조 방법에 관한 것으로, 상기 제조 방법은 베시포비르디피복실의 유리 화합물을 오로트산과 용매의 존재 하에 혼합하는 것을 포함한다. 상세하게는 화학식 2로 표시되는 3-[({1-[(2-아미노-9 H-퓨린-9-일)메틸]사이클로프로필}옥시)메틸]-8,8-디메틸-3,7-디옥소-2,4,6-트리옥사-3λ 5-포스파논-1-일-피발레이트(베시포비르디피복실)의 유리 화합물을 화학식 3으로 표시되는 오로트산과 용매의 존재하에 혼합하는 것을 포함하는, 화학식 1의 베시포비르디피복실 오로트산염의 제조 방법이 제공된다:
[44]
[화학식 2]
[45]
[46]
[화학식 3]
[47]
[48]
[화학식 1]
[49]
.
[50]
구체적으로 상기 제조 방법은 베시포비르디피복실의 유리 화합물과 오로트산염을 용매의 존재하에 혼합하고 이를 35℃ 내지 50 ℃의 온도 범위, 구체적으로 40℃ 내지 45℃에서 1분 내지 12시간 동안, 구체적으로는 1분 내지 6시간, 보다 구체적으로는 1분 내지 1시간 가온하고 15℃ 내지 30℃의 범위, 예컨대 20℃ 내지 25℃로 냉각함으로써 제조될 수 있다. 구체예에서 상기 제조 방법은 상기 냉각 후 수득된 고체를 여과하고 용매로 세척한 후 건조하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
[51]
베시포비르디피복실의 유리 화합물을 용매 1 ml 당 1 mg 내지 700 mg의 비율로 용해시키고, 여기에 오로트산염을 첨가하고 교반하면 베시포비르디피복실의 오로트산염이 생성될 수 있다. 염 생성에 사용될 수 있는 용매로는 예를 들어, 물, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 사이클로헥산, 노말헥산, 디에틸에테르, 메틸에틸케톤, 테트라하이드로푸란, 아세톤 등을 사용할 수 있다. 첨가되는 오로트산염의 양은 베시포비르디피복실의 유리 화합물 1 당량을 기준으로 0.8 당량 내지 1.2 당량, 구체적으로는 0.9 당량 내지 1.1 당량, 보다 구체적으로는 약 1 당량을 사용할 수 있다.
[52]
상기 방법에 의해 제조된 베시포비르디피복실의 오로트산염은 결정형 고체일 수 있다. 구체적으로 분말 X-선 회절 분석에서 2θ = 2.97°, 8.84°, 10.16°, 15.47° 및 19.94° ± 0.2°의 X선 회절피크를 특징으로 하는 결정형일 수 있다(도 4 참조). 보다 구체적으로, 분말 X-선 회절 분석에서 2θ= 2.97°, 5.86°, 8.84°, 10.16°, 11.33°, 11.67°, 15.47°, 16.57°, 17.17°, 18.09°, 19.94°, 23.96°, 25.14°, 26.41° 및 27.69° ± 0.2°에서 X선 회절피크를 특징으로 하는 결정형일 수 있다(도 4 참조). 시차주사 열량도(10℃/분)에서 상기 결정의 융용점 흡열 피크 시작점은 178.53℃이다(도 5 참조).
[53]
베시포비르디피복실 오로트산염에 의해 예방 또는 치료될 수 있는 질환은 바이러스 감염에 의한 질환이며, 예를 들어 HSV-1(Herpes simplex virus type 1), HSV-2(Herpes simplex virus type 2), 사이토메갈로바이러스, HBV(B형 간염 바이러스) 또는 HIV(인간 면역 결핍 바이러스) 등을 포함하나, 구체적으로는 HBV 또는 HIV 일 수 있다.
[54]
따라서 본 발명의 또 다른 양태는 베시포비르디피복실의 오로트산염 및 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다. 상기 약제학적 조성물은 상기 바이러스 질환의 예방 또는 치료, 구체적으로 HBV 또는 HIV 감염의 예방 또는 치료에 특히 유용하다. 베시포비르디피복실의 오로트산염의 총 1일 투여 용량은 1 mg 내지 600 mg, 구체적으로는 1 mg 내지 300 mg, 보다 구체적으로는 100 mg 내지 200 mg의 범위일 수 있으나, 대상체의 체중, 나이, 질환의 중증도, 건강 상태 등에 따라 달라질 수 있다.
[55]
베시포비르디피복실의 오로트산염을 포함하는 조성물은 주사용 제제 또는 경구용 제제로 투여될 수 있다.
[56]
주사용 제제, 예를 들어, 멸균 주사용 수성 또는 유성 현탁액으로 사용될 수 있으며, 상기 주사용 제제의 용매로는 물, 링거액 또는 등장성 NaCl 용액을 사용할 수 있다.
[57]
경구용 제제로는 예를 들면, 정제, 캡슐제, 환제, 산제 등이 있고, 특히 정제 또는 캡슐제일 수 있다. 정제의 형태로 경구 투여하는 경우에 베시포비르디피복실의 오로트산염은 경구용의 비-독성이며 약제학적으로 허용되는 불활성 담체, 예를 들어 락토스, 전분, 수크로스, 글루코스, 메틸 셀룰로스, 마그네슘 스테아레이트, 인산이칼슘, 황산칼슘, 만니톨, 소르비톨 등과 혼합될 수 있으며, 액체 형태로 경구 투여되는 경우에 베시포비르디피복실의 오로트산염은 임의의 경구용이며 비-독성인 약제학적으로 허용되는 불활성 담체, 예를 들어 에탄올, 글리세롤, 물 등과 혼합될 수 있다. 더욱이 경우에 따라 또는 필요에 따라, 적당한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 착색제가 혼합물 중에 혼입될 수 있다.
[58]
적합한 결합제로는 전분, 젤라틴, 천연 당류, 예컨대 글루코스 또는 베타-락토스, 옥수수 감미제, 천연 및 합성 검, 예컨대 아카시아, 트라가칸트 또는 나트륨 알기네이트, 카복시메틸셀룰로스, 폴리메틸셀룰로스, 폴리에틸렌 글리콜, 왁스 등이 포함된다. 상기 윤활제로는 나트륨 올레에이트, 나트륨 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 나트륨 벤조에이트, 나트륨 아세테이트, 염화나트륨 등이 포함된다. 붕해제로는 제한 없이 전분, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토니트, 크산탄 검 등이 포함된다.
