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1. (WO2007003077) PYRIDAZINYL AMINE DERIVATIVES, THE USE THEREOF IN THE PREPARATION OF PICORNA VIRUS INHIBITORS
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哒嗪胺衍生物及其用于制备小

RNA病毒抑制剂的用途

技术领域

本发明涉及取代哒嗪胺衍生物或其可药用盐或水合物, 其制 备方法,含有它们的药物组合物,以及其作为小 RNA病毒抑制剂用 于制备预防和 /或治疗由小 RNA病毒引起的疾病的用途。

背景技术

小 RNA病毒科是已知最小的动物 RM病毒, 它共有 7个属, 即鼻病毒属、 肠道病毒属、 口疾病毒属、心脏病毒属、肝病毒属 以及双艾柯病毒属, 另外还有一些未分类的小 RNA病毒。 小 RNA 病毒可以引起诸如呼吸疾病、 手足口疾病、 脑膜炎 /脑炎、急性骨 髓灰白质炎、 心脏血管疾病、 出血性结膜炎、肝炎等多种疾病。

80 年代后期,病毒学取得了很大进展。 病毒生命周期中的几 个重要事件已经被很好的描绘, 许多分子靶标也已被证实。 近年 来许多新型的抗病毒药物的出现也促使了病毒学的迅速发展。 小 RNA 病毒抑制剂正处在活性研究阶段。 这些抑制剂的作用靶标是 病毒蛋白 1 ( VP1 ) ,一种相对保守的衣壳结构,其介导病毒的粘 附 /脱壳过程。不同的血清型病毒的 VP1结构高度保守,但是对于 病毒的复制非常重要。 因此,作用于这个靶标的抑制剂很可能成 为抗细小 RM病毒的药物。

发明内容

本发明的目的是寻找新型的作用于 VP1 的小分子化合物,其 可阻止病毒的粘附和脱壳,从而达到预防和 /或治疗小 MA病毒引 起的疾病的目的。

本发明人经过研究现已发现,具有如下通式 I 的化合物可作 用于病毒蛋白 1从而阻止病毒的粘附及脱壳,因此可用于预防和 / 或治疗小 RNA病毒引起的疾病。

因此,本发明第一个方面涉及式 I化合物或其可药用盐或水 合物:


其中:

X是 C或 N;

Y是 0或 S;

W是 C或 N;

Ri、 R2、 R3各自独立地为氢或卤素;

R4、 R5、 R6各自独立地为氢、卤素、(^〜( 8直链或支链烷基、 d~C8直链或支链烷氧基、 硝基、 氰基、 - C00R7、 - CH2-0-R8、 - CH2COOR7、 -C0R7;

各个 R7独立地为氢或 C Cs直链或支链烷基;

R8为氢或氰基。

本发明的第二个方面涉及制备上述式 I化合物或其可药用盐 或水合物的方法。

本发明的笫三个方面涉及药物组合物, 其包括至少一种式 I 化合物或其可药用盐或水合物以及一种或多种药学上可接受的载 体或赋形剂。

本发明的第四个方面涉及式 I化合物或其可药用盐或水合物

用于制备预防和 /或治疗与小 RNA 病毒感染有关的疾病的药物的 用途。

本发明的笫五个方面涉及预防和 /或治疗与小 RNA 病毒感染 有关的疾病的方法, 所述方法包括给予有此需要的患者预防和 / 或治疗有效量的至少一种式 I化合物或其可药用盐或水合物。

在本发明的一个实施方案中, 本发明涉及式 I化合物或其可 药用盐或水合物:


I

其中:

X是 C或 N;

Y是 0或 S;

W是 C或 N;

Ri, R2、 R3各自独立地为氢或卤素;

R4、 R5、 R6各自独立地为氢、卤素、 C^Cs直链或支链烷基、 C^Cs直链或支链烷氧基、 硝基、 氰基、 - C00R7、 -CH2- 0-R8、 - CH2C00R;、 - C0R7;

各个 R7独立地为氢或(^〜( 8直链或支链烷基;

R8为氢或氰基。

根据本发明的一个优选实施方案, 式 I 的化合物为具有如下 式 I I的化合物或其可药用盐或水合物:

I I

其中:

Y是 0或 s;

W是 C或 N;

Ri , R2、 R3各自独立地为氢或卤素;

R4、 R5、 R6各自独立地为氢、卤素、 C^Cs直链或支链烷基、 d~C8直链或支链烷氧基、 硝基、 氰基、 -C00R7、 -CH2-0-R8、 -CH2C00R7、 -C0R7;

各个 R7独立地为氢或 C^Cs直链或支链烷基;

R8为氢或氰基。

根据本发明的另一个优选实施方案, 式 I 的化合物为具有如 下式 I I I的化合物或其可药用盐或水合物:


I I I

其中:

W是 C或 N;

Ri , R2、 R3各自独立地为氢或卤素;

R4、 R5、 R6各自独立地为氢、卤素、 C^Cs直链或支链烷基、 C^Cs直链或支链烷氧基、 硝基、氰基、 - C00R7、 - CH2-0-R8、 -CH2 C00R7、 - C0R7;

各个 R7独立地为氢或 直链或支链烷基;

R8为氢或氰基。

根据本发明的另一个优选实施方案, 式 I 的化合物为具有如 下式 π的化合物或其可药用盐或水合物:


