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1. (WO2017182437) QUANTIFICATION OF AN INTERACTION BETWEEN A RAS PROTEIN AND A RAF PROTEIN
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Pub. No.:    WO/2017/182437    International Application No.:    PCT/EP2017/059123
Publication Date: 26.10.2017 International Filing Date: 18.04.2017
IPC:
G01N 33/68 (2006.01), C12Q 1/66 (2006.01)
Applicants: UNIVERSITÄT INNSBRUCK [AT/AT]; Innrain 52 A-6020 Innsbruck (AT)
Inventors: STEFAN, Eduard; (AT).
BACHMANN, Verena; (AT).
RAFFEINER, Philipp; (AT).
RÖCK, Ruth; (AT)
Agent: SCHWARZ & PARTNER PATENTANWÄLTE OG; Wipplingerstrasse 30 1010 Wien (AT).
VÖGELE, Andreas; (AT)
Priority Data:
16165865.3 18.04.2016 EP
Title (EN) QUANTIFICATION OF AN INTERACTION BETWEEN A RAS PROTEIN AND A RAF PROTEIN
(FR) QUANTIFICATION D'UNE INTERACTION ENTRE UNE PROTÉINE RAS ET UNE PROTÉINE RAF
Abstract: front page image
(EN)The present invention provides a method for quantification of an interaction between a Ras protein and a Raf protein, comprising the steps of a) providing a cell expressing two constructs for a protein-fragment complementation assay, wherein the first construct comprises the Ras protein and a first luciferase protein fragment, wherein the first luciferase protein fragment is located C-terminal from the Ras protein and wherein the second construct comprises the Raf protein and a second luciferase protein fragment, wherein the second luciferase protein fragment is located C-terminal from the Raf protein, wherein the second construct comprises a full-length Raf sequence section, and wherein the first and the second luciferase protein fragments are derived from different sections of the same luciferase protein b) allowing the first and second constructs to contact each other, c) providing a bioluminescence substrate for an intact luciferase protein and d) measuring for bioluminescence, wherein said bioluminescence indicates interaction between the two constructs upon reassembling of the first and second luciferase protein fragments.
(FR)La présente invention concerne un procédé de quantification d'une interaction entre une protéine Ras et une protéine Raf, comprenant les étapes de a) fourniture d’une cellule exprimant deux constructions pour un essai de complémentation de fragment de protéine, la première construction comprenant la protéine Ras et un premier fragment de protéine de luciférase, le premier fragment de protéine de luciférase étant situé à l'extrémité C-terminale de la protéine Ras et la deuxième construction comprenant la protéine Raf et un deuxième fragment de protéine de luciférase, le deuxième fragment de protéine de luciférase étant situé à l'extrémité C-terminale de la protéine Raf, la deuxième construction comprenant une section de séquence de Raf de longueur totale, et les premier et deuxième fragments de protéine de luciférase étant dérivés de sections différentes de la même protéine de luciférase b) mise en contact des première et deuxième constructions l'une avec l'autre, c) fourniture un substrat de bioluminescence pour une protéine de luciférase intacte et d) mesure de la bioluminescence, ladite bioluminescence indiquant une interaction entre les deux constructions lors du réassemblage des premier et deuxième fragments de protéine de luciférase.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)