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1. (WO2007007086) ANTIBODIES FOR ANTHRAX
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2007/007086    International Application No.:    PCT/GB2006/002560
Publication Date: 18.01.2007 International Filing Date: 12.07.2006
IPC:
C07K 16/12 (2006.01), C12N 15/13 (2006.01), A61K 39/395 (2006.01), C07K 16/42 (2006.01), A61P 31/04 (2006.01), G01N 33/569 (2006.01), G01N 33/577 (2006.01)
Applicants: THE SECRETARY OF STATE FOR DEFENCE [GB/GB]; DSTL, Porton Down, Salisbury, Wiltshire SP4 0JQ (GB) (For All Designated States Except US).
LOVE, Tracey, Elizabeth [GB/GB]; (GB) (For US Only).
REDMOND, Caroline [GB/GB]; (GB) (For US Only).
MAYERS, Carl, Nicholas [GB/GB]; (GB) (For US Only)
Inventors: LOVE, Tracey, Elizabeth; (GB).
REDMOND, Caroline; (GB).
MAYERS, Carl, Nicholas; (GB)
Agent: FARNSWORTH, Alistair, Graham; D/IPR Formalities Section, Defence Procurement Agency, MoD Abbey Wood, Poplar 2a #2218, Bristol BS34 8JH (GB)
Priority Data:
0514319.3 13.07.2005 GB
Title (EN) ANTIBODIES FOR ANTHRAX
(FR) ANTICORPS CONTRE L'ANTHRAX
Abstract: front page image
(EN)A targeted approach is described for the production of biological recognition elements capable of fast, specific detection of anthrax spores on biosensor surfaces. Single chain antibodies (scFvs) are produced to EAl, a Bacillus anihracis S-layer protein that is also present, although is not identical, in related Bacillus species. These antibodies detect Bacillus anthracis EAl protein and intact spores with a high degree of specificity, but do not detect other Bacillus species. Recombinant anti-EAl scFvs were isolated from an B. anthracis immune library that contained antibody genes raised against B. anthracis spores and purified exosporium. Two approaches for scFv selection are disclosed; standard (non-competitive) panning, and competitive panning. The non-competitive bio-panning strategy isolated scFvs that recognised EAl from B. anthracis, but also cross-reacted with other Bacillus species. In contrast, the competitive panning approach used S-layer proteins from other Bacillus species to compete out any cross reacting antibodies, generating scFvs that were highly specific to B. anthracis EAl and demonstrated apparent nanomolar binding affinities. The specific, real time detection of B. anthracis spores was demonstrated with these scFvs by using an evanescent wave biosensor, the Resonant Mirror. The approach described here can be used to generate specific antibodies to any desired target where homologous proteins also exist in closely related species, and demonstrates clear advantages to using recombinant technology to produce biological recognition elements for detection of biological threat agents.
(FR)L'invention concerne une approche ciblée pour la production d'éléments de reconnaissance biologique capables d'une détection rapide, spécifique de spores d'anthrax sur des surfaces de biodétecteur. Des anticorps à chaîne unique (scFvs) sont produits pour EA1, une protéine de couche S de Bacillus anthracis qui est également présente, bien qu'elle ne soit pas identique, dans des espèces associées de Bacillus. Ces anticorps détectent la protéine EA1 de Bacillus anthracis et des spores entières avec un degré élevé de spécificité, mais ne détectent pas d'autres espèces de Bacillus. Lesdits anticorps scFvs anti-EA1 recombinants ont été isolés à partir d'une bibliothèque immune de B. anthracis qui contenait des gènes d'anticorps élevés contre des spores de B. anthracis et d'exosporium purifié. Cette invention a pour objet deux approches de sélection des anticorps scFv : une méthode courante d'adhérence sur plastique (non compétitive) et une méthode d'adhérence sur plastique compétitive. Les anticorps scFvs isolés par la stratégie de ladite méthode biologique d'adhérence sur plastique non compétitive reconnaissent la protéine EA1 de B. anthracis, mais engendrent aussi une réaction croisée avec d'autres espèces de Bacillus. Par contre, les protéines à couche S utilisées par l'approche de la méthode d'adhérence sur plastique compétitive provenant des espèces Bacillus de manière à éliminer tout anticorps de réaction croisée permettent de générer des anticorps scFvs qui sont extrêmement spécifiques de la protéine EA1 de B. anthracis et des affinités de liaison nanomolaires apparentes démontrées. La détection en temps réel, spécifique de spores de B. anthracis a été démontrée avec ces anticorps scFvs à l'aide d'un biodétecteur à onde évanescente, le miroir résonant. L'approche décrite dans cette invention peut être utilisée pour engendrer des anticorps spécifiques contre toute cible souhaitée, où des protéines homologues existent également dans des espèces très proches, et démontre des avantages clairs visant à l'utilisation de la technologie recombinante afin de produire des éléments de reconnaissance biologique pour la détection d'agents biologiques menaçants.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HN, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LA, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RS, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
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African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)