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1. (WO2012052068) METHOD AND PROBE FOR MONITORING OXYGEN STATUS IN LIVE MAMMALIAN CELLS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2012/052068    International Application No.:    PCT/EP2010/066006
Publication Date: 26.04.2012 International Filing Date: 22.10.2010
Chapter 2 Demand Filed:    14.09.2011    
IPC:
G01N 33/50 (2006.01), G01N 33/84 (2006.01), G01N 33/58 (2006.01), G01N 31/22 (2006.01)
Applicants: UNIVERSITY COLLEGE CORK, NATIONAL UNIVERSITY OF IRELAND, CORK [IE/IE]; Western Road Cork (IE) (For All Designated States Except US).
PAPKOVSKY, Dmitri [IE/IE]; (IE) (For US Only).
FERCHER, Andreas [AT/IE]; (IE) (For US Only).
KLIMANT, Ingo [DE/AT]; (AT) (For US Only).
BORISOV, Sergey [RU/AT]; (AT) (For US Only).
ZHDANOV, Alexander [RU/IE]; (IE) (For US Only)
Inventors: PAPKOVSKY, Dmitri; (IE).
FERCHER, Andreas; (IE).
KLIMANT, Ingo; (AT).
BORISOV, Sergey; (AT).
ZHDANOV, Alexander; (IE)
Agent: PURDY, Hugh Barry; PURDYLUCEY Intellectual Property 6-7 Harcourt Terrace Dublin 2 (IE)
Priority Data:
Title (EN) METHOD AND PROBE FOR MONITORING OXYGEN STATUS IN LIVE MAMMALIAN CELLS
(FR) PROCÉDÉ ET SONDE POUR SURVEILLER L'ÉTAT DE L'OXYGÈNE DANS DES CELLULES VIVANTES DE MAMMIFÈRES
Abstract: front page image
(EN)The invention is based on the use of photoluminescent probes for intracellular sensing of oxygen, especially assaying intracellular oxygen concentration. The photoluminescent probe comprises a suspension of polymeric particles having an average diameter in the 20nm to 100nm range, formed from an amphiphilic cationic co-polymer which is oriented in the formed particle to provide a hydrophobic core and a hydrophilic shell. The probe includes a hydrophobic oxygen-sensitive photoluminescent dye such as Pt-tetrakis (pentafluorophenyl) porphine, PtPFPP embedded in the hydrophobic core of the particle, and the co-polymer includes quaternary ammonium groups which provide hydrophilic and cationic character to the particle shell. The photoluminescent probe, which in use is provided in the form of an aqueous suspension of probe, is incubated with live mammalian cells in a suitable growth medium for a period of time to allow the probe particles passively load into the cells. Oxygen can then be sensed by detecting a photoluminescent signal of the photoluminescent probe, which can be correlated with oxygen status, for example oxygen concentration or changes in oxygen concentration/levels, using existing techniques.
(FR)L'invention se base sur l'utilisation de sondes photoluminescentes pour détecter l'oxygène intracellulaire, notamment, doser la concentration d'oxygène intracellulaire. La sonde photoluminescente comprend une suspension de particules polymères ayant un diamètre moyen dans la plage de 20 à 100 nm, formées à partir d'un copolymère cationique amphiphile qui est orienté dans la particule formée de manière à obtenir un cœur hydrophobe et une coque hydrophile. La sonde comprend un colorant photoluminescent hydrophobe sensible à l'oxygène tel que la Pt-tétrakis(pentafluorophényl)- porphine, PtPFPP, incorporé dans le cœur hydrophobe de la particule, et le copolymère comprend des groupes ammonium quaternaire qui confèrent un caractère hydrophile et cationique à la coque de la particule. La sonde photoluminescente, qui en utilisation est fournie sous la forme d'une suspension aqueuse de sonde, est incubée avec des cellules vivantes de mammifères dans un milieu de croissance approprié pendant un certain laps de temps pour permettre aux particules de la sonde de se charger passivement dans les cellules. L'oxygène peut alors être détecté par détection d'un signal photoluminescent de la sonde photoluminescente, qui peut être corrélé à l'état de l'oxygène, par exemple, la concentration d'oxygène ou des variations dans la concentration/les taux d'oxygène, à l'aide de techniques existantes.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PE, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, RS, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)