IV

其中:

Ri , R2、 R3各自独立地为氢或卤素;

R4、 R5、 R6各自独立地为氢、卤素、 C^Cs直链或支链烷基、 C Cs直链或支链烷氧基、 硝基、氰基、 -C00R7、 - CH2- 0- Rs、 -CH2 C00R7、 -C0R7;

各个 R7独立地为氢或 〜( 8直链或支链烷基;

R8为氢或氰基。

根据本发明的另一个优选实施方案, 式 I 的化合物为具有如 下式 V的化合物或其可药用盐或水合物:


V

其中:

R4、 R5、 R6各自独立地为氢、卤素、 C^Cs直链或支链烷基、 C^Cs直链或支链烷氧基、 硝基、 氰基、 -C00R7、 - CH2-0-R8、 -CH2COOR7、 -C0R7;

各个 R7独立地为氢或 C^Cs直链或支链烷基;

118为氢或氰基。

根据本发明, 本发明式 I的化合物优选下列化合物或其可药 用盐或水合物:

4- {4- [2- (4 -丁基 -苯氧基) -乙基] -哌嗪 -1-基}- 3, 6 -二氯 哒嗪;

4- {2- [4- ( 3, 6 二氯哒嗪 -4 -基) -哌嗪 -1-基]-乙氧基 } -苯 乙酸乙酯;

3, 6 -二氯 - 4-{4-[2- ( 2, 6 -二甲基-苯氧乙基) ] -哌嗪- 1-基}哒嗪;

4- {2- [4- (3, 6-二氯哒嗪- 4 -基) -哌嗪 -1-基]-乙氧基 } -苯 乙酸甲酯;

1-(4- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嚓 -4-基) -哌嗪 -1-基]-乙氧基 } -苯基) -丁- 1 -酮;

4- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪- 4-基-哌嗪 -1-基)-乙氧基 } -苯甲 酸曱酯;

1- ( 4- {2- [4-( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基) -哌嗪 -1-基]-乙氧基 } -苯基) -庚- 1 -酮;

4- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基-哌嗪- 1-基)-乙氧基 } -苯甲 酸丙酯;

4-{2-[4-( 3, 6-二氯哒嗪- 4-基 -哌嗪 -1-基)-乙氧基 } -苯乙 腈;

4- {4- [2-( 4-溴-苯氧基)乙基] -哌嗪 -1-基} -3, 6-二氯哒嗪; 3, 6 -二氯 - 4-{4-[2- (4 -硝基-苯氧基) -乙基]-哌嗪 -1 -基 } 哒嗪;

3, 6-二氯-4-{4-[2-( 4-甲氧基-苯氧基 ) -乙基 -哌嗪 - 1-基] } -哒嚓;

4- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基-哌嗪- 1-基)-乙氧基 } -苯甲 酸异丙酯;

4- {4- [2- (4-丁氧基 -苯氧基) -乙基] -哌嗪 - 1-基}-3, 6 -二 氯哒嗪;

3, 6 -二氯 - 4-{4- [2- (2-硝基-苯氧基) -乙基]-哌嗪 -1-基} 哒嗪;

3, 6-二氯- 4- [4- (2-对甲苯氧基-乙基) -哌嗪 -1 -基]哒嗪; 3, 6-二氯 -4- [4- ( 2 -邻 -曱苯氧基-乙基) -哌啶 -1 -基] -哒嗪; 1 -( 4- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基 ) -哌嗪 -1-基] -乙氧基} -苯基) -乙酮;

3, 6-二氯 -4- {4- [2- (2, 4 -二硝基-苯基) -乙基] -哌嗪 -1-基}

4- {2- [4- (3, 6 -二氯哒嗪- 4-基) -哌臻 -1-基] -乙氧基} -苯 腈;

3- {2- [4- (3, 6 -二氯哒嗪 -4-基) -哌嗪 -1-基]-乙氧基 } -苯 甲酸甲酯;

' 4-{4-[2- (4-叔丁基 -苯氧基) -乙基] -哌嗪 - 1-基}- 3, 6 -二 氯-哒嗪;

3, 6-二氯 -4- {4- [2- (4-乙氧基-苯氧基) -乙基] -哌嗪- 1-基} -哒嗪;

4- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪- 4-基) -哌嗪 -1-基]-乙氧基 } -苯 甲醛;

4-{2-[1- (3, 6-二氯哒嗪 -4 -基) -哌啶 -4-基]-乙氧基 } -苯 腈;

1- ( 4- {2- [1-( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基) -哌啶 -4-基] -乙氧基} -苯基) -乙酮;

3, 6-二氯 -4- {4- [2- (4-硝基-苯基) -乙基]-哌啶- 1 -基 }-

哒嗪

4-{2-[l- ( 3, 6 -二氯哒嗪- 4-基) -哌啶- 4 -基] -乙氧基} -苯 甲酸甲酯;

4-{2-[1- ( 3, 6-二氯哒嗪- 4-基) -哌啶 -4-基] -乙氧基} -苯 甲酸乙酯;

3, 6 -二氯 -4- {4- [2- (4-甲氧基-苯氧基) -乙基] -哌啶 -1-基} -哒嗪;

6- {2- [4- ( 3, 6 -二氯哒嗪 -4-基)哌嗪- 1-基] -乙氧基} -尼克 酸乙酯;和

6- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基)哌嗪- 1 -基] -乙氧基) -尼克 酸曱酯。

