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1. (WO2007086473) METHOD OF CHANGING FLUORESCENCE WAVELENGTH OF FLUOROPROTEIN
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2007/086473    International Application No.:    PCT/JP2007/051188
Publication Date: 02.08.2007 International Filing Date: 25.01.2007
Chapter 2 Demand Filed:    13.09.2007    
IPC:
C12N 15/00 (2006.01), C07K 14/435 (2006.01), C12N 15/09 (2006.01)
Applicants: NEC SOFT, LTD. [JP/JP]; 18-7, Shinkiba 1-chome, Koto-ku, Tokyo 1368627 (JP) (For All Designated States Except US).
SUTO, Kyoko [JP/JP]; (JP) (For US Only).
TAKENAKA, Hiromi [JP/JP]; (JP) (For US Only).
TAKENAKA, Yasuhiro [JP/JP]; (JP) (For US Only)
Inventors: SUTO, Kyoko; (JP).
TAKENAKA, Hiromi; (JP).
TAKENAKA, Yasuhiro; (JP)
Agent: MIYAZAKI, Teruo; 8th Floor, 16th Kowa Bldg. 9-1, Akasaka 1-chome Minato-ku, Tokyo 1070052 (JP)
Priority Data:
2006-018236 26.01.2006 JP
Title (EN) METHOD OF CHANGING FLUORESCENCE WAVELENGTH OF FLUOROPROTEIN
(FR) PROCÉDÉ DE MODIFICATION DE LA LONGUEUR D'ONDE DE FLUORESCENCE DE FLUOROPROTÉINES
(JA) 蛍光タンパク質の蛍光波長を変える方法
Abstract: front page image
(EN)It is intended to provide a method which comprises specifying a structural factor determining the fluorescence wavelength in the three-dimensional structure of a GFP-like fluoroprotein originating in Copepod and modifying an amino acid residue participating in the structural factor so as to change the fluorescence wavelength while sustaining the recombination expression efficiency thereof; and a modified fluoroprotein that is obtained by applying this method. For example, in a GFP-like protein originating in Chiridius poppei, His52 in the &agr;-helix type secondary structure: PFLLSHCMGYGFYHF(&agr;1 47-61) including a fluorescent group GYG is substituted by an aromatic amino acid selected from among Phe, Tyr and Trp to cause a color shift of the fluorescence peak wavelength toward red; or substituted by Ala, Val, Ile, Leu, Gly, Cys, Met, Ser, Thr, or Asp, Asn, Glu or Gln to cause a color shift of the fluorescence peak wavelength toward blue.
(FR)L'invention concerne un procédé qui comprend la spécification d'un facteur structurel déterminant la longueur d'onde de fluorescence dans la structure tridimensionnelle d'une fluoroprotéine de type GFP provenant de copépodes, ainsi que la modification d'un résidu acide aminé participant au facteur structurel de façon à modifier la longueur d'onde de fluorescence tout en entretenant son efficacité d'expression recombinante ; et une fluoroprotéine modifiée qui est obtenue en appliquant ce procédé. Par exemple, dans une protéine de type GFP provenant de Chiridius poppei, la His52 dans la structure secondaire de type hélice &agr; : PFLLSHCMGYGFYHF(&agr;1 47-61) comprenant un groupe GYG fluorescent est substituée par un acide aminé aromatique choisi parmi Phe, Tyr et Trp afin de provoquer un décalage de couleur de la longueur d'onde du pic de fluorescence en direction du rouge ; ou substituée par Ala, Val, Ile, Leu, Gly, Cys, Met, Ser, Thr, ou par Asp, Asn, Glu ou Gln afin de provoquer un décalage de couleur de la longueur d'onde du pic de fluorescence vers le bleu.
(JA) 本発明は、橈脚類(copepod)由来のGFP様蛍光タンパク質の有する三次元構造において、その蛍光波長を決定する構造的な要因を特定し、この構造的な要因に関与するアミノ酸残基を改変し、組換え発現効率を保持しつつ、一方、蛍光波長を変化させる方法、ならびに、かかる方法を適用して得られる改変蛍光タンパク質を提供する。例えば、Chiridius poppei由来のGFP様蛍光タンパク質に対して、蛍光団GYGを含むαヘリックス様二次構造:P F L L S C M G Y G F Y H F(α 47-61)中のHis52を、Phe、Tyr、Trpから選択される芳香族アミノ酸で置換し、蛍光ピーク波長をレッド・シフトさせる;あるいは、Ala、Val、Ile、Leu、Gly、Cys、Met、Ser、Thr、または、Asp、Asn、Glu、Glnで置換し、蛍光ピーク波長をブルー・シフトさせる。
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, GT, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MY, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SV, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: Japanese (JA)
Filing Language: Japanese (JA)