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1. (WO2012123588) METHOD, PROBE AND KIT FOR DNA IN SITU HYBRIDATION AND USE THEREOF
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.: WO/2012/123588 International Application No.: PCT/EP2012/054739
Publication Date: 20.09.2012 International Filing Date: 16.03.2012
IPC:
C12Q 1/68 (2006.01) ,G01N 33/50 (2006.01)
Applicants: CHATRE, Laurent, Arnaud[FR/FR]; FR (UsOnly)
RICCHETTI, Miria[IT/FR]; FR (UsOnly)
INSTITUT PASTEUR[FR/FR]; 25-28 rue du Docteur Roux F-75724 Paris Cedex 15, FR (AllExceptUS)
CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE[FR/FR]; 3 rue Michel-Ange F-75794 Paris Cedex 16, FR (AllExceptUS)
Inventors: CHATRE, Laurent, Arnaud; FR
RICCHETTI, Miria; FR
Agent: GUTMANN, Ernest; ERNEST GUTMANN-YVES PLASSERAUD S.A.S. 3 rue Auber F-75009 PARIS, FR
Priority Data:
11290139.217.03.2011EP
Title (EN) METHOD, PROBE AND KIT FOR DNA IN SITU HYBRIDATION AND USE THEREOF
(FR) PROCÉDÉ, SONDE ET TROUSSE POUR L'HYBRIDATION IN SITU D'ADN ET LEUR UTILISATION
Abstract:
(EN) The invention relates to a method for the detection of the occurrence of initiation of replication events in genomic DNA in a eukaryotic cell, involving contacting said eukaryotic cell comprising said genomic DNA with a first nucleotide probe, under conditions enabling in situ hybridization of said first nucleotide probe with a target region in the DNA genome, wherein said target region comprises a nucleic acid sequence which has no identified corresponding annealing RNA in a metabolically active cell and therefore remains RNA-free during transcription and replication of said DNA genome and detecting said first nucleotide probe hybridized to said DNA. Further detection of at least one RNA molecule can be achieved. The invention also relates to a nucleic acid molecule suitable for use as a probe, hybridizing with a target region in a eukaryotic genomic DNA, and comprising a nucleic acid sequence which has no identified corresponding annealing RNA in the metabolically active cell containing said eukaryotic genomic DNA and therefore remains RNA-free during transcription and replication of said DNA genome. The invention also encompasses kit(s) for carrying out in situ hybridization and use of the method(s), nucleic acid molecule(s) or kit(s) of the invention in the detection of mitochondrial disease(s), neoplasic diseases(s) or cancer(s), or in the testing of the cytotoxicity of organic or chemical compounds, especially drugs, on eukaryotic cells.
(FR) L'invention concerne un procédé de détection de l'occurrence d'une initiation d'événements de réplication dans l'ADN génomique dans une cellule eucaryote, mettant en jeu la mise en contact de ladite cellule eucaryote comprenant ledit ADN génomique avec une première sonde nucléotidique, dans des conditions permettant l'hybridation in situ de ladite première sonde nucléotidique avec une région cible dans l'ADN génomique, ladite région cible comprenant une séquence d'acide nucléique qui n'a pas d'ARN s'hybridant correspondant identifié dans une cellule métaboliquement active et, par conséquent, restant exempt d'ARN au cours de la transcription et de la réplication dudit ADN génomique, et la détection de ladite première sonde nucléotidique hybridée audit ADN. Une détection supplémentaire d'au moins une molécule d'ARN peut être réalisée. L'invention concerne également une molécule d'acide nucléique adaptée pour l'utilisation en tant que sonde, s'hybridant avec une région cible dans un ADN génomique eucaryote et comprenant une séquence d'acide nucléique qui n'a pas d'ARN s'hybridant correspondant identifié dans la cellule métaboliquement active contenant ledit ADN génomique eucaryote et, par conséquent, restant exempte d'ARN au cours de la transcription et de la réplication dudit ADN génomique. L'invention concerne également une ou des trousses pour la mise en œuvre de l'hybridation in situ et l'utilisation du ou des procédés, de la ou des molécules d'acide nucléique ou de la ou des trousses de l'invention dans la détection d'une ou plusieurs maladies mitochondriales, d'une ou plusieurs maladies néoplasiques ou d'un ou plusieurs cancers, ou dans le test de cytotoxicité de composés organiques ou chimiques, en particulier de médicaments, sur des cellules eucaryotes.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PE, PG, PH, PL, PT, QA, RO, RS, RU, RW, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
African Regional Intellectual Property Organization (ARIPO) (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, RW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Office (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (EPO) (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)