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1. (WO2007087541) ASSAYS FOR S-ADENOSYLMETHIONINE-DEPENDENT METHYLTRANSFERASES
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2007/087541    International Application No.:    PCT/US2007/060930
Publication Date: 02.08.2007 International Filing Date: 23.01.2007
IPC:
G01N 21/62 (2006.01), G01N 30/02 (2006.01)
Applicants: WASHINGTON STATE UNIVERSITY RESEARCH FOUNDATION [US/US]; 1610 NE Eastgate Boulevard, Suite 650, Pullman, Washington 99163 (US) (For All Designated States Except US).
ZHOU, Zhaohui [US/US]; (US) (For US Only).
DORGAN, Kathleen [US/US]; (US) (For US Only)
Inventors: ZHOU, Zhaohui; (US).
DORGAN, Kathleen; (US)
Agent: DAVISON, Barry, L.; 2600 Century Square, 1501 Fourth Avenue, Seattle, Washington 98101-1688 (US)
Priority Data:
60/761,170 23.01.2006 US
Title (EN) ASSAYS FOR S-ADENOSYLMETHIONINE-DEPENDENT METHYLTRANSFERASES
(FR) DOSAGES POUR MÉTHYLTRANSFÉRASES DÉPENDANTES DE LA S-ADÉNOSYLMÉTHIONINE
Abstract: front page image
(EN)Disclosed are novel methyltransferase assay methods, comprising: including, in a reaction mixture for a methyltransferase activity, a purified or recombinant adenosine nucleosidase activity that catalyses release of an adenine or adenine derivative moiety from a transmethylation product, and a purified or recombinant adenine deaminase activity that catalyses deamination of the released moiety to hypoxanthine or respective derivative and ammonia, wherein the methyltransferase activity is rate-limiting; and determining the methyltransferase activity by spectrophotometric or chromatographic monitoring of the coupled deamination reaction products, or of subsequent enzymatic or chemical reactions coupled thereto. Coupled oxidation of the hypoxanthine to uric acid and hydrogen peroxide is optionally affected using purified or recombinant xanthine oxidase, wherein the methyltransferase activity is rate-limiting, and wherein determining the methyltransferase activity comprises monitoring of the coupled oxidation reaction. Variations are disclosed comprises monitoring of reaction products (e.g., to detect NH3, Hypoxanthine, H2O2, and Uric Acid).
(FR)La présente invention concerne de nouveaux procédés de dosage de méthyltransférases comprenant: dans un mélange réactionnel pour une activité méthyltransférase, une activité d'adénosine nucléosidase purifiée ou recombinante qui catalyse la libération d'une adénine ou d'une fraction dérivée d'adénine à partir d'un produit de méthylation, et une activité d'adénine déaminase purifiée ou recombinante qui catalyse la déamination de la fraction libérée en hypoxanthine ou un dérivé respectif et l'ammoniac, ladite activité méthyltransférase étant cinétiquement limitante; et la détermination de l'activité méthyltransférase par le suivi spectrophotométrique ou chromatographique des produits réactionnels de déamination couplées, ou de réactions chimiques ou enzymatiques ultérieures couplées à celui-ci. L'oxydation couplée de l'hypoxanthine à l'acide urique et au peroxyde d'oxygène est éventuellement modifiée au moyen de la xanthine oxydase où l'activité méthyltransférase est cinétiquement limitante, et où la détermination de l'activité méthyltransférase comprend le suivi de la réaction d'oxydation couplée. L'invention concerne également d'autres variantes comprenant le suivi des produits réactionnels (par exemple, pour la détection de NH3, d'hypoxanthine, de H202, et de l'acide urique).
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SV, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)