[59]
본 발명의 또 다른 양태는 항바이러스 약물, 구체적으로 항 HBV 약물 또는 항 HIV 약물을 제조하는 데 있어서 베시포비르디피복실의 오로트산염의 용도를 제공한다.
[60]
본 발명의 또 다른 양태는 예방학적 또는 치료학적 유효량의 베시포비르디피복실의 오로트산염을 바이러스 감염, 구체적으로는 HBV 또는 HIV 감염 치료 또는 예방이 필요한 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 바이러스 질환을 예방 또는 치료하는 방법이 제공된다.
[61]
[62]
이하 본 발명의 일 구현예를 하기 실시예와 실험예를 통해 보다 상세히 설명한다. 다만 이들 실시예와 실험예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것일 뿐 어떤 의미로든 본 발명의 범위를 제한하려는 의도가 있는 것은 아님을 분명히 밝히고자 한다.
[63]
[64]
실시예
[65]
실시예 1 : 베시포비르디피복실의 오로트산염의 제조
[66]
2.0 g의 3-[({1-[(2-아미노-9 H-퓨린-9-일)메틸]사이클로프로필}옥시)메틸] -8,8-디메틸-3,7-디옥소-2,4,6-트리옥사-3λ 5-포스파논-1-일-피발레이트 (베시포비르디피복실)를 40 mL의 메탄올에 가하여 용해시키고, 이어서 0.62 g의 오로트산과 60 mL의 물을 첨가하였다. 40 ~ 45℃ 에서 30분간 가온 교반한 뒤 상온으로 냉각하여 2시간 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하여 메탄올과 물로 세척한 후 건조하여 2.21 g의 베시포비르디피복실 오로트산염을 얻었다. (수율: 85.3 %, 순도: 99.96 %)
[67]
1H NMR(400MHz, DMSO-d 6) : δ 11.32(s, 1H), 10.84(s, 1H), 8.60(s, 1H), 8.13(s, 1H), 6.56(s, 2H), 5.99(d, 1H), 5.55~5.59(d, 4H), 4.25(s, 2H), 4.11~4.13(d, 2H), 1.13(s, 18H), 0.89~0.90(d, 4H)
[68]
[69]
실시예 2: 베시포비르디피복실의 오로트산염의 제조
[70]
2.0 g의 베시포비르디피복실과 0.62 g의 오로트산에 60 mL의 물을 첨가하였다. 40 ~ 45℃에서 4시간 30분간 가온 교반한 뒤 상온으로 냉각하여 1일 교반하였다. 수득한 고체를 여과하여 물로 세척한 후 건조하여 2.42 g의 베시포비르디피복실 오로트산염을 얻었다. (수율: 93.4 %, 순도: 99.92 %)
[71]
[72]
비교예
[73]
비교예 1: 베시포비르디피복실의 말레산염의 제조
[74]
대한민국 특허 등록 제0935904호의 실시예 3에 기재된 방법에 따라, 1 g의 베시포비르디피복실을 에틸아세테이트 10 ml에 녹인 후 1 당량의 말레산을 첨가하고 한 시간 동안 교반하여 고체를 생성하였다. 수득한 고체를 여과하여 에틸아세테이트로 세척한 후 건조하여 순도 99.89 %의 베시포비르디피복실 말레산염을 수득하였다.
[75]
[76]
비교예 2: 베시포비르디피복실의 푸마르산 이염의 제조
[77]
1.0 g의 베시포비르디피복실과 0.46 g의 푸마르산을 10 mL의 메탄올에 가하여 용해시킨 뒤 1시간 동안 상온교반하였다. 반응액을 감압농축한 뒤 에틸아세테이트와 MTBE(Methyl tert-butyl ether, 메틸 터트-부틸 에테르)를 첨가하여 고체를 석출시켰다. 수득한 고체를 여과하여 MTBE로 세척한 후 건조하여 1.16 g의 베시포비르디피복실 푸마르산 이염을 얻었다. (수율: 80.6 %, 순도: 99.84 %)
[78]
1H NMR(400MHz, DMSO-d 6) : δ 8.57(s, 1H), 8.10(s, 1H), 6.63~6.23(d, 4H), 6.46(s, 2H), 5.55~5.58(d, 4H), 4.24(s, 2H), 4.10~4.13(d, 2H), 1.13(s, 18H), 0.89~0.90(d, 4H)
[79]
[80]
비교예 3: 베시포비르디피복실의 피콜린산염의 제조
[81]
1.0 g의 베시포비르디피복실과 0.26 g의 피콜리닉산을 10 mL의 메탄올에 가하여 용해시킨 뒤 1시간 동안 상온교반하였다. 반응액을 감압농축한 뒤 에틸아세트산과 헵탄을 첨가하여 고체를 석출시켰다. 수득한 고체를 여과하여 헵탄으로 세척한 후 건조하여 1.04 g의 베시포비르디피복실 피콜린산염을 얻었다. (수율: 83.9 %, 순도: 99.76 %)
[82]
1H NMR(400MHz, DMSO-d 6) : δ 8.70~8.71(m, 1H), 8.57(s, 1H), 8.10(s, 1H), 8.03~8.06(m, 1H), 7.96~8.00(m, 1H), 7.61~7.64(m, 1H), 6.46(s, 2H), 5.55~5.59(d, 4H), 4.24(s, 2H), 4.11~4.13(d, 2H), 1.13(s, 18H), 0.89~0.90(d, 4H)
[83]
[84]
비교예 4: 베시포비르디피복실의 N,N -디메틸글라이신 이염의 제조
[85]
1.0 g의 베시포비르디피복실과 0.22 g의 N,N-디메틸글라신을 3 mL의 메탄올에 가하여 용해시킨 뒤 3시간 동안 상온교반하였다. 반응액을 감압농축한 뒤 에틸아세트산과 헵탄을 첨가하여 고체를 석출시켰다. 수득한 고체를 여과하여 헵탄으로 세척한 후 건조하여 0.63 g의 베시포비르디피복실 N,N-디메틸글라이신 이염을 얻었다. (수율: 63.0 %, 순도: 99.76 %)
[86]
1H NMR(400MHz, DMSO-d 6) : δ 8.56(s, 1H), 8.09(s, 1H), 6.45(s, 2H), 5.54~5.58(d, 4H), 4.24(s, 2H), 4.10~4.12(d, 2H), 3.24(s, 4H), 2.60(s, 12H), 1.12(s, 18H), 0.88~0.89(d, 4H)
[87]
[88]
