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1. WO2016139279 - Constitutive yeast LLP promoter-based expression system

Publication Number WO/2016/139279
Publication Date 09.09.2016
International Application No. PCT/EP2016/054478
International Filing Date 02.03.2016
IPC
C07K 14/395 2006.01
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
14Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
37from fungi
39from yeasts
395from Saccharomyces
CPC
C07K 14/39
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
14Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
37from fungi
39from yeasts
C07K 14/395
CCHEMISTRY; METALLURGY
07ORGANIC CHEMISTRY
KPEPTIDES
14Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
37from fungi
39from yeasts
395from Saccharomyces
C12N 15/81
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
80for fungi
81for yeasts
Applicants
  • SANDOZ AG [CH]/[CH]
Inventors
  • ACHMÜLLER, Clemens
  • ZEPECK, Ferdinand
  • HARTNER, Franz
  • SPECHT, Thomas
Agents
  • PRÜFER & PARTNER MBB PATENTANWÄLTE RECHTSANWÄLTE
Priority Data
15157284.903.03.2015EP
Publication Language English (EN)
Filing Language English (EN)
Designated States
Title
(EN) Constitutive yeast LLP promoter-based expression system
(FR) SYSTÈME D'EXPRESSION BASÉ SUR LE PROMOTEUR LLP CONSTITUTIF DE LA LEVURE
Abstract
(EN)
The present invention belongs to the field of biotechnology, recombinant protein production, molecular biology, microbiology and microbial genetics. It provides a modified eukaryotic cell that is modified to the effect that the modified eukaryotic cell is not able to provide an SSN6- like related protein or an SSN6-like protein that exerts its wildtype function and/or wildtype activity, the amount of SSN6-like related protein or of SSN6-like protein being present in the modified eukaryotic cell differs from the amount of SSN6-like related protein or of SSN6-like protein being present in its wildtype form, and/or essentially no SSN6-like related protein or SSN6-like protein is present in the modified cell. Additionally, the present invention provides a polynucleotide sequence comprising a modified ssn6-like related gene or modified ssn6-like gene, and a vector comprising said polynucleoptide. Additionally provided is an expression vector comprising a promoter that is repressed in the presence of SSN6-like protein or SSN6- like related protein, and a host cell comprising said vectors. The present invention further refers to a method for determining the purity of a composition by using the modified eukaryotic cell, to a method of expressing gene(s) of interest, and eukaryotic cells comprising modified ssn6- like related gene or ssn6-like gene.
(FR)
Cette invention relève du domaine de la biotechnologie, de la production de protéines recombinées, de la biologie moléculaire, de la microbiologie et de la génétique microbienne. Elle concerne une cellule eucaryote modifiée qui est modifiée au point que la cellule eucaryote modifiée n'est pas en mesure de produire une protéine apparentée de type SSN6 ou une protéine de type SSN6 qui exerce sa fonction de type sauvage et/ou son activité de type sauvage, la quantité de protéine apparentée de type SSN6 ou de protéine de type SSN6 présente dans la cellule eucaryote modifiée différant de la quantité de protéine apparentée de type SSN6 ou de protéine de type SSN6 sous sa forme sauvage, et/ou au point qu'il n'y a sensiblement pas de protéine apparentée de type SSN6 ou de protéine de type SSN6 présente dans la cellule modifiée. De plus, la présente invention concerne une séquence de polynucléotides comprenant un gène apparenté de type ssn6 modifié ou un gène de type ssn6 modifié, et un vecteur comprenant ledit polynucléotide, ainsi qu'un vecteur d'expression comprenant un promoteur qui est réprimé en présence de la protéine de type SSN6 ou de la protéine apparentée de type SSN6, et une cellule hôte comprenant lesdits vecteurs. Un procédé permettant de déterminer la pureté d'une composition à l'aide de la cellule eucaryote modifiée, un procédé d'expression de gène(s) d'intérêt, et des cellules eucaryotes comprenant le gène apparenté de type ssn6 ou le gène de type ssn6 modifié sont en outre décrits.
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