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1. (WO2010081875) A RECOMBINANT ALPHA-HEMOLYSIN POLYPEPTIDE OF STAPHYLOCOCCUS AUREUS, HAVING A DELETION IN THE STEM DOMAIN AND HETEROLOGOUS SEQUENCES INSERTED
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Pub. No.: WO/2010/081875 International Application No.: PCT/EP2010/050453
Publication Date: 22.07.2010 International Filing Date: 15.01.2010
IPC:
C12N 15/11 (2006.01) ,C07K 14/31 (2006.01) ,A61K 38/04 (2006.01) ,A61K 39/00 (2006.01) ,G01N 33/68 (2006.01)
C CHEMISTRY; METALLURGY
12
BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
N
MICRO-ORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICRO-ORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15
Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09
Recombinant DNA-technology
11
DNA or RNA fragments; Modified forms thereof
C CHEMISTRY; METALLURGY
07
ORGANIC CHEMISTRY
K
PEPTIDES
14
Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
195
from bacteria
305
from Micrococcaceae (F)
31
from Staphylococcus (G)
A HUMAN NECESSITIES
61
MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
K
PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
38
Medicinal preparations containing peptides
04
Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
A HUMAN NECESSITIES
61
MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
K
PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
39
Medicinal preparations containing antigens or antibodies
G PHYSICS
01
MEASURING; TESTING
N
INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
33
Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/-G01N31/131
48
Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
50
Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
68
involving proteins, peptides or amino acids
Applicants:
UNIVERSITÉ DE LIÈGE [BE/BE]; Interface Entreprises-Université Avenue Prè-Aily, 4 B-4031 Angleur, BE (AllExceptUS)
CENTRE D'ECONOMIE RURALE [BE/BE]; Rue du Carmel, 1 B-6900 Marloie, BE (AllExceptUS)
UNIVERSITÉ LIBRE DE BRUXELLES [BE/BE]; Avenue F.D. Roosevelt 50 B-1050 Bruxelles, BE (AllExceptUS)
FILÉE, Patrice [BE/BE]; BE (UsOnly)
RHAZI, Noureddine [BE/BE]; BE (UsOnly)
GALLENI, Moreno [BE/BE]; BE (UsOnly)
TAMINIAU, Bernard [BE/BE]; BE (UsOnly)
JOLOIS, Olivier [BE/BE]; BE (UsOnly)
COLLARD, Alfred [BE/BE]; BE (UsOnly)
JACQUET, Alain [BE/BE]; BE (UsOnly)
Inventors:
FILÉE, Patrice; BE
RHAZI, Noureddine; BE
GALLENI, Moreno; BE
TAMINIAU, Bernard; BE
JOLOIS, Olivier; BE
COLLARD, Alfred; BE
JACQUET, Alain; BE
Agent:
POLYPATENT; Braunsberger Feld 29 51429 Bergisch Gladbach, DE
Priority Data:
09150888.719.01.2009EP
Title (EN) A RECOMBINANT ALPHA-HEMOLYSIN POLYPEPTIDE OF STAPHYLOCOCCUS AUREUS, HAVING A DELETION IN THE STEM DOMAIN AND HETEROLOGOUS SEQUENCES INSERTED
(FR) POLYPEPTIDE D'ALPHA-HÉMOLYSINE RECOMBINÉ DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS COMPORTANT UNE DÉLÉTION DANS LE DOMAINE TIGE ET DES SÉQUENCES HÉTÉROLOGUES INTRODUITES
Abstract:
(EN) The present invention refers to a recombinant single-chain alpha-hemolysin polypeptide of Staphylococcus aureus, having a deletion in the stem domain for removing hemolytic activity, wherein at least one heterologous sequence is inserted in a region selected from the group consisting of regions defined by amino acid position 108 to 151, amino acid position 1 to 5, amino acid position 288 to 293, amino acid position 43 to 48, amino acid position 235 to 240, amino acid position 92 to 97, amino acid position 31 to 36, amino acid position 156 to 161 in respect to the wild-type sequence SEQ ID NO: 1, with the proviso that, if the heterologous sequence contains five or more consecutive histidine residues the moiety of the heterologous sequence other than the moiety represented by said five or more consecutive histidine residues has a minimum length of 11 amino acid residues; or a variant thereof, wherein in addition to said deletion in the stem domain and said insertion of heterologous sequence, 1 to 50 amino acid residues are added, substituted or deleted in respect to the wild-type sequence SEQ ID NO: 1 and has the activity to form oligomers and to bind to lipidic bilayers or cell membranes. The present invention also provides a medicament and vaccine comprising said recombinant polypeptide.
(FR) La présente invention porte sur un polypeptide d'alpha-hémolysine à chaîne unique recombiné de Staphylococcus aureus, comportant une délétion dans le domaine tige pour l'élimination de l'activité hémolytique, dans lequel au moins une séquence hétérologue est introduite dans une région choisie dans le groupe constitué par les régions définies par les positions d'acides aminés 108 à 151, les positions d'acides aminés 1 à 5, les positions d'acides aminés 288 à 293, les positions d'acides aminés 43 à 48, les positions d'acides aminés 235 à 240, les positions d'acides aminés 92 à 97, les positions d'acides aminés 31 à 36, les positions d'acides aminés 156 à 161 par rapport à la séquence de type sauvage SEQ ID N°: 1, à la condition que, si la séquence hétérologue contient cinq ou plus de cinq résidus d'histidine consécutifs, la fraction de la séquence hétérologue autre que la fraction représentée par lesdits cinq ou plus de cinq résidus d'histidine consécutifs ait une longueur minimale de 11 résidus d'acides aminés. L'invention port également sur un du polypeptide, dans lequel en plus de ladite délétion dans le domaine tige et de ladite introduction de séquence hétérologue, 1 à 50 résidus d'acides aminés sont ajoutés, remplacés ou supprimés par rapport à la séquence de type sauvage SEQ ID N°: 1 et qui à l'aptitude à former des oligomères et à se fixer à des bicouches lipidiques ou des membranes cellulaires. La présente invention porte en outre sur un médicament et un vaccin comprenant ledit polypeptide recombiné.
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Designated States: AE, AG, AL, AM, AO, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BH, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CL, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DO, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LY, MA, MD, ME, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PE, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, ST, SV, SY, TH, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW
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Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)
Also published as:
EP2208787EP2382316US20120014983JP2013504301CA2749862ES2483720
AU2010205645