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1. (WO2014206219) RNA FRAGMENT, PREPARATION METHOD THEREFOR, AND USE THEREOF
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2014/206219    International Application No.:    PCT/CN2014/080069
Publication Date: 31.12.2014 International Filing Date: 17.06.2014
Chapter 2 Demand Filed:    07.01.2015    
IPC:
C12Q 1/68 (2006.01), C12N 15/10 (2006.01)
Applicants: PENGEKIPHEN BIOTECH LIMITED [CN/CN]; Chenfeng Road 209, New & Hi-tech Industrial Development Zone Kunshan, Jiangsu 215300 (CN)
Inventors: PENG, Changgeng; (CN).
WEN, Ting; (CN)
Agent: RUNPING & PARTNERS; Suite 515, Yingu Mansion, No.9 Beisihuanxilu, Haidian District Beijing 100190 (CN)
Priority Data:
201310263324.X 27.06.2013 CN
Title (EN) RNA FRAGMENT, PREPARATION METHOD THEREFOR, AND USE THEREOF
(FR) FRAGMENT D'ARN, PROCÉDÉ POUR LE PRÉPARER ET SON UTILISATION
(ZH) 一种RNA片段及其制备方法和用途
Abstract: front page image
(EN)A preparation method for an RNA fragment is disclosed. The method comprises: (1) obtaining chemically-synthesized double-stranded DNA; (2) cloning said chemically-synthesized double-stranded DNA into a vector so as to obtain a plurality of cloned amplified plasmids, and performing DNA sequencing on each of the plurality of cloned amplified plasmids; selecting, as a template plasmid, a clone of an amplified plasmid that can fully and accurately encode a target RNA fragment; (3) cleaving the template plasmid to obtain a cleaved product, and separating from the cleaved product a transcriptional template fragment that can fully and accurately encode a target RNA fragment; (4) performing in vitro transcription on said transcriptional template fragment, and obtaining a transcribed product. The present invention also provides an RNA fragment prepared and obtained by means of said method, and a use of said fragment. The present invention greatly improves the total accuracy and uniformity of the prepared RNA fragment with respect to the sequencing and length thereof.
(FR)L'invention concerne un procédé de préparation d'un fragment d'ARN. Le procédé comprend les étapes suivantes : (1) obtenir un ADN double brin synthétisé chimiquement; (2) cloner ledit ADN double brin synthétisé chimiquement en un vecteur de manière à obtenir une pluralité de plasmides amplifiés clonés et effectuer le séquençage de l'ADN sur chacun de la pluralité de plasmides amplifiés clonés; sélectionner, en tant que matrice de plasmide, un clone d'un plasmide amplifié qui peut coder entièrement et de façon précise un fragment d'ARN cible; (3) cliver la matrice de plasmide pour obtenir un produit clivé et séparer du produit clivé un fragment de matrice de transcription qui peut coder entièrement et de façon précise un fragment d'ARN cible; (4) effectuer une transcription in vitro sur ledit fragment de matrice de transcription, et obtenir un produit transcrit. La présente invention concerne également un fragment d'ARN préparé et obtenu au moyen dudit procédé, ainsi que l'utilisation dudit fragment. La présente invention améliore considérablement la précision totale et l'homogénéité du fragment d'ARN préparé en termes de séquençage et de longueur.
(ZH)本发明公开了一种制备RNA片段的方法,该方法包括:(1)获得化学合成的双链DNA;(2)将所述化学合成的双链DNA片段克隆至载体中以得到多个克隆的扩增质粒,并分别对多个克隆的扩增质粒进行DNA测序;挑选能够完全正确编码目的RNA片段的扩增质粒的克隆作为模板质粒;(3)对模板质粒进行酶切,得到酶切产物,并从酶切产物中分离能够完全正确编码目的RNA片段的转录模板片段;(4)对所述转录模板片段进行体外转录,得到转录产物。本发明还提供了如上所述的方法制备得到的RNA片段及其用途。本发明大幅度地提高了制备的RNA片段在序列和长度上的完全正确性和均一度。
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: Chinese (ZH)
Filing Language: Chinese (ZH)