비교예 5: 베시포비르디피복실의 인산염의 제조
[89]
1.0 g의 베시포비르디피복실을 5 mL의 이소프로필알코올에 용해시킨 뒤 0.13 mL의 인산을 천천히 적가하였다. 상온에서 1시간 동안 교반한 뒤, 수득한 고체를 여과하여 이소프로필알코올로 세척한 후 건조하여 1.12 g의 베시포비르디피복실 인산염을 얻었다. (수율: 94.0 %, 순도: 99.83 %)
[90]
1H NMR(400MHz, DMSO-d 6) : δ 8.57(s, 1H), 8.10(s, 1H), 6.47(s, 2H), 5.55~5.58(d, 4H), 4.24(s, 2H), 4.10~4.12(d, 2H), 1.12(s, 18H), 0.88~0.90(d, 4H)
[91]
[92]
비교예 6: 베시포비르디피복실의 브롬산염의 제조
[93]
3.0 g의 베시포비르디피복실을 15 mL의 에틸아세테이트에 용해시킨 뒤 0.65 mg의 브롬화수소를 가하였다. 상온에서 1시간 동안 교반한 뒤, 수득한 고체를 여과하여 에틸아세테이트로 세척한 후 건조하여 3.39 g의 베시포비르디피복실 브롬산염을 얻었다. (수율: 98.0 %, 순도: 99.83 %)
[94]
1H NMR(400MHz, DMSO-d 6) : δ 8.96(s, 1H), 8.57(s, 1H), 7.82(br, 2H), 5.54~5.58(d, 4H), 4.31(s, 2H), 4.12~4.15(d, 2H), 1.13(s, 18H), 0.93(s, 4H)
[95]
[96]
비교예 7: 베시포비르디피복실의 황산염의 제조
[97]
3.0 g의 베시포비르디피복실을 18 mL의 에틸아세테이트에 용해시킨 뒤 0.3 mL의 황산을 적가하였다. 상온에서 2시간 동안 교반한 뒤, 수득한 고체를 여과하여 에틸아세테이트로 세척한 후 건조하여 3.49 g의 베시포비르디피복실 황산염을 얻었다. (수율: 98.0 %, 순도: 99.83 %)
[98]
1H NMR(400MHz, DMSO-d 6) : δ 8.96(s, 1H), 8.56(s, 1H), 7.84(br, 2H), 5.55~5.58(d, 4H), 4.31(s, 2H), 4.13~4.15(d, 2H), 1.13(s, 18H), 0.93(s, 4H)
[99]
[100]
비교예 8: 베시포비르디피복실의 염산염 이수화물의 제조
[101]
3.0 g의 베시포비르디피복실을 27 mL의 에틸아세테이트에 용해시킨 뒤 0.48 mL의 염산을 적가하였다. 수득한 고체를 여과하여 에틸아세테이트로 세척한 후 건조하여 3.03 g의 베시포비르디피복실 염산염 이수화물을 얻었다. (수율: 88.9 %, 순도: 99.93 %)
[102]
1H NMR(400MHz, DMSO-d 6) : δ 9.01(s, 1H), 8.58(s, 1H), 8.05(br, 2H), 5.55~5.58(d, 4H), 4.31(s, 2H), 4.13~4.15(d, 2H), 1.12(s, 18H), 0.93(s, 4H)
[103]
[104]
상기 실시예 및 비교예 및 하기 실험예에서 화합물의 각 중량은 고성능 액상 크로마토그래피(HPLC)로 측정하였으며, Waters 사의 Alliance 2965 series를 사용하였다. 또한 시차주사열량도(Differential Scanning Calorimeter)의 측정은 TA사의 DSC Q20을 사용하였으며, 분말 X-선 회절 분광 스펙트럼(Powder X-ray Diffraction Spectrum)은 Bruker사의 D8 ADVANCE를 사용하여 측정하였다. 적외선 흡수 스펙트럼(InfraRed Spectrum)은 JASCO사 FT-IR 4100 spectrum을 사용하여 측정하였으며, 1H 핵자기 공명 스펙트럼(NMR)은 Bruker사의 AVANCE II 400(400 MHz)을 사용하여 측정하였다.
[105]
또한 본원에서 분말 X-선 회절 분석 조건은 다음과 같다:
[106]
약 50 mg의 시료를 시료 홀더에 채워 2-50°/2θ의 범위에서 회절
[107]
패턴을 얻었다. 자세한 분석 조건은 아래와 같다:
[108]
Time per step : 0.1
[109]
Stepsize : 0.02
[110]
Scan Mode : continuous scan
[111]
Voltage/Current : 40 kV/ 40 mV
[112]
2θ/θ Refection
[113]
Cu-target (Ni-filter)
[114]
Source Slit : 1.0 mm
[115]
Detector slits : 8.0 mm
[116]
[117]
실험예
[118]
실험예 1 : 고체 상태의 가속 안정성 비교 실험 1
[119]
실시예 1의 베시포비르디피복실 오로트산염과 비교예 1 내지 비교예 8에서 수득한 베시포비르디피복실의 기타염들의 시료를 각각 10 mg ~ 50 mg씩 유리 용기에 넣고 40 ± 2℃, 75 ± 5 % RH의 조건하에서 보관하였다. 1주, 2주 및 4주 후에 시료를 5 mg씩 취하여 HPLC를 이용하여 분석하였다. 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
[120]
[표1] 베시포비르디피복실 오로트산염과 기타염들에 대한 가속 안정성 실험 결과 (40℃/ 75 % RH에서의 중량 %)
시험 화합물 초기 1주 2주 4주
실시예 1 오로트산염 99.96 99.96 99.95 99.94
비교예 1 말레산염 99.89 99.89 99.89 99.89
비교예 2 푸마르산 이염 99.84 99.76 99.69 99.54
비교예 3 피콜린산염 99.76 99.67 99.39 98.44
비교예 4 N,N-디메틸글라이신 이염 99.67 99.67 99.64 99.58
비교예 5 인산염 99.83 99.73 99.63 99.44
비교예 6 브롬산염 99.83 99.20 98.66 97.82
비교예 7 황산염 99.83 97.90 95.74 86.23
비교예 8 염산염 이수화물 99.93 99.69 99.58 99.33