根据本发明,本发明化合物可通过下面的反应路线制备:


IX X I

使式 VI化合物与氯气在三氯化铁的催化下、 于 1G0- 140X下

反应生成式 VII化合物,使式 VII化合物与式 VIII化合物在碳酸 钠的存在下,于室温 - 170°C下,以氯仿、丙酮、二氯甲烷、 N, N-二甲基甲酰胺、 N, N-二甲基乙酰胺(优选 N, N-二甲基乙酰胺) 作为溶剂进行反应,生成式 IX化合物, 再使式 IX化合物与式 X 化合物于 0°C-室温下,于氯仿、二氯甲烷、四氢呋喃等有机溶剂、 优选四氢呋喃中进行缩合反应, 得到式 I化合物。

因此, 制备本发明式 I的化合物的方法包括以下步骤:

(i)使式 VI 化合物与氯气在三氯化铁的催化下反应生成式 VII化合物,


VI

其中, R、 R2、 R3的定义同前述式 I;


其中 R
R的定义同前述式 I;

(ii)使式 VII化合物与式 VIII化合物反应得到式 IX化合物

其中, X的定义同前述式 I;


其中, 、 R2、 R3和 X的定义同前述式 I所述;

( i i i )使式 IX化合物与氯化亚砜反应后再与式 X取代的酚 类化合物进行缩合反应,


其中, R4、 R5、 R6、 W和 Y的定义同前述式 I所述,得到式 I 化合物,


I

其中, R2、 R3、 R4、 R5、 R6、 X、 W和 Y的定义同前述式 I; (i v)任选地,将所得式 I化合物用适宜的药用酸或碱转变为其

可药用盐。

根据本发明, 本发明所用的术语 "可药用盐"包括本发明化合 物与制药学上可接受的无机酸或有机酸形成的酸盐或与制药学上 可接受的碱形成的碱盐。 其中的酸盐包括但不限于: 盐酸盐, 氢 溴酸盐, 氢碘酸盐, 硝酸盐,硫酸盐, 硫酸氢盐,磷酸盐,磷 酸氢盐, 乙酸盐, 丙酸盐,丁酸盐,草酸盐, 三甲基乙酸盐, 己二酸盐, 藻酸盐,乳酸盐,柠檬酸盐, 酒石酸盐,琥珀酸盐, 马来酸盐, 富马酸盐, 苦味酸盐, 天冬氨酸盐,葡糖酸盐, 苯 甲酸盐, 曱磺酸盐, 乙磺酸盐,苯磺酸盐, 对甲苯磺酸盐和默 羟萘酸盐; 碱盐包括但不限于: 铵盐, 碱金属盐如钠和钾盐, 碱土金属盐如钙和镁盐, 有机誠盐如二环己胺和 N-甲基- D-葡糖 胺盐, 以及氨基酸盐如精氨酸和赖氨酸盐。

根据本发明,本发明的药用组合物包括有效量的本发明式( I ) 化合物或其可药用盐或水合物以及一种或多种适宜的可药用载体 或赋形剂。 可用于本发明药物组合物的药用载体包括但不限于: 离子交换剂, 氧化铝, 硬脂酸铝, 卵磷脂,血清蛋白如人血清 蛋白, 緩冲物质如磷酸盐, 甘油, 山梨酸,山梨酸钾,饱和植 物脂肪酸的部分甘油酯混合物, 水, 盐或电解质, 如硫酸鱼精 蛋白, 磷酸氢二钠, 磷酸氢钾,氯化钠,锌盐,胶态二氧化硅, 三硅酸镁, 聚乙烯吡咯烷酮, 纤维素物质, 聚乙二醇, 羧甲基 纤维素钠, 聚丙烯酸酯, 蜂蜡,聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物和 羊毛脂。

本发明化合物是一类强效的小 RNA病毒抑制剂, 其特点是既 可预防又可治疗小 RNA病毒引起的疾病。 所述的小 RNA病毒为鼻 病毒和肠道病毒。 本发明所述的由小 RNA病毒引起的疾病包括但 不限于呼吸疾病、手足口疾病、脑膜炎 /脑炎、急性骨髓灰白质炎、 心脏血管疾病、 出血性结膜炎、 肝炎等。

所述的呼吸疾病包括但不限于: 普通感冒 (夏季感冒),咽 炎,扁桃腺炎和义膜性喉炎。 该类病变一般由小 RNA病毒家族中 的鼻病毒所致。

根据本发明, 本发明化合物的药用组合物可以以下面的任意 方式施用: 口服,喷雾吸入,直肠用药, 鼻腔用药,颊部用药, 阴道用药, 局部用药, 非肠道用药如皮下, 静脉,肌内,腹膜 内, 鞘内,心室内,胸骨内和颅内注射或输入, 或借助一种外 植储器用药。 其中优选口服, 腹膜内或静脉内用药方式。 另夕卜, 为使本发明化合物有效治疗中枢神经系统紊乱病症, 可优选心室 内途径用药.以克服化合物可能低的血脑屏障透过率。

