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1. (WO2017177153) METHODS FOR SELECTING ENZYMES HAVING PROTEASE ACTIVITY
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Pub. No.:    WO/2017/177153    International Application No.:    PCT/US2017/026626
Publication Date: 12.10.2017 International Filing Date: 07.04.2017
IPC:
C12N 15/10 (2006.01)
Applicants: NOVOZYMES A/S [DK/DK]; Krogshoejvej 36 2880 Bagsvaerd (DK).
BLAZEJ, Robert [US/US]; (US) (BW only)
Inventors: BLAZEJ, Robert; (US).
TORIELLO, Nicholas; (US).
EMRICH, Charles; (US)
Agent: LAMBIRIS, Elias; (US).
FECHTER, Eric; (US)
Priority Data:
62/319,747 07.04.2016 US
Title (EN) METHODS FOR SELECTING ENZYMES HAVING PROTEASE ACTIVITY
(FR) PROCÉDÉS DE SÉLECTION D'ENZYMES À ACTIVITÉ PROTÉASIQUE
Abstract: front page image
(EN)Provided herein are systems and components thereof for improving protease activity. The systems make use of an emulsion for in vitro compartmentalization of a library of synthetic compounds, each compound having a gene linked to a protease substrate and selectable marker. Expressed enzymes with greater protease activity will preferentially hydrolyze the protease substrate, whereas enzymes with less protease activity will leave the substrate intact. Removal of the non-hydrolyzed compounds provides an enriched gene library encoding for more active protease variants. Also described are synthetic compounds and emulsions which can be used in the methods.
(FR)L'invention concerne des systèmes et des composants de ces derniers pour améliorer l'activité protéasique. Les systèmes utilisent une émulsion pour la compartimentation in vitro d'une bibliothèque de composés synthétiques, chaque composé ayant un gène lié à un substrat de protéase et un marqueur sélectionnable. Les enzymes exprimées présentant une plus forte activité protéasique vont préférentiellement hydrolyser le substrat des protéases, tandis que des enzymes présentant une activité protéasique moindre laisseront le substrat intact. L'élimination des composés non hydrolysés permet d'obtenir une bibliothèque enrichie par des gènes codant pour des variants de protéases plus actifs. L'invention concerne également des composés synthétiques et des émulsions qui peuvent être utilisés dans lesdites méthodes.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)