[121]
상기 표 1의 가속시험(40℃ / 75 % RH, 4주) 결과를 보면, 베시포비르디피복실의 염들 중에서 오로트산염만 중량이 99.9 % 이상으로 거의 유지되는 것을 확인할 수 있다. 즉 베시포비르디피복실 오로트산염이 비교예 1 내지 8에서 수득한 다른 염들에 비해 고온 및 고습 조건에서의 안정성이 보다 높았다.
[122]
[123]
실험예 2: 고체 상태의 가혹 안정성 비교 실험 2
[124]
비교예 1에서 수득한 베시포비르디피복실 말레산염과 실시예 1에서 수득한 오로트산염을 약 10 ~ 15 mg씩 여러 개의 유리 용기에 넣고 60℃, 80℃ 및 100 ℃에 각각 보관하였다. 1주, 2주, 4주 및 8주 후 또는 24시간 및 48시간 후에 시료를 5 mg씩 취하여 HPLC를 이용하여 분석하였다. 그 결과를 하기 표 2, 표 3 및 표 4에 나타내었다.
[125]
[표2] 베시포비르디피복실 말레산염 및 오로트산염에 대한 60 ℃에서의 안정성 실험 결과 (중량 %)
시험 화합물 60 ℃
초기 1주 2주 4주 8주
비교예 1(말레산염) 99.89 99.89 99.86 99.85 99.81
실시예 1(오로트산염) 99.96 99.93 99.92 99.90 99.89