当口服用药时, 本发明化合物可制成任意口服可接受的制 剂形式, 包括但不限于片剂, 胶嚢,水溶液或水悬浮液。 其中, 片剂一般使用的载体包括乳糖和玉米淀粉, 另外也可加入润滑剂 如硬脂酸镁。 胶嚢制剂一般使用的稀释剂包括乳糖和干燥玉米淀 粉。 水悬浮液制剂则通常是将活性成分与适宜的乳化剂和悬浮剂 混合使用。 如果需要,以上口服制剂形式中还可加入一些甜味剂, 芳香剂或着色剂。

当直肠用药时, 本发明化合物一般可制成栓剂的形式, 其通 过将药物与一种适宜的非刺激性赋形剂混合而制得。 该赋形剂在 室温下呈现固体状态, 而在直肠温度下熔化释出药物。 这类赋形 剂包括可可脂, 蜂蜡和聚乙二醇。

当局部用药时, 特别是治疗局部外敷容易达到的患面或器官, 如眼睛, 皮肤或下肠道神经性疾病时, 本发明化合物可根据不同 的患面或器官制成不同的局部用药制剂形式, 具体说明如下:

当眼部局部施用时, 本发明化合物可配制成一种微粉化悬浮 液或溶液的制剂形式, 所使用载体为等渗的一定 pH的无菌盐水, 其中可加入也可不加防腐剂如氯化苄基烷醇盐。 此外对于眼用, 也可将化合物制成骨剂形式如凡士林骨。

当皮肤局部施用时, 本发明化合物可制成适当的软骨, 洗剂 或霜剂制剂形式, 其中活性成分悬浮或溶解于一种或多种载体 中。 这里软骨制剂可使用的载体包括但不限于: 矿物油, 液体 凡士林, 白凡士林, 丙二醇,聚氧化乙烯, 聚氧化丙烯,乳化 蜡和水; 洗剂或霜剂可使用的载体包括但不限于: 矿物油, 脱 水山梨糖醇单硬脂酸酯, 吐温 60,十六烷酯蜡,十六碳烯芳醇, 2 -辛基十二烷醇, 苄醇和水。

当下肠道局部施用时, 本发明化合物可制成如上所述的直 肠栓剂制剂或适宜的灌肠制剂形式, 另外也可使用局部透皮贴 剂。

本发明化合物还可以无菌注射制剂形式用药, 包括无菌注射 水或油悬浮液, 或无菌注射溶液。 其中,可使用的载体和溶剂包 括水, 林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。 另外,灭菌的非挥发油 也可用作溶剂或悬浮介质, 如单甘油酯或二甘油酯。

另外需要指出, 本发明化合物针对不同患者的特定使用剂量 和使用方法决定于诸多因素, 包括患者的年龄, 体重, 性别, 自然健康状况, 营养状况, 化合物的活性强度, 服用时间, 代 谢速率, 病症的严重程度以及诊治医师的主观判断。 优选的使用 剂量介于 0. 01 ~ 100mg/kg体重 /天。

附图说明

图 1和图 2分别显示了本发明化合物在体外模型上预防给药 和治疗给药情况下抗小 RNA病毒的活性。

图 3显示了本发明实施例 31化合物离体水平抗鼻病毒的结 果。

具体实施方式

下面的实施例是本发明优选的说明性实施方式, 对本发明不 构成任何限制。

化合物熔点由 RY-1 型熔点仪测定,温度计未经较正。 ^ NMR 由日本电子 JNM-ECA- 400型核磁共振仪测定。质谱由 VG-ZabSpec MS 仪测定。所有反应用溶剂如未注明都经标准化预处理。

反应中所用到原料除 3.6-二氯哒嗪购自南京天尊泽众化学试剂 公司外,其余均属常用试剂,可由一般的化学试剂供应商处购得。

实施例 1 : 4- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪- 4-基) -哌嗪- 1-基〗 -乙氧基 } -苯乙酸甲酯

1. 1. 3, 4, 6-三氯哒嗪

在干燥的三口瓶中安装回流冷凝管、 通气管 (接安全瓶),加入 3.6-二氯哒嗪 (购自南京天尊泽众化学试剂公司)及无水三氯化铝, 外温加热至 120° (:。反应物熔融,在此温度下通入 Cl2气, 3小时, 停止反应, 冷却到室温,加入三氯甲烷使产品溶解, 三氯甲烷溶液 用饱和食盐水洗二次, 7j相再用三氯甲烷反提二次, 合并三氯甲烷 液, 用无水硫酸钠干燥,蒸除三氯甲烷,减压蒸馏,收集 110-114 °C/8mmHg或 128〜9°C /18mmHg的馏分,在接收瓶中凝结成白色固 体。 产率 55%,m.p.57〜58°C。

1. 2. 2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪- 4 -基) -哌嗪 -1 -基] -乙醇 于 50 raL圆底瓶中加入 9. 18 g ( 0. 05 mol ) 3, 4, 6-三氯哒 嗪, 5. 30 g ( 0. 05 mo l )无水碳酸钠和 20 mL N, N-二甲基乙酰 胺(DMA ) ,室温下搅拌,然后慢慢滴加 6· 54 g ( 0. 05mol ) 4 -哌 嗪乙醇 (溶于 l O mLDMA ) ,滴毕后搅拌过夜,次日过滤,滤饼加

入 100 mL蒸馏水搅拌,然后再次过滤, 得到白色固体 10· 20 g, 收率: 73.6%, m. p.139- 14rC 0 ^-NMR ( 400MHz, CDC13) δρριη:

