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1. (WO2016095326) CONSTRUCTION METHOD FOR OCH1-DEFECTIVE ANTI-CD20 TETRAVALENT ANTIBODY EXPRESSION PICHIA PASTORIS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2016/095326    International Application No.:    PCT/CN2015/071605
Publication Date: 23.06.2016 International Filing Date: 27.01.2015
IPC:
C12N 15/81 (2006.01), C12N 1/19 (2006.01), C12P 21/00 (2006.01), C07K 16/46 (2006.01), C07K 19/00 (2006.01), C12R 1/84 (2006.01)
Applicants: BEIJING JIZHI XINCHUANG TECHNOLOGY CO., LTD. [CN/CN]; Room 1001, Unit 5, Building 2 Yard 36, Guangqumen North Lane Dongcheng District, Beijing 100062 (CN)
Inventors: LI, yunSen; (CN).
ZHU, Tingting; (CN).
WANG, Liping; (CN).
HE, Yun; (CN)
Agent: BEIJING KEYI INTELLECTUAL PROPERTY FIRM; Hejingyuan No. 1-2-502 Jimenli, Haidian District Beijing 100088 (CN)
Priority Data:
201410783657.X 16.12.2014 CN
Title (EN) CONSTRUCTION METHOD FOR OCH1-DEFECTIVE ANTI-CD20 TETRAVALENT ANTIBODY EXPRESSION PICHIA PASTORIS
(FR) PROCÉDÉ DE CONSTRUCTION D'UNE SOUCHE DE PICHIA PASTORIS DÉFECTUEUSE EN GÈNE OCH1 POUR L'EXPRESSION D'UN ANTICORPS TÉTRAVALENT ANTI-CD20
(ZH) 一种OCH1缺陷型抗CD20四价抗体表达毕赤酵母的构建方法
Abstract: front page image
(EN)Provided is a construction method for OCH1-defective anti-CD20 tetravalent antibody expression Pichia pastoris, comprising: knocking out an OCH1 encoded α-1, 6-mannosyltransferase of a strain JC308; connecting the modified och1 with no expression ability to a pPICZαA with a screening marker; introducing a wild Pichia pastoris JC308, and after homologous recombination, screening to obtain an OCH1-defective strain, namely Δoch1; connecting a synthesized anti-CD20 tetravalent antibody sequence to a Pichia pastoris expression plasmid pPIC9, then introducing into the OCH1 gene-defective strain Δoch1 to obtain the anti-CD20 tetravalent antibody expression strain.
(FR)Cette invention concerne un procédé de construction d'une souche de Pichia pastoris défectueuse en gène OCH1 pour l'expression d'un anticorps tétravalent anti-CD20, comprenant : la désactivation d'une α-1,6-mannosyltransférase codée par le gène OCH1 d'une souche JC308; la liaison de l'och1 modifié sans capacité d'expression à un pPICZαA à l'aide d'un marqueur de dépistage; l'introduction d'une souche de Pichia pastoris JC308 de type sauvage, et après recombinaison homologue, le criblage pour identifier une souche défectueuse en gène OCH1, à savoir Δoch1; la liaison d'une séquence d'anticorps tétravalent anti-CD20 synthétisée à un plasmide d'expression pPIC9 de Pichia pastoris, puis son introduction dans la souche Δoch1 défectueuse en gène OCH1 pour obtenir la souche pour l'expression de l'anticorps tétravalent anti-CD20.
(ZH)提供了一种OCH1缺陷型抗CD20四价抗体表达毕赤酵母的构建方法,首先将菌株JC308的编码α-1,6-甘露糖转移酶的OCH1敲除,将改造后的无表达能力的och1与筛选标记连入pPICZαA中,导入野生型毕赤酵母JC308,经同源重组后筛选得到OCH1缺陷型菌株,即Δoch1,然后将合成的抗CD20四价抗体的序列与毕赤酵母表达质粒pPIC9相连,导入OCH1基因缺陷菌株Δoch1中获得该抗CD20四价抗体表达菌株。
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, ST, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
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African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: Chinese (ZH)
Filing Language: Chinese (ZH)