[126]
[표3] 베시포비르디피복실 말레산염 및 오로트산염에 대한 80 ℃에서의 안정성 실험 결과 (중량 %)
시험 화합물 초기 80 ℃
24시간 48시간
비교예 1(말레산염) 99.89 99.88 99.83
실시예 1(오로트산염) 99.96 99.93 99.90

[127]
[표4] 베시포비르디피복실 말레산염 및 오로트산염에 대한 100℃에서의 안정성 실험 결과 (중량 %)
시험 화합물 초기 100 ℃
1시간 3시간 6시간 24시간 48시간
비교예 1(말레산염) 99.89 98.88 83.40 1.55 1.55 0.53
실시예 1(오로트산염) 99.96 99.96 99.92 99.89 99.85 99.75

[128]
[129]
상기 표 2와 표 3의 결과를 보면, 60℃와 80℃ 에서는 베시포비르디피복실 오로트산염과 말레산염이 거의 동등한 열안정성을 나타냄을 확인할 수 있다. 하지만 100℃ 이상의 고온(표 4 참조)에서는 6시간 후 말레산염이 대부분 분해되어 거의 남지 않는 것에 비해 오로트산염은 거의 분해되지 않기 때문에 본 발명의 오로트산염이 월등히 우수한 열안정성을 가지고 있음을 확인할 수 있다. 즉 본 발명의 베시포비르디피복실 오로트산염은 밀링 등 가공 또는 기타 가혹한 환경에서도 유연물질의 생성을 최소화할 수 있고, 이로써 다양한 제제 기술을 활용한 약물개발이 가능한 장점을 가진다.
[130]
[131]
실험예 3: 융점 측정
[132]
실시예 1의 베시포비르디피복실 오로트산염과 비교예 1의 베시포비르디피복실 말레산염의 융점 측정 및 DSC(시차주사열량계)를 이용한 열분석을 각각 실시하였다.
[133]
[134]
1) 모세관법 융점 측정
[135]
SRS MPA100을 사용하여 각 샘플을 10℃/분의 속도로 가열하면서 융점을 측정하였고, 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.
[136]
[표5] 실시예 1의 베시포비르디피복실 오로트산염과 비교예 1의 베시포비르디피복실 말레산염의 융점 측정 결과
실시예 1(오로트산염) 비교예 1(말레산염)
1회 163.4 ℃ 125.1 ℃
2회 162.3 ℃ 124.8 ℃
3회 162.6 ℃ 125.1 ℃
평균치 162.8 ℃ 125.0 ℃

