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1. (WO2012037937) METHOD FOR DETECTING, DIFFERENTIATING, AND QUANTIFYING T CELL POPULATIONS BY MEANS OF REVERSE TRANSCRIPTION QUANTITATIVE REAL-TIME PCR (RT-QPCR) TECHNOLOGY
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Pub. No.: WO/2012/037937 International Application No.: PCT/DE2011/075225
Publication Date: 29.03.2012 International Filing Date: 16.09.2011
IPC:
G01N 33/68 (2006.01) ,G01N 33/50 (2006.01) ,C12Q 1/68 (2006.01)
G PHYSICS
01
MEASURING; TESTING
N
INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
33
Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/-G01N31/131
48
Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
50
Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
68
involving proteins, peptides or amino acids
G PHYSICS
01
MEASURING; TESTING
N
INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
33
Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/-G01N31/131
48
Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
50
Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
C CHEMISTRY; METALLURGY
12
BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
Q
MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES OR MICRO-ORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
1
Measuring or testing processes involving enzymes or micro-organisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
68
involving nucleic acids
Applicants:
DEML, Ludwig [DE/DE]; DE (UsOnly)
NAUMANN, Kristina [DE/DE]; DE (UsOnly)
SCHLOMBS, Kornelia [DE/DE]; DE (UsOnly)
BARABAS, Sascha [DE/DE]; DE (UsOnly)
LOPHIUS BIOSCIENCES GMBH [DE/DE]; Biopark III Josef-Engert-Str. 13 93053 Regensburg, DE (AllExceptUS)
Inventors:
DEML, Ludwig; DE
NAUMANN, Kristina; DE
SCHLOMBS, Kornelia; DE
BARABAS, Sascha; DE
Agent:
DEHMEL & BETTENHAUSEN; Herzogspitalstraße 11 80331 München, DE
Priority Data:
10 2010 037 622.117.09.2010DE
Title (EN) METHOD FOR DETECTING, DIFFERENTIATING, AND QUANTIFYING T CELL POPULATIONS BY MEANS OF REVERSE TRANSCRIPTION QUANTITATIVE REAL-TIME PCR (RT-QPCR) TECHNOLOGY
(FR) PROCÉDÉ POUR DÉTECTER, DIFFÉRENCIER ET QUANTIFIER DES POPULATIONS DE LYMPHOCYTES T AU MOYEN DE LA TECHNOLOGIE DE LA RÉACTION EN CHAÎNE PAR POLYMÉRASE QUANTITATIVE EN TEMPS RÉEL À TRANSCRIPTION INVERSE (RT-QPCR)
(DE) VERFAHREN ZUM NACHWEIS, DIFFERENZIEREN UND QUANTIFIZIEREN VON T-ZELLPOPULATIONEN MITTELS DER REVERSE TRANSKRIPTION QUANTITATIVEN REAL-TIME PCR (RT-QPCR) TECHNOLOGIE
Abstract:
(EN) The invention relates to a method for detecting, differentiating, and quantifying T cell populations, comprising the following steps: a) bringing a first aliquot of a bodily fluid of an individual in contact with at least one antigen, wherein the bodily fluid contains antigen-presenting cells (APCs) and T cells, b) incubating the first aliquot with the at least one antigen over a certain time period, c) detecting and differentiating the T cell populations by detecting at least one first marker of the APCs induced by the T cells of a certain T cell population in the first aliquot and in a second aliquot of the bodily fluid of the individual, which was not incubated with the at least one antigen, by means of reverse transcription quantitative real-time polymerase chain reaction (RT-qPCR), and d) detecting and quantifying the T cell populations by determining the ratio of the detected markers of the APCs of the first aliquot to the second aliquot. The invention further relates to a kit for carrying out the method.
(FR) L'invention concerne un procédé pour détecter, différencier et quantifier des populations de lymphocytes T, comprenant les étapes qui consistent : a) à mettre en contact une première aliquote d'un liquide organique d'un individu avec au moins un antigène, ledit liquide organique contenant des cellules présentatrices d'antigène (CPA) et des lymphocytes T, b) à faire incuber la première aliquote avec l'antigène ou les antigènes pendant une durée spécifique, c) à détecter et différencier les populations de lymphocytes T par détection d'au moins un marqueur de CPA induit par les lymphocytes T d'une population de lymphocytes T spécifique dans la première aliquote et dans une deuxième aliquote du liquide organique dudit individu n'ayant pas fait l'objet d'une incubation avec ledit/lesdits antigène(s), par réaction en chaîne par polymérase quantitative en temps réel à transcription inverse (RT-qPCR), et d) à détecter et quantifier les populations de lymphocytes T par détermination du rapport entre le marqueur de CPA détecté dans la première aliquote et la deuxième aliquote. Cette invention se rapporte en outre à une trousse servant à la mise en oeuvre de ce procédé.
(DE) Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zum Nachweis, Differenzieren und Quantifizieren von T-Zellpopulationen, umfassend die folgenden Schritte a) in Kontakt Bringen eines ersten Aliquots einer Körperflüssigkeit eines Individuums mit mindestens einem Antigen, wobei die Körperflüssigkeit antigenpräsentierende Zellen (APC) und T-Zellen enthält, b) Inkubieren des ersten Aliquots mit dem mindestens einen Antigen über einen bestimmten Zeitraum, c) Nachweis und Differenzieren der T-Zellpopulationen durch Detektieren mindestens eines ersten durch die T-Zellen einer bestimmten T-Zellpopulation induzierten Markers der APC in dem ersten Aliquot und in einem zweiten Aliquot der Körperflüssigkeit des Individuums, das nicht mit dem mindestens einen Antigen inkubiert wurde, durch Reverse Transkription quantitative Real-Time Polymerase Kettenreaktion (RT-qPCR), und d) Nachweis und Quantifizieren der T-Zellpopulationen durch Bestimmen des Verhältnisses des detektierten Markers der APC des ersten Aliquots zu dem zweiten Aliquot sowie ein Kit zur Durchführung des Verfahrens.
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African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG)
Publication Language: German (DE)
Filing Language: German (DE)