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1. WO2010087344 - METHOD FOR TRANSFORMING SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE, TRANSFORMANT OF SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE, AND METHOD FOR PRODUCING HETEROLOGOUS PROTEIN

Publication Number WO/2010/087344
Publication Date 05.08.2010
International Application No. PCT/JP2010/050984
International Filing Date 26.01.2010
IPC
C12N 15/09 2006.01
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
C12N 1/19 2006.01
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
1Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
14Fungi ; Culture media therefor
16Yeasts; Culture media therefor
19modified by introduction of foreign genetic material
C12P 21/00 2006.01
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
21Preparation of peptides or proteins
CPC
C12N 15/815
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09Recombinant DNA-technology
63Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
79Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
80for fungi
81for yeasts
815for yeasts other than Saccharomyces
Applicants
  • 旭硝子株式会社 ASAHI GLASS COMPANY, LIMITED [JP]/[JP] (AllExceptUS)
  • 浜 千尋 HAMA, Chihiro [JP]/[JP] (UsOnly)
  • イディリス アリムジャン IDIRIS, Alimjan [CN]/[JP] (UsOnly)
  • 東田 英毅 TOHDA, Hideki [JP]/[JP] (UsOnly)
Inventors
  • イディリス アリムジャン IDIRIS, Alimjan
  • 東田 英毅 TOHDA, Hideki
  • 浜 祐子 HAMA, Yuko
Agents
  • 泉名 謙治 SENMYO, Kenji
Priority Data
2009-01547227.01.2009JP
Publication Language Japanese (JA)
Filing Language Japanese (JA)
Designated States
Title
(EN) METHOD FOR TRANSFORMING SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE, TRANSFORMANT OF SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE, AND METHOD FOR PRODUCING HETEROLOGOUS PROTEIN
(FR) PROCÉDÉ POUR LA TRANSFORMATION DE SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE, PRODUIT DE TRANSFORMATION DE SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE ET PROCÉDÉ POUR LA PRODUCTION D'UNE PROTÉINE HÉTÉROLOGUE
(JA) シゾサッカロミセス・ポンベの形質転換方法および形質転換体、ならびに異種蛋白質の製造方法
Abstract
(EN)
Disclosed are: a method for transforming Schizosaccharomyces pombe for producing a transformant that can maintain the passage thereof highly stably and enables the steady production of a heterologous protein of interest; a transformant produced by the method; and a method for producing a heterologous protein using the transformant. Specifically disclosed are: an expression cassette comprising a promoter capable of functioning in Schizosaccharomyces pombe, a structural gene for a heterologous protein and a terminator; a transformation method for integrating the expression cassette into a transposon gene Tf2 site located on the chromosome of Schizosaccharomyces pombe by homologous recombination using a vector having a recombination site at which the homologous recombination with the chromosome of Schizosaccharomyces pombe is to be achieved; a transformant produced by the method; and a method for producing a heterologous protein using the transformant.
(FR)
L'invention porte sur : un procédé pour la transformation de Schizosaccharomyces pombe pour la production d'un produit de transformation qui permet de maintenir son passage de manière extrêmement stable et qui permet la production stable d'une protéine hétérologue d'intérêt; un produit de transformation produit par le procédé; et un procédé pour la production d'une protéine hétérologue utilisant le produit de transformation. De façon spécifique, l'invention porte sur : une cassette d'expression comprenant un promoteur apte à fonctionner dans Schizosaccharomyces pombe, un gène de structure pour une protéine hétérologue et un terminateur; un procédé de transformation pour l'intégration de la cassette d'expression dans un site Tf2 de gène transposon situé sur le chromosome de Schizosaccharomyces pombe par recombinaison homologue à l'aide d'un vecteur ayant un site de recombinaison au niveau duquel la recombinaison homologue avec le chromosome de Schizosaccharomyces pombe doit être réalisée; un produit de transformation produit par le procédé et un procédé pour la production d'une protéine hétérologue utilisant le produit de transformation.
(JA)
 継代の維持安定性により優れ、目的の異種蛋白質を安定して製造できる形質転換体を得るための、S.ポンベの形質転換方法を提供する。ならびに、前記方法で得られた形質転換体、および当該形質転換体を用いた異種蛋白質の製造方法、を提供する。 シゾサッカロミセス・ポンベ(Schizosaccharomyces pombe)内で機能するプロモーターと異種蛋白質構造遺伝子とターミネーターを含む発現カセット、および前記シゾサッカロミセス・ポンベの染色体に対して相同組換えを行わせる組換え部位を有するベクターを用いて、相同組換えによりシゾサッカロミセス・ポンベの染色体のトランスポゾン遺伝子Tf2部位に前記発現カセットを組み込む形質転換方法。ならびに、前記方法で得られた形質転換体、および当該形質転換体を用いた異種蛋白質の製造方法。
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