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1. (WO2010074702) PURIFICATION OF PROTEINS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau

Pub. No.: WO/2010/074702 International Application No.: PCT/US2009/006363
Publication Date: 01.07.2010 International Filing Date: 02.12.2009
IPC:
C07K 1/32 (2006.01)
C CHEMISTRY; METALLURGY
07
ORGANIC CHEMISTRY
K
PEPTIDES
1
General processes for the preparation of peptides
14
Extraction; Separation; Purification
30
by precipitation
32
as complexes
Applicants:
MILLIPORE CORPORATION [US/US]; 290 Concord Road Billerica, MA 01821, US (AllExceptUS)
MOYA, Wilson [US/US]; US (UsOnly)
JABER, Jad [US/US]; US (UsOnly)
Inventors:
MOYA, Wilson; US
JABER, Jad; US
Agent:
HUBBARD, John, Dana; Millipore Corporation 290 Concord Road Billerica, MA 01821, US
Priority Data:
61/201,88016.12.2008US
Title (EN) PURIFICATION OF PROTEINS
(FR) PURIFICATION DE PROTÉINES
Abstract:
(EN) The present invention relates to a bimodal polymer such as a soluble polymer capable of irreversibly binding to insoluble particulates and a subset of soluble impurities and also capable of reversibly binding to one or more desired biomolecules in an unclarified biological material containing stream and the methods of using such a material to purify one or more desired biomolecules from such a stream without the need for prior clarification. Such a polymer comprises domains of charged pendant groups such as primary, secondary, tertiary or quaternary amines, (first mode) and is rendered insoluble and precipitates out of solution simply upon complexing with oppositely charged solid particulates and a fraction of the soluble impurities in an amount sufficient to form an aggregate that can no longer be held in solution. The polymer further comprises other domains of pendant groups that are charged or uncharged, hydrophilic or hydrophobic or have a ligand that is selective for the biomolecule of interest depending on the process conditions such as pH, ionic strength, salts, and the like (second mode). When present in one mode, such as the uncharged form, said pendant groups are capable of binding to one or more desired biomolecules within the stream (protein, polypeptide, etc) in an unclarified cell broth. The precipitate can then be removed from the stream, such as by being filtered out from the remainder of the stream and the desired biomolecule is recovered such as by selective elution.
(FR) La présente invention concerne un polymère bimodal, comme un polymère soluble capable de se lier de façon irréversible à des matières particulaires insolubles et à un sous-ensemble d'impuretés solubles, et également capable de liaison réversible à une ou plusieurs molécules biologiques désirées dans un courant contenant une matière biologique non clarifiée et les procédés d'utilisation d'une telle matière polymère pour purifier une ou plusieurs molécules biologiques désirées dans ce courant sans nécessité de clarification préalable. Ce polymère comprend des domaines de groupes pendants chargés comme des amines primaires, secondaires, tertiaires ou quaternaires (premier mode), et il est rendu insoluble et se précipite dans la solution simplement par complexation avec des matières particulaires solides de charge opposée et une fraction des impuretés solubles en une quantité suffisante pour former un agrégat qui ne peut plus se maintenir en solution. Le polymère comprend en outre d'autres domaines de groupes pendants qui sont chargés ou non, hydrophiles ou hydrophobes ou qui portent un ligand qui présente une sélectivité pour la molécule biologique d'intérêt dépendant des conditions du processus telles que le pH, la force ionique, les sels, et des paramètres similaires (deuxième mode). Lorsqu'ils sont présents dans un mode, par exemple la forme non chargée, lesdits groupes pendants sont capables de se lier à une ou plusieurs molécules biologiques désirées dans le courant (protéine, polypeptide, etc.) dans un bouillon de culture de cellules non clarifié. Le précipité peut ensuite être extrait du courant, par exemple par filtration pour le séparer du reste du courant et la molécule biologique est ensuite récupérée, par exemple par élution sélective.
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Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)
Also published as:
EP2358734SG171764JP2012512244CN102256993IN4269/DELNP/2011