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1. (WO2007088874) METHOD FOR PURIFYING CARDIAC MYOCYTE AND PRESUMPTIVE CARDIAC MYOCYTE DERIVED FROM STEM CELL AND FETUS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2007/088874    International Application No.:    PCT/JP2007/051563
Publication Date: 09.08.2007 International Filing Date: 31.01.2007
IPC:
C12N 5/077 (2010.01), C12N 5/00 (2006.01)
Applicants: ASUBIO PHARMA CO., LTD. [JP/JP]; 9-11, Akasaka 2-chome, Minato-ku, Tokyo 1078541 (JP) (For All Designated States Except US).
KEIO UNIVERSITY [JP/JP]; 15-45, Mita 2-chome, Minato-ku, Tokyo 1080073 (JP) (For All Designated States Except US).
HATTORI, Fumiyuki [JP/JP]; (JP) (For US Only).
FUKUDA, Keiichi [JP/JP]; (JP) (For US Only)
Inventors: HATTORI, Fumiyuki; (JP).
FUKUDA, Keiichi; (JP)
Agent: SHAMOTO, Ichio; YUASA AND HARA, Section 206 New Ohtemachi Bldg. 2-1, Ohtemachi 2-chome Chiyoda-ku, Tokyo 1000004 (JP)
Priority Data:
2006-023770 31.01.2006 JP
Title (EN) METHOD FOR PURIFYING CARDIAC MYOCYTE AND PRESUMPTIVE CARDIAC MYOCYTE DERIVED FROM STEM CELL AND FETUS
(FR) PROCÉDÉ DE PURIFICATION DE MYOCYTES CARDIAQUES ET DE MYOCYTES CARDIAQUES PRÉSOMPTIFS DÉRIVÉS DE CELLULES SOUCHES ET DE FŒTUS
(JA) 幹細胞及び胎児由来の心筋細胞及び予定心筋細胞の精製方法
Abstract: front page image
(EN)An object of the invention is to develop a method for purifying a cardiac myocyte to a high degree and at a high yield from a cell mixture containing the cardiac myocyte derived from a fetus and a stem cell using various characteristics which were not assumed to be used for the purpose of cardiac myocyte purification in the past or various characteristics which were newly found without undergoing genetic modification and adding a special protein or a biologically active substance. The inventors of the invention found that a cardiac myocyte can be efficiently selected and purified to a high degree by culturing a cardiac myocyte derived from an embryonic stem cell in a culture medium in a low serum condition, a low sugar condition, a low nutrient condition, a low calcium condition, a slightly acidic pH condition, a condition where lactic acid is added, a condition where aspartic acid/glutamic acid are added and/or a condition where pyruvic acid is added. Further, they found that the method found by using an embryonic stem cell can be applied to the selection/purification of a cardiac myocyte derived from a fetus and the selection/purification of a cardiac myocyte derived from an adult stem cell.
(FR)L'invention a pour objet de développer un procédé permettant de purifier des myocytes cardiaques à un degré élevé et avec un rendement élevé à partir d'un mélange de cellules contenant des myocytes cardiaques d'origine fœtale et des cellules souches en utilisant diverses caractéristiques qu'on ne pensait pas pouvoir utiliser dans le passé dans le but de purifier des myocytes cardiaques, ou diverses caractéristiques nouvellement découvertes, sans subir de modification génétique ni ajouter une protéine spéciale ou une substance biologiquement active. Les inventeurs de l'invention ont découvert que les myocytes cardiaques peuvent être efficacement sélectionnés et purifiés à un degré élevé en cultivant des myocytes cardiaques provenant de cellules souches embryonnaires dans un milieu de culture en conditions de faible concentration en sérum, de faible concentration en sucre, de faible concentration en nutriments, de faible concentration en calcium, de pH légèrement acide, dans une condition dans laquelle de l'acide lactique est ajouté, dans une condition dans laquelle de l'acide aspartique/acide glutamique sont ajoutés et/ou dans une condition dans laquelle de l'acide pyruvique est ajouté. En outre, ils ont découvert que le procédé trouvé en utilisant des cellules souches embryonnaires peut être appliqué à la sélection/purification de myocytes cardiaques d'origine fœtale et à la sélection/purification de myocytes cardiaques dérivés de cellules souches adultes.
(JA) 本発明は、従来は心筋細胞を精製する目的に用いることが想定できなかった諸性質や新たに見出した諸性質を用いて、遺伝子改変を経ず、特別なタンパク質及び生理活性物質の添加を行わず、胎児及び幹細胞由来に由来する心筋細胞を含む細胞混合物から、心筋細胞を高度にかつ高収率で精製する方法を開発することを課題とする。  本発明の発明者らは、低血清条件、低糖条件、低栄養条件、低カルシウム条件、弱酸性pH条件、乳酸添加条件、アスパラギン酸・グルタミン酸添加条件、および/またはピルビン酸添加条件の培養液中で胚性幹細胞由来の心筋細胞を培養することにより、効率的且つ高度に心筋細胞を選択・精製できることを見いだした。更に、胚性幹細胞で見出した方法が、胎児由来の心筋細胞の選択・精製や、成体幹細胞由来の心筋細胞の選択・精製に応用可能であることを見出した。                                                                               
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SV, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
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African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: Japanese (JA)
Filing Language: Japanese (JA)