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1. (WO2017175736) METHOD FOR PREPARING MEMBRANE VESICLES SUITABLE FOR BIOPHYSICAL ANALYSIS
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Pub. No.: WO/2017/175736 International Application No.: PCT/JP2017/013999
Publication Date: 12.10.2017 International Filing Date: 03.04.2017
IPC:
C12N 5/00 (2006.01) ,C12N 1/00 (2006.01)
Applicants: NATIONAL INSTITUTE OF ADVANCED INDUSTRIAL SCIENCE AND TECHNOLOGY[JP/JP]; 3-1, Kasumigaseki 1-chome, Chiyoda-ku, Tokyo 1008921, JP
Inventors: ISHII, Noriyuki; JP
IKEMOTO, Mitsushi; JP
Agent: OKUYAMA, Shoichi; JP
ARIHARA, Koichi; JP
MATSUSHIMA, Tetsuo; JP
Priority Data:
2016-07549804.04.2016JP
Title (EN) METHOD FOR PREPARING MEMBRANE VESICLES SUITABLE FOR BIOPHYSICAL ANALYSIS
(FR) PROCÉDÉ DE PRÉPARATION DE VÉSICULES MEMBRANAIRES CONVENANT À L’ANALYSE BIOPHYSIQUE
(JA) 生物物理学的解析に適した膜小胞の調製方法
Abstract: front page image
(EN) Provided is a method for preparing a membrane vesicle population, the method including: (1) a step for ultrafiltration treatment of a sample solution including membrane vesicles; (2) a step for substituting the sample solution obtained from step (1) by a colloidal flocculant-free buffer solution, and thereby preparing a buffer solution including membrane vesicles; and (3) a step for separating the membrane vesicles included in the buffer solution obtained from step (2) by density gradient centrifugation. Also provided is a membrane vesicle population separated and purified from a sample solution, wherein: the membrane vesicles included in the membrane vesicle population are dispersed; and (i) the membrane vesicles included in the membrane vesicle population maintain a surface charge when present in the sample solution prior to separation and purification, (ii) the membrane vesicles included in the membrane vesicle population maintain their form when present in the sample solution prior to separation and purification, and/or (iii) the membrane vesicle population maintains a grain size distribution pattern when present in the sample solution prior to separation and purification.
(FR) La présente invention concerne un procédé de préparation d’une population de vésicules membranaires, le procédé comprenant : (1) une étape de traitement par ultrafiltration d’une solution échantillon comprenant des vésicules membranaires ; (2) une étape de substitution de la solution échantillon obtenue à partir de l’étape (1) par une solution tampon sans floculant colloïdal, ce qui permet de préparer une solution tampon comprenant des vésicules membranaires ; et (3) une étape de séparation des vésicules membranaires comprises dans la solution tampon obtenue à partir de l’étape (2) par centrifugation par gradient de densité. L'invention concerne également une population de vésicules membranaires séparée et purifiée d’une solution échantillon, dans laquelle : les vésicules membranaires comprises dans la population de vésicules membranaires sont dispersées ; et (i) les vésicules membranaires comprises dans la population de vésicules membranaires conservent une charge de surface lorsque présentes dans la solution échantillon avant la séparation et la purification, (ii) les vésicules membranaires comprises dans la population de vésicules membranaires conservent leur forme lorsqu’elles sont présentes dans la solution échantillon avant la séparation et la purification, et/ou (iii) la population de vésicules membranaires conserve un profil de distribution granulométrique lorsque présente dans la solution échantillon avant la séparation et la purification.
(JA) (1)膜小胞を含む試料溶液を限外濾過処理する工程と、(2)前記(1)の工程により得られた試料溶液を、コロイド凝集剤を含まない緩衝液により置換する工程と、これにより、膜小胞を含む緩衝溶液が調製され、(3)前記(2)の工程により得られた緩衝溶液に含まれる膜小胞を、密度勾配遠心により分離する工程とを含む、膜小胞集団の調製方法を提供する。また、試料溶液から分離精製された膜小胞集団であって、前記膜小胞集団に含まれる膜小胞が分散されており、かつ、(i)前記膜小胞集団に含まれる膜小胞が、分離精製前の前記試料溶液中に存在したときの表面電荷を維持している、(ii)前記膜小胞集団に含まれる膜小胞が、分離精製前の前記試料溶液中に存在したときの形態を維持している、および/または(iii)前記膜小胞集団が、分離精製前の前記試料溶液中に存在したときの粒径分布パターンを維持している膜小胞集団を提供する。
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DJ, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KH, KN, KP, KR, KW, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
African Regional Intellectual Property Organization (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Office (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
European Patent Office (EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Publication Language: Japanese (JA)
Filing Language: Japanese (JA)