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1. (WO2017150363) HIGHLY FUNCTIONAL LIVER CELLS, AND USE THEREOF
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Pub. No.: WO/2017/150363 International Application No.: PCT/JP2017/007025
Publication Date: 08.09.2017 International Filing Date: 24.02.2017
IPC:
C12N 5/10 (2006.01)
C CHEMISTRY; METALLURGY
12
BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
N
MICRO-ORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICRO-ORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
5
Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
10
Cells modified by introduction of foreign genetic material, e.g. virus-transformed cells
Applicants:
米満 吉和 YONEMITSU Yoshikazu [JP/JP]; JP
株式会社ガイアバイオメディシン GAIA BIOMEDICINE INC. [JP/JP]; 福岡県福岡市中央区警固1-10-9-903 1-10-9-903, Kego, Chuo-ku, Fukuoka-shi, Fukuoka 8100023, JP
Inventors:
米満 吉和 YONEMITSU Yoshikazu; JP
原田 結 HARADA Yui; JP
齊藤 智 SAITO Satoru; JP
Agent:
特許業務法人特許事務所サイクス SIKS & CO.; 東京都中央区京橋一丁目8番7号 京橋日殖ビル8階 8th Floor, Kyobashi-Nisshoku Bldg., 8-7, Kyobashi 1-chome, Chuo-ku, Tokyo 1040031, JP
Priority Data:
2016-03751829.02.2016JP
Title (EN) HIGHLY FUNCTIONAL LIVER CELLS, AND USE THEREOF
(FR) CELLULES HÉPATIQUES HAUTEMENT FONCTIONNELLES ET UTILISATION CORRESPONDANTE
(JA) 高機能肝細胞及びその利用
Abstract:
(EN) The present invention addresses the problem of obtaining, from iPS cells, highly functional liver cells which exhibit high ammonia metabolic function, and which are theoretically capable of infinite proliferation. Provided is a method for producing artificial liver cells which includes: a differentiation induction step 1 in which iPS cells are cultured in a differentiation induction medium I including Activin A; a differentiation induction step 2 in which the cells obtained from differentiation induction step 1 are cultured in a differentiation induction medium II including bone morphogenetic protein 4 (BMP4) and fibroblast growth factor 2 (FGF2); and a differentiation induction step 3 in which the cells obtained from differentiation induction step 2 are cultured in a differentiation induction medium III including hepatocyte growth factor (HGF), Oncostatin M, Dexamethasone, and N, N'-(methylenebis(4, 1-phenylene))diacetamide (FH1) and/or 2-(N-(5-chloro-2-methylphenyl)(methylsulfonamido)-N-(2, 6-difluorophenyl)-acetamide (FPH1), to obtain the artificial liver cells. The resultant artificial liver cells exhibit ammonia metabolic function of at least 100 µg/dl/24h, and are capable of forming a network structure.
(FR) Le problème à la base de la présente invention concerne l'obtention, à partir de cellules souches pluripotentes induites (iPS), de cellules hépatiques hautement fonctionnelles qui présentent une fonction métabolique élevée de l'ammoniaque et théoriquement capables de prolifération infinie. L'invention concerne un procédé de production de cellules hépatiques artificielles qui comprend : une étape 1 d'induction de différenciation, dans laquelle des cellules iPS sont cultivées dans un milieu I d'induction de différenciation comprenant de l'activine A ; une étape 2 d'induction de différenciation, dans laquelle les cellules obtenues à partir de l'étape 1 d'induction de différenciation sont cultivées dans un milieu II d'induction de différenciation comprenant une protéine 4 morphogénétique osseuse (BMP4) et le facteur 2 de croissance des fibroblastes (FGF2) ; et une étape 3 d'induction de différenciation, dans laquelle les cellules obtenues à partir de l'étape 2 d'induction de différenciation sont cultivées dans un milieu III d'induction de différenciation comprenant le facteur de croissance hépatocytaire (HGF), de l'oncostatine M, de la dexaméthasone et du N,N'- (méthylènebis(4,1-phénylène))-diacétamide (FH1) et/ou du 2-(N-(5-chloro-2-méthylphényl) (méthylsulfonamido)-N-(2,6-difluorophényl)-acétamide (FPH1), afin d'obtenir les cellules hépatiques artificielles. Les cellules hépatiques artificielles obtenues présentent une fonction métabolique de l'ammoniaque d'au moins 100 µg/dl/24h et sont capables de former une structure de réseau.
(JA) アンモニア代謝機能が高く、理論的に無限増殖可能な高機能肝細胞を、iPS細胞から得ることを課題とする。以下の工程含む、人工肝細胞の製造方法を提供する: iPS細胞を、Activin Aを含む分化誘導メディウムIで培養する、分化誘導工程1; 分化誘導工程1から得た細胞を、骨形成タンパク質4(BMP4)及び線維芽細胞増殖因子2(FGF2)を含む分化誘導メディウムIIで培養する、分化誘導工程2;及び 分化誘導工程2から得た細胞を、肝細胞成長因子(HGF)、Oncostatin M、Dexamethasone、並びにN,N'-(Methylenebis(4,1-phenylene))diacetamide(FH1)及び/又は2-(N-(5-Chloro-2-methylphenyl)(methylsulfonamido)-N-(2,6-difluorophenyl)-acetamide(FPH1) を含む分化誘導メティウムIIIで培養して人工肝細胞を得る、分化誘導工程3。得られた人工肝細胞は、100μg/dl/24h以上のアンモニア代謝機能を有し、かつ網状構造体を構成可能である。
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Publication Language: Japanese (JA)
Filing Language: Japanese (JA)