[137]
[138]
2) DSC(시차주사열량계)를 이용한 열분석
[139]
실시예 1의 베시포비르디피복실 오로트산염과 비교예 1의 베시포비르디피복실 말레산염에 대해 TA사의 DSC Q20을 이용하여 각 샘플을 상온에서 200 내지 250℃까지 10℃ /분의 속도로 가열하여 분석하였고, 그 결과를 도 2(실시예 1의 베시포비르디피복실 오로트산염) 및 도 3(비교예 1의 베시포비르디피복실 말레산염)에 각각 나타내었다
[140]
[141]
상기의 표 5, 도 2 및 도 3의 결과를 통하여 본 발명의 베시포비르디피복실 오로트산염은 베시포비르디피복실 말레산염보다 융점이 더 높음을 확인할 수 있다.
[142]
[143]
실험예 4: 광안정성 시험
[144]
실시예 1의 베시포비르디피복실 오로트산염과 비교예 1의 베시포비르디피복실 말레산염을 각각 100 mg씩 투명한 유리용기에 넣어 광안정성 챔버에서 광원에 노출시킨 채로 3일 동안 보관하였다.
[145]
광안정성 측정기는 CARON Photostability Chamber Model 6545을 사용하였으며, 광노출양은 전체 조명(Overall illumination)이 240만 lux-hr/m 2, 근자외선(Near UV)가 330 Wㆍhr/m 2이다. 광원에 노출시킨 뒤 3일 후, 각각의 시료를 5 mg씩 취하여 HPLC를 이용하여 분석하였고, 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.
[146]
[표6] 베시포비르디피복실 오로트산염과 베시포비르디피복실 말레산염의 광안정성 측정 결과 (중량 %)
시험 화합물 초기 3일 후
실시예 1(오로트산염) 99.96 99.96
비교예 1(말레산염) 99.89 99.89

[147]
상기의 결과로부터 베시포비르디피복실 오로트산염은 빛에 노출되어도 광분해산물이 전혀 발생하지 않아서 베시포비르디피복실 말레산염과 동등하게 우수한 광안정성을 가지고 있음을 확인할 수 있다.
[148]
[149]
실험예 5: 흡습성 시험
[150]
실시예 1의 베시포비르디피복실 오로트산염과 비교예 1의 베시포비르디피복실 말레산염을 각각 1 g씩 25℃에서 상대습도 60 %와 92 % 챔버에 각각 7일간 보관한 후, 흡습에 의한 중량변화를 관찰하여 표 7에 나타내었다.
[151]
[표7] 베시포비르디피복실 오로트산염과 말레산염의 흡습성 시험 결과 (중량 변화율, %)
시험 화합물 60 % RH 92 % RH
실시예 1(오로트산염) -0.22 -0.22
비교예 1(말레산염) -0.33 +0.06

