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1. (WO2010140066) METHOD OF ALTERING NUCLEIC ACIDS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2010/140066    International Application No.:    PCT/IB2010/002396
Publication Date: 09.12.2010 International Filing Date: 04.06.2010
IPC:
C12N 15/10 (2006.01), C12N 15/90 (2006.01), C12N 15/113 (2010.01)
Applicants: GENE BRIDGES GMBH [DE/DE]; BioInnovationsZentrum Dresden Tatzberg 47-51 01307 Dresden (DE) (For All Designated States Except US).
STEWART, Adrian, Francis [AU/DE]; (DE) (For US Only).
IACONE, Roberto [IT/CH]; (DE) (For US Only).
MARESCA, Marcello [IT/US]; (DE) (For US Only).
ANASTASSIADIS, Konstantinos [GR/DE]; (DE) (For US Only)
Inventors: STEWART, Adrian, Francis; (DE).
IACONE, Roberto; (DE).
MARESCA, Marcello; (DE).
ANASTASSIADIS, Konstantinos; (DE)
Agent: GOODFELLOW, Hugh, Robin; Carpmaels & Ransford One Southampton Row London WC1B 5HA (GB)
Priority Data:
0909660.3 04.06.2009 GB
Title (EN) METHOD OF ALTERING NUCLEIC ACIDS
(FR) PROCÉDÉ DE MODIFICATION D'ACIDES NUCLÉIQUES
Abstract: front page image
(EN)The invention provides a method for altering the sequence of a target nucleic acid molecule to incorporate a replacement nucleic acid sequence. The method comprising the steps of: a) introducing a nucleic acid fragment into the target nucleic acid molecule by homologous recombination, wherein the nucleic acid fragment comprises: i) a first region of homology to the target nucleic acid molecule; ii) a 5' splice site; iii) a selectable marker; iv) a 3' splice site; v) a second region of homology to the target nucleic acid molecule; wherein components i) to v) are ordered from 5' to 3'; and the replacement nucleic acid sequence is positioned within or between the first and second regions of homology but external of the splice sites; b) selecting for the introduction of the nucleic acid fragment using the selectable marker; c) incubating the product of step b) under conditions suitable for a splicing reaction to occur such that the selectable marker is excised and from the target nucleic acid, and thereby generating the desired altered target nucleic acid sequence.
(FR)Cette invention concerne un procédé permettant de modifier la séquence d'une molécule d'acide nucléique cible pour incorporer une séquence d'acide nucléique substitutive. Le procédé comprend les étapes suivantes : a) introduction d'un fragment d'acide nucléique dans la molécule d'acide nucléique cible par recombinaison homologue, le fragment d'acide nucléique comprenant : i) une première région d'homologie à la molécule d'acide nucléique cible ; ii) un site d'épissage 5' ; iii) un marqueur sélectionnable ; iv) un site d'épissage 3' ; v) une seconde région d'homologie à la molécule d'acide nucléique cible ; les composants i) à v) étant ordonnés de 5' à 3' ; et la séquence d'acide nucléique substitutive étant placée à l'intérieur ou entre les première et seconde régions d'homologie mais à l'extérieur des sites d'épissage ; b) sélection pour l'introduction du fragment d'acide nucléique à l'aide du marqueur sélectionnable ; c) incubation du produit de l'étape b) dans des conditions appropriées pour qu'une réaction d'épissage se produise et que le marqueur sélectionnable soit excisé et éliminé de l'acide nucléique cible, pour générer ainsi la séquence d'acide nucléique cible modifiée recherchée.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PE, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LR, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AL, AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, MK, MT, NL, NO, PL, PT, RO, SE, SI, SK, SM, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)