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1. (WO2017036138) A-GROUP NEISSERIA MENINGITIDIS CAPSULE CRUDE POLYSACCHARIDE PURIFICATION PROCESS
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Pub. No.: WO/2017/036138 International Application No.: PCT/CN2016/078084
Publication Date: 09.03.2017 International Filing Date: 31.03.2016
IPC:
C08B 37/00 (2006.01)
C CHEMISTRY; METALLURGY
08
ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
B
POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
37
Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/-C08B35/110; Derivatives thereof
Applicants:
成都欧林生物科技股份有限公司 CHENGDU OLYMVAX BIOPHARMACEUTICAL CO.,LTD [CN/CN]; 中国四川省成都市 高新区天欣路99号 No.99, Tianxin Road, Hi-Tech Zone Chengdu, Sichuan 610000, CN
Inventors:
朱冲 ZHU, Chong; CN
米强 MI, Qiang; CN
陈道远 CHEN, Daoyuan; CN
Agent:
成都金英专利代理事务所 CHENGDU JINYING PATENT FIRM; 中国四川省成都市 青羊区光华东三路489号西环广场1栋12层 12/F, Bldg 1, Xihuan Plaza No.489, the Third Guanghua Eastern Road, Qingyang District Chengdu, Sichuan 610072, CN
Priority Data:
201510543237.931.08.2015CN
Title (EN) A-GROUP NEISSERIA MENINGITIDIS CAPSULE CRUDE POLYSACCHARIDE PURIFICATION PROCESS
(FR) PROCÉDÉ DE PURIFICATION DE POLYSACCHARIDE BRUT DE CAPSULE DE NEISSERIA MENINGITIDIS DU GROUPE A
(ZH) A群脑膜炎球菌荚膜粗多糖纯化工艺
Abstract:
(EN) Disclosed is an A-group Neisseria meningitidis capsule crude polysaccharide purification process, capable of resolving the problems of low purification efficiency of crude polysaccharide and relatively low acquisition rate of refined polysaccharide in the prior art. The present invention comprises the following steps: (1) dissolving crude polysaccharide into a 8%-12% saturated neutral sodium acetate solution, adding a cold phenol solution according to a volume ratio of 1:0.8-1.2, collecting supernate centrifugally after the mixture is oscillated and mixed uniformly, and performing extraction for one to three times to enable the supernate to be clarified; (2) collecting the supernate, and performing ultra-filtration by using an ultra-filtration membrane module; (3) adding a NaC1 solution to a polysaccharide solution after ultra-filtration is performed until the final concentration of NaCl is 0.2-0.4 mol/L, adding ethyl alcohol until the final concentration by volume of the ethyl alcohol is 70-78%, and making the mixture stand overnight at the temperature of 2-8°C after being mixed fully and uniformly; and (4) centrifugally collecting a precipitate, sequentially washing twice by using absolute ethyl alcohol and acetone, and drying to obtain refined polysaccharide. The present invention has the advantages of high recovery rate, high purity and the like.
(FR) L'invention concerne un procédé de purification de polysaccharide brut de capsule de Neisseria meningitidis du groupe A, permettant de résoudre les problèmes liés à la faible efficacité de purification de polysaccharide brut et au taux d'acquisition relativement faible de polysaccharide raffiné des antériorités. Le procédé selon l'invention consiste : (1) à dissoudre un polysaccharide brut dans une solution d'acétate de sodium neutre saturée à 8-12 %, à ajouter une solution de phénol froide selon un rapport de volume de 1 : 0,8-1,2, à recueillir par centrifugation du surnageant après que le mélange a été mis en oscillation et mélangé uniformément et à réaliser une extraction de une à trois fois afin de permettre la décantation du surnageant ; (2) à recueillir le surnageant et à réaliser une ultra-filtration au moyen d'un module membrane d'ultrafiltration ; (3) à ajouter une solution de NaCl à une solution de polysaccharide après l'ultra-filtration, jusqu'à ce que la concentration finale de NaCl soit comprise entre 0,2 et 0,4 mol/L, à ajouter de l'alcool éthylique jusqu'à ce que la concentration finale par volume d'alcool éthylique soit comprise entre 70 et 78 % et à laisser reposer le mélange pendant une nuit à une température comprise entre 2 et 8 °C, après qu'il a été mélangé entièrement et uniformément ; et (4) à recueillir par centrifugation un précipité, à le laver deux fois successivement au moyen d'alcool éthylique absolu et d'acétone et à le sécher pour obtenir un polysaccharide raffiné. La présente invention présente les avantages d'un taux de récupération élevé, d'une pureté élevée et analogue.
(ZH) 本发明公开的是A群脑膜炎球菌荚膜粗多糖纯化工艺,解决了现有技术中粗多糖的纯化效率不高、精糖的获取率较低的问题。本发明包括以下步骤:(1)将粗多糖溶解于8%~12%饱和中性醋酸钠溶液中,然后按体积比为1:0.8~1.2的比例加入冷酚溶液,振荡混匀后离心收集上清液,并抽提1~3次使上清液澄清;(2)收集上清液,用超滤膜包进行超滤;(3)在超滤后的多糖溶液中加入NaCl溶液,直至NaCl终浓度为0.2~0.4mol/L,再加入乙醇至乙醇体积终浓度为70~78%,充分混匀后2~8℃静置过夜;(4)离心收集沉淀,然后依次用无水乙醇、丙酮各洗涤两次,干燥后即为精糖。本发明具有回收率高、纯度高等优点。
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
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European Patent Office (EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Publication Language: Chinese (ZH)
Filing Language: Chinese (ZH)