[152]
상기의 결과로부터 오로트산염은 말레산에 비해 흡습성을 더욱 나타내지 않는다는 것을 알 수 있다. 이는 베시포비르디피복실 오로트산염이 공기 중 수분에 노출되더라도 안전하다는 것을 나타낸다.
[153]

청구범위

[청구항 1]
화학식 1로 표시되는 3-[({1-[(2-아미노-9 H-퓨린-9-일)메틸]사이클로프로필}옥시)메틸]-8,8-디메틸-3,7-디옥소-2,4,6-트리옥사-3λ 5-포스파논-1-일-피발레이트(베시포비르디피복실)의 오로트산염: [화학식 1] .
[청구항 2]
제1항에 있어서, 결정성 고체인 것을 특징으로 하는 베시포비르디피복실 오로트산염.
[청구항 3]
제2항에 있어서, 분말 X-선 회절 분석에서 2θ = 2.97°, 8.84°, 10.16°, 15.47° 및 19.94°의 X선 회절피크를 갖는 것을 특징으로 하는 베시포비르디피복실 오로트산염.
[청구항 4]
제3항에 있어서, 분말 X-선 회절 분석에서 2θ = 2.97°, 5.86°, 8.84°, 10.16°, 11.33°, 11.67°, 15.47°, 16.57°, 17.17°, 18.09°, 19.94°, 23.96°, 25.14°, 26.41° 및 27.69°에서 X선 회절피크를 특징으로 하는 베시포비르디피복실 오로트산염.
[청구항 5]
제1항 내지 제4항 중 어느 하나의 항에 있어서, 베시포비르디피복실 오로트산염은 99 % 이상의 순도를 갖는 베시포비르디피복실 오로트산염.
[청구항 6]
화학식 2로 표시되는 3-[({1-[(2-아미노-9 H-퓨린-9-일)메틸]사이클로프로필}옥시)메틸]-8,8-디메틸-3,7-디옥소-2,4,6-트리옥사-3λ 5-포스파논-1-일-피발레이트(베시포비르디피복실)의 유리 화합물을 화학식 3으로 표시되는 오로트산과 용매 존재하에 혼합하는 것을 포함하는, 화학식 1의 베시포비르디피복실 오로트산염의 제조 방법: [화학식 2] [화학식 3] [화학식 1] .
[청구항 7]
제6항에 있어서, 상기 혼합 후 35℃ 내지 50℃의 온도 범위로 1분 내지 12시간 동안 가온하고 이후 15℃ 내지 30℃의 범위로 냉각하는 것을 추가로 포함하는 제조 방법.
[청구항 8]
제6항에 있어서, 상기 용매가 물, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 사이클로헥산, 노말헥산, 디에틸에테르, 메틸에틸케톤, 테트라하이드로푸란 및 아세톤으로 이루어진 군으로부터 하나 이상 선택된 제조 방법.
[청구항 9]
제6항에 있어서, 상기 제조된 화학식 1의 베시포비르디피복실 오로트산염이 결정성 고체인 제조 방법.
[청구항 10]
화학식 1로 표시되는 3-[({1-[(2-아미노-9 H-퓨린-9-일)메틸]사이클로프로필}옥시)메틸]-8,8-디메틸-3,7-디옥소-2,4,6-트리옥사-3λ 5-포스파논-1-일-피발레이트(베시포비르디피복실)의 오로트산염 및 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 바이러스 감염 치료 혹은 예방용 약제학적 조성물: [화학식 1] .
[청구항 11]
제10항에 있어서, 상기 베시포비르디피복실 오로트산염이 결정성 고체인 약제학적 조성물.
[청구항 12]
제10항에 있어서, 상기 바이러스가 HSV-1, HSV-2, 사이토메갈로바이러스, HBV 또는 HIV 인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
[청구항 13]
제12항에 있어서, 상기 바이러스가 HBV 또는 HIV 인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
[청구항 14]
제12항에 있어서, 베시포비르디피복실 오로트산염의 총 1일 투여 용량은 1 mg 내지 600 mg인 약제학적 조성물.
[청구항 15]
제10항 내지 제14항 중 어느 하나의 항에 있어서, 캡슐제 또는 정제의 투여 형태인 약제학적 조성물.

도면

[도1]

[도2]

[도3]

[도4]

[도5]

[도6]