2.57 (br, 1H) , 2.66 - 2.68 (t, 2H, J=5.12Hz) , 2.73-2.76 ( t, 4H, J=4.76Hz) , 3.36 - 3.38 ( t, 4H, J=4.52Hz) , 3.68 ~

3.71 ( t, 2H, J=5.04Hz) , 6.88 (s, 1H) 。 13C -腿( 400MHz, DMS0-d6 ) 6ppm: 155.14, 149.43, 148.70, 116.64, 60.00, 58.49, 52.44, 48.90。

EI-MS m/e: 276.1 [M+, 100] , 280 [M+ 4]+, 100} , 245.0, 207,1, 175.1, 100.1, 70.1。

1.3. 4- {2- [4- ( 3, 6 -二氯 -哒嗪 -4-基) -哌嗪 -1-基] -乙氧 基} -苯乙酸曱酯

50 mL干燥的三颈瓶中加入 1.1085 g( 0.004 mol) 自制 2-[4- ( 3, 6-二氯-哒嗪 -4-基) -哌嗪- 1-基] -乙醇, 0.54 g(0.003 mol) 对羟基苯甲酸乙酯, 1.224 g 三苯基膦,冰浴同时氮气保护条件 下向瓶中注入 15 mL的无水四氢呋喃, 然后向瓶中滴加溶于 5 mL 无水四氢呋喃的偶氮二甲酸二乙酯(DEAD) 0.7mL, 滴加完毕后, 升至室温, 搅拌过夜。次日旋干溶剂, 剩余物倒入 100 raL水中, 用 150 mL二氯甲烷分三次萃取, 合并萃取液用无水 NaS04干燥。 浓缩, 经柱层析(洗脱剂 石油醚:乙酸乙酯:甲醇 =10: 1: 0.5) 分离, 得到 0.56 g 4- {2- [4- ( 3, 6-二氯 -哒嗪 -4-基-) -哌嗪 -1-基] -乙氧基}-苯乙酸甲酯, 白色固体。收率: 32.9%, m. p.84-86。C。 ^-NMR OOMHz, DMS0-D6 ) 5ppm: 2.64~2.67 (m, 4H ) , 2.75 - 2.78 ( t, 2H, J=5.6Hz ) , 3.32 - 3.34 ( m, 4H ) , 3.60 (s, 5H) , 4.08-4.11 ( t, 2H, J=5.6Hz ) , 6.89-6.91 ( d, 2H, J=8.7 Hz) , 7.16-7.18 ( d, 2H, J=8.7Hz ) , 7.40 ( s, 1H) 。

EI-MS m/e: 424 [M+], 259, 245, 202, 175, 70.0。

可按与上述 1.3 相同方法,用不同的反应物即各种取代的酚 类化合物代替 1.3中的对羟基苯甲酸乙酯制备下述化合物:

实施例 2: 4-{4-[2-( 4-丁基-苯氧基) -乙基] -哌嗪 - 1-基}-3, 6-二氯 p秦

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 4-丁基苯酚。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 35%, m. p.83 - 84 °C。

^-NMR C 400MHz, CDC13) 6ppm: 0.90 - 0.94 ( t, 3H, J=7.3 Hz ) , 1.33 - 1.37 (m, 2H) , 1.53 - 1.58 (m, 2H) , 2.53 - 2.57 ( t, 2H, J=7.8Hz ) , 2.78 ~ 2.80 ( t, 4H, J=4.5Hz ) , 2.88 - 2.91 ( t, 2H, J=5.3Hz),, 3.35 - 3.37 ( t, 4H, J=4.5Hz) , 4.11 -4.14 ( t, 2H, J=5.3Hz) , 6.85 ( s, 1H ) , 6.82 - 6.84 ( dd, 2H, J=8.4Hz) , 7.09- 7.11 (dd, 2H, J=8.7Hz ) 。 EI-MS m/e: 408.0 [M+] , 259.0, 245.0, 201.9, 175.0, 70.0。

实施例 3: 4- {2- [4- ( 3, 6 二氯哒嗪 -4-基) -哌嚓 -1-基] - 乙氧基 } -苯乙酸乙酯

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 4-羟基苯曱酸 乙酯。得到标题化合物,其为白色固体, 收率: 32%, m. p.128 -130 °C。 ^-NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) 6ppm: 1.29 - 1.32 ( t, 3H, J=7Hz) , 2.65 - 2.68 ( t, 4H, J=4.8Hz ) , 2.79- 2.82 ( t, 2H, J=5.6Hz ) , 3.32 - 3.34 ( t, 4H, J=5Hz ) , 4.19- 4.22 ( t, 2H, J=5.6Hz) , 4.25 - 4.30 ( q, 2H, J=7.3Hz ) , 7.06 7.08 (dd, 2H, J=8.7Hz) , 7.89 - 7.92 ( dd, 2H, J=8.7Hz ) 。

EI-MS m/e: 424 [Ml , 259.0, 245.0, 201.9, 175.0, 70.0。

实施例 4: 3, 6-二氯- 4- {4- [2- ( 2, 6-二曱基-苯氧乙基)] - 哌漆- 1-基} 秦

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 2, 6-二曱基 苯酚。得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 38.5%, m. p.94-96 。C。—NMR ( 400MHz, CDC13): δρριη: 2.29 ( s, 6H ) , 2.83

