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1. (WO2014180566) METHOD AND APPARATUS FOR COMBINATION OF LOCALIZATION MICROSCOPY AND STRUCTURED ILLUMINATION MICROSCOPY
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2014/180566    International Application No.:    PCT/EP2014/001228
Publication Date: 13.11.2014 International Filing Date: 07.05.2014
IPC:
G02B 21/00 (2006.01), G01N 21/64 (2006.01), G02B 21/16 (2006.01), G02B 21/36 (2006.01), G02B 27/58 (2006.01)
Applicants: RUPRECHT-KARLS-UNIVERSITÄT HEIDELBERG [DE/DE]; Grabengasse 1 69117 Heidelberg (DE)
Inventors: BEST, Gerrit; (DE).
CREMER, Christoph; (DE).
ROSSBERGER, Sabrina; (DE).
DITHMAR, Stefan; (DE)
Agent: SCHIUMA, Daniele; Müller-Boré & Partner Patentanwälte PartG mbB Friedenheimer Brücke 21 80639 München (DE)
Priority Data:
13002490.4 10.05.2013 EP
Title (EN) METHOD AND APPARATUS FOR COMBINATION OF LOCALIZATION MICROSCOPY AND STRUCTURED ILLUMINATION MICROSCOPY
(FR) PROCÉDÉ ET APPAREIL POUR COMBINER UNE MICROSCOPIE DE LOCALISATION ET UNE MICROSCOPIE PAR ÉCLAIRAGE STRUCTURÉ
Abstract: front page image
(EN)The invention relates to a fluorescent microscope and a respective method for obtaining super-resolution images of a sample labelled with at least one type fluorescent label by combining localization microscopy and structured illumination microscopy. In an aspect, the fluorescent microscope comprises one or more light sources and an illumination system having a structured illumination path, in which a pattern generation system is positioned, for illuminating the sample with structured illumination light and a localization illumination path for illuminating the sample with localization illumination light. A switching mechanism is configured to switch between a first, a second and/or a third mode, wherein in the first mode at least a portion of the light emitted from the one or more light sources propagates through one of the illumination paths; in the second mode at least a portion of the light emitted from the one or more light sources propagates through the other one of the illumination paths; and in the third mode at least a portion of the light emitted from one or more of the light sources propagates through one illumination path while simultaneously at least another portion of the light emitted from one or more of the light sources propagates through the other illumination path. At least one image detector positioned in an optical detection path, configured to detect at least a portion of fluorescent light emitted from fluorescent molecules of the illuminated sample. Another aspect concerns a method for obtaining super-resolution image data of a sample labeled with at least one type of fluorescent label comprising illuminating the sample with localization illumination light and with structured illumination light; detecting at least a portion of the fluorescent light emitted from the excited fluorescent molecules of the at least one fluorescent label, thereby obtaining at least one image of the illuminated sample; and processing the obtained at least one image of the sample image to obtain super-resolution image data.
(FR)L'invention concerne un microscope fluorescent et un procédé respectif permettant d'obtenir des images super-résolution d'un échantillon étiqueté avec au moins un type d'étiquette fluorescente par combinaison d'une microscopie de localisation et d'une microscopie par éclairage structuré. Selon un aspect, le microscope fluorescent comprend une ou plusieurs source(s) de lumière et un système d'éclairage doté d'un chemin d'éclairage structuré, dans lequel un système de génération de motifs est positionné, pour éclairer l'échantillon avec la lumière d'éclairage structuré, et d'un chemin d'éclairage de localisation pour éclairer l'échantillon avec la lumière d'éclairage de localisation. Un mécanisme de commutation est conçu pour passer à un premier, un deuxième et/ou un troisième mode. Dans le premier mode, au moins une partie de la lumière émise par la ou les source(s) de lumière se propage à travers l'un des chemins d'éclairage; dans le deuxième mode, au moins une partie de la lumière émise par la ou les source(s) de lumière se propage à travers l'autre des chemins d'éclairage; et dans le troisième mode, au moins une partie de la lumière émise par la ou les source(s) de lumière se propage à travers un chemin d'éclairage pendant que simultanément au moins l'autre partie de la lumière émise par la ou les source(s) de lumière se propage à travers l'autre chemin d'éclairage. Au moins un détecteur d'image positionné dans un chemin de détection optique, est conçu pour détecter au moins une partie de la lumière fluorescente émise par les molécules fluorescentes de l'échantillon éclairé. Un autre aspect concerne un procédé pour obtenir des données d'image super-résolution de l'échantillon étiqueté avec au moins un type d'étiquette fluorescente consistant à éclairer l'échantillon avec la lumière d'éclairage et avec la lumière d'éclairage structuré; à détecter au moins une partie de la lumière fluorescente émise par les molécules fluorescentes excitées de la ou des étiquette(s) fluorescente(s), ce qui permet d'obtenir au moins une image de l'échantillon éclairé; et à traiter au moins l'image obtenue de l'image d'échantillon afin d'obtenir des données d'image super-résolution.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BN, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IR, IS, JP, KE, KG, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PA, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SA, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, KM, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)