(brs, 4H) , 2.90 (brs, 2H ) , 3.41 (brs, 4H, J=4.5Hz ) , 2.88 - 2.91 ( t, 2H, J=5.3Hz ) , 3.35 ~ 3.37 ( t, 4H) , 3.94

(brs, 2H), 6.89 ( s, 1H), 6.91 - 6.95 ( m, 1H) , 7.01 - 7.03

(d, 2H, J=7.3Hz) 。

EI-MS m/e: 380 [Ml , 258.9, 247.0, 201.9, 175.0, 91.0, 70.0。

实施例 5: 化合物 mcl040720 1- ( 4- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒 嗪 -4-基) -哌嗪 -1-基] -乙氧基}-苯基) -丁 -1 -酮

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 1- ( 4-羟基-苯基) -丁- 1 -酮。得到标题化合物,其为白色固体,收率: 41.5%, m. p.140- 141 °C。 - NMR ( 400MHz, CDC13) 6ppm: 0.98- 1.02 ( t, 3H, J=7.4Hz) , 1.71 - 1.79 ( m, 2H) , 2.80- 2.81 ( m, 4H) , 2.88 - 2.94 ( m, 4H ) , 3.36 - 3.38 (m, 4H ) , 4.20-4.22 ( t, 2H, J=5.3Hz), 6.86( s, 1H), 6.93 - 6.96(dd, 2H, J=8.7Hz), 7.93 - 7.96 (dd, 2H, J=8.7Hz ) 。

EI-MS m/e: 422.0 [M+] , 258.9, 244.9, 201.9, 175.0, 121.0, 70.0。

实施例 6: 4- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基-哌嗪- 1-基) -乙 氧基 } -苯甲酸甲酯

按 1.3方法制备该化合物,将所用的酚替换为 4-羟基苯甲酸 甲酯。 得到标题化合物,其为白色固体, 收率: 45%, in. p.138 -140 °C, 'H-NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) 6ppm: 1.29 - 1.32 ( t,

3H, J=7Hz) , 2.65-2.68 (t, 4H, J=4.8Hz ) , 2.79-2.82 ( t, 2H, J=5.6Hz) , 3.32 - 3.34 ( t, 4H, J=5Hz ) , 4.19-4.22 ( t, 2H, J=5.6Hz ) , 4.25 - 4.30 ( q, 2H, J=7.3Hz ) , 7.06-7.08 (dd, 2H, J=9Hz) , 7.40( s, 1H), 7.90 - 7.92 (dd, 2H, J=9Hz ) 0 EI-MS m/e: 410 [M+] , 379, 259.0, 247.0, 175.1, 202.0, 92.0, 70.1

实施例 7: 1- (4- {2- [4- (3, 6 -二氯哒嗪 -4-基) -哌嗪- 1-基] -乙氧基}-苯基) -庚- 1 -酮

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 1- (4-羟基-苯基) -庚- 1 -酮。得到标题化合物,其为白色固体,收率: 43.5%, m. p.113-115 。C。 ^NMR ( 400MHz, CDC13): 6ppm: 0.87-0.91

( t, 3H, J=6.7Hz) , 1.29 - 1.40 (m, 6H) , 1.68 ~ 1.76 ( m, 2H), 2.89 - 2.93 (ra, 8H ), 3.36 - 3.38 (m, 4H ) , 4.20-4.22

( t, 2H, J=5.32Hz) , 6.86 ( s, 1H) , 6.94 - 6.96 (dd, 2H, J=9Hz) , 7.93 - 7.96 (dd, 2H, J=9Hz ) 。

EI-MS ra/e: 464.0 [Ml , 258.9, 244.9, 201.8, 175.0, 70.0。

实施例 8: 4- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基-哌嗪 -1-基) -乙氧基 } -苯甲酸丙酯

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 4-羟基苯曱酸 丙酯。 得到标题化合物,其为白色固体, 收率: 47%, m. p.139-141 °C。 ^-NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) 6ppm: 0.94 - 0.98 ( t, 3H, J=7.3Hz ) , 1.68 - 1.73 ( ra, 2H ) , 2.65 - 2.68 ( t, 4H, J=4.8Hz) , 2.79 - 2.82 ( t, 2H, J=5.6Hz ) , 3.33 - 3.35 ( t, 4H, J=5Hz) , 4.17-4.22 ( m, 4H ) , , 7.06 - 7.08 ( dd, 2H, J=9Hz) , 7.40 (s, 1H) , 7.90 - 7.92 (dd, 2H, J=9Hz ) 。

EI-MS m/e: 438.1 [Ml, 379, 259.0, 245.0, 175.1, 202.0, 70.1

实施例 9: 4-{2-[4- ( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基-哌嗪- 1-基) -乙氧基 } -苯乙腈

按 1.3方法制备该化合物,将所用的酚替换为 4-羟基苯乙腈。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率 45.5% m. p.137 ~ 139 °C, 'H-NMRC 400MHz, CDC13) 6ppm: 2.78 ~ 2.81 ( t, 4H, J=4.5Hz ) ,

2.89 ~ 2.92 ( t, 2H, J=5.3Hz ), 3.36 - 3.38 ( t, 4H, J=4.8Hz ),

3.70 ( s, 2H) , 4.13-4.16 ( t, 2H, J=5.3Hz ), 6.86 ( s, 1H ) , 6.91-6.93 (ra, 2H ) , 7.24 - 7.26 (in, 2H ) 。

EI-MS m/e: 391.0 [Ml, 259.0, 247.0, 201.9, 175.1, 77.0, 70.0。

实施例 10: 4-{4-[2- (4-溴-苯氧基)乙基] -哌嗪 - 1-基}-3, 6二氯 秦

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 4-溴苯酚。得 到标题化合物, 其为白色固体, 收率 43%, ra. p.124 - 126 °C。

^-NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) δρριη: 2.80 (brs, 4H ) , 2.91 (brs, 2H) , 3.37 (brs, 4H ) , 4.12 (brs, 2H) , 6.78 - 6.82 (m, 2H ), 6.86 ( s, 1H) , 7.37-7.41 (m, 2H) 。

EI-MS m/e: 431.9 [Ml , 259.0, 245.0, 201.9, 175.0, 91.0, 70.1。

实施例 11: 3, 6 -二氯 -4- {4- [2- (4-硝基-苯氧基) -乙基] -哌療 -1-基}哒療

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 4-硝基苯酚。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率 41%, m. p.128 - 129 °C。

^-N R C 400MHz, DMS0-D6 ) dppm: 2.66 - 2.68 ( ra, 4H) , 2.81 -2.83 ( t, 2H, J=5.6Hz) , 3.33 - 3.35 ( ra, 4H ) , 4.27 ~ 4.30 ( t, 2H, J=5.6Hz) , 7.17- 7.20 ( d, 2H, J=9Hz ) , 7.40 ( s, 1H) , 8.20 - 8.22 ( d, 2H, J=9Hz ) 。

EI -MS m/e: 397.0 [Ml , 259.0, 245.0, 201.9, 175.0, 70.0。

实施例 12: 3, 6-二氯 -4- {4- [2- ( 4-甲氧基 -苯氧基) -乙基 -哌漆- 1-基] }- 嗪

按方 1.3法制备该化合物,将所用的酚替换为 4-甲氧基苯酚。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 42.5%, m. p.138 - 140 。C。 ^NMR ( 400MHz, CDC13) 6ppm: 2.79 (brs, 4H) , 2.87- 2.90 ( t, 2H, J=5.3Hz) , 3.36 - 3.38 ( m, 4H ) , 3.78 ( s, 3H ),

4.09- 4.11 ( t, 2H, J=5.3Hz ) , 6.83 - 6.89 (m, 5H ) 。

EI-MS ra/e: 382.1 [M+] , 259.0, 245.0, 202.0, 175.1, 70.1。

实施例 13: 4- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪- 4-基-哌嗪- 1-基) - 乙氧基 } -苯甲酸异丙酯

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 4-羟基苯甲酸 异丙酯。得到标题化合物,其为白色固体,收率: 52%, m. p.135-137 。C。 ^-NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) dppm: 1.29 ~ 1.31 ( d, 6H, J=6.2Hz ) 2.65 - 2.68( m, 4H ), 2.79 ~ 2.81( t, 2H, J=5.6Hz ),

3.33 - 3.34 (ra, 4H ) , 4.18- 4.21 ( t, 2H, J=5.6Hz ) , 5.06- 5.13 (m, 1H) , 7.05 - 7.07 (dd, 2H, J=9Hz ) , 7.40 ( s, 1H ) , 7.90- 7.92 (dd, 2H, J=9Hz ) 。

EI-MS ra/e: 381 [Ml, 346.0, 258.0, 229.9, 175.9, 124.0, 109.0。

实施例 14: 4- {4- [2- (4-丁氧基-苯氧基) -乙基] -哌嗪 -1-

基 }- 3, 6-二氯哒嗪

按 1.3方法制备该化合物,将所用的酚替换为 4-丁氧基苯酚。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 40.5%, in. p.135-136 °C。 ^NMIU 400MHz, CDC 13) 6ppm: 0.94 - 0.99( t, 3H, J=7.7Hz), 1.47-1.51 (m, 2H) , 1.73 - 1.76 (m, 2H ) , 2.83 (brs, 4H ) , 2.90(brs, 2H), 3.39 (brs, 4H ) , 3.90 - 3.93( t, 2H, J=6.4Hz ) , 4.11-4.12 ( t, 2H, J=5Hz) , 6.84 - 6.85 ( m, 4H), 6.86 (s, 1H) 。

EI -MS m/e: 424.1 [Ml , 259.0, 245.0, 201.9, 175.1, 110.0, 70.1。

实施例 15: 3, 6-二氯 -4- {4- [2- (2-硝基 -苯氧基) -乙基] -哌嗪 -1-基}哒嗪

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 2-硝基苯酚。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 46.5%, ra. p.125-126 °C。 'H-NMRC 400MHz, CDC13) 6ppm: 2.78 - 2.81( t, 4H, J=4.5Hz ), 2.89~2.92( t, 2H, J=5.3Hz ) , 3.36 - 3.38 ( t, 4H, J=4.8Hz ), 3.70 (s, 2H) , 4.13~4.16 (t, 2H, J=5.3Hz ) , 6.86 ( s, 1H), 6.91-6.93 (m, 2H ) , 7.24 - 7.26 ( m, 2H ) 。

EI- MS m/e: 391.0[M+〗, 259.0, 247.0, 201.9, 175.1, 77.0, 70.0。

实施例 16: 3, 6-二氯- 4- [4- 2-对甲苯氧基-乙基] -哌嗪 -1-基]哒嗪

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 4-曱基苯酚。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 42%, m. p.95 - 96 °C。

'H-NMR ( 400MHz, CDC13) dppm: 2.23 ( s, 3H ) , 2.64 - 2.66 ( m, 4H) , 2.74 - 2.77 ( t, 2H, J=5.7Hz ) , 3.32 ~ 3.34 ( ra, 4H ) , 4.05 - 4.08 ( t, 2H, J=5.7Hz ) , 6.83 - 6.85 (dd, 2H, J=8.4Hz ) , 7.09 ~ 7.11 ( dd, 2H, J=8.4Hz ) , 7.40 ( s, 1H ) 。

EI -MS ra/e: 438.2 [Ml , 379.1, 259.1, 245.1, 175,1, 70.1。

实施例 17: 3, 6 -二氯 -4- [4- (2-邻 -甲苯氧基-乙基) -哌啶 - 1-基] -哒漆

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 2-甲基苯酚。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 48.5%, m. p.106-108 °C。 ^-NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) δρριη: 2.13 ( s, 3H ) , 2.67- 2.69 ( t, 4H, J=4.5Hz ) , 2.79-2.81 ( t, 2H, J=5.6Hz ) , 3.31 ~

3.33 ( t, 4H, J=4.5Hz), 4.07-4.10( t, 2H, J=5.6Hz ), 6.80-6.84 (m, 1H) , 6.89-6.91 (d, 1H, J=8.1Hz ) , 7.10-7.14

(m, 2H) , 7.29 ( s, 1H) 。

EI-MS m/e: 366.1 [Ml , 259.0, 245.0, 202.0, 175.1, 91.0, 70.0。

实施例 18: l-(4-{2-[4-(3, 6-二氯-哒嗪- 4-基)-哌嗪 -1-基] -乙氧基}-苯基) -乙酮

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 1- ( 4-羟基-苯基) -乙酮。得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 47.5%, ra. p.115-117 °C。 ^-NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) δρριπ: 2.50-2.52 ( t, 3H, J=5.6Hz) , 2.65 - 2.68 ( m, 4H ) , 2.79-2.82 ( t, 2H, J=5.9Hz) , 3.33 - 3.35 (ra, 4H ) , 4.20 - 4.23 (t, 2H, J=5.9Hz) , 7.06 - 7.08 ( dd, 2H, J=9Hz ) , 7.4 ( s, 1H) , 7.92 - 7.94 (dd, 2H, J=8.7Hz) 。

EI-MS m/e: 394.0 [M+], 259.0, 247.0, 201.9, 175.0, 70.0。 实施例 19: 3, 6-二氯 -4- {4- [2- ( 2, 4-二硝基-苯基) -乙 基]-哌嗪- 1-基} -哒嗪

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 2, 4-二硝基 苯酚。得到标题化合物,其为白色固体,收率: 41.5%, m. p.145-146 °C。 ^-NMR ( 400MHz, CDC13) 6ppm: 2.84 ( brs, 4H ) ,

3.01 (brs, 4H), 4.40 (brs, 4H) , 6.87 ( s, 1H), 7.23- 7.25 ( d, 1H, J=9.2Hz ) , 8.44 ~ 8.47 ( dd, 2H, =9.2Hz, J2=2.8Hz ),

8.77 - 8.78 (d, 1H, J=2.5Hz ) 。

EI -MS m/e: 443.1 [Ml , 427.1, 338.3, 245.1, 177.1, 95.1, 83.1, 68.1。

实施例 20: 4-{2-[4-( 3, 6-二氯-哒嗪 -4-基)-哌嗪- 1-基] - 乙氧基 } -苯腈

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 4-羟基苯腈。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 43.5%, in. p.175- 177 °C。 -NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) δρριη: 2.64 - 2.67 (m, 4H ) , 2.78- 2.81 ( t, 2H, J=5.6Hz ) , 3.32 - 3.35 ( m, 4H) , 4.20- 4.23 ( t, 2H, J=5.6Hz) , 7.13- 7.15 (dd, 2H, J=9Hz ) , 7.40 ( s, 1H) , 7.76 - 7.79 ( dd, 2H, J=9Hz ) 。

EI -MS m/e: 377 [M+] , 245, 230, 201.9, 175.1, 119.0, 70.0。

实施例 21: 3- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嚓- 4-基) -哌嗪 -1-基] - 乙氧基 } -苯甲酸甲酯

按 1.3方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 3-羟基苯甲酸 甲酯。得到标题化合物,其为白色固体,收率: 52.5%, m. p.105- 107 °C。 ^-NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) 8ppm: 2.13 ( s, 3H ) ,

2.80 - 2.82 ( t, 4H, J=4.5Hz ), 2.91-2.94 ( t, 2H, J=5.3Hz ) ,

3.36 - 3.38 ( t, 4H, J=4.5Hz ) , 3.92 ( s, 3H ) , 4.18 ~ 4.21 ( t, 2H, J=5.6Hz) , 6.86 ( s, 1H) , 7.11 ~ 7.14 ( m, IB) ,

7.34 - 7.38 (t, 1H, J=7.9Hz ) , 7.58 - 7.59 ( m, 1H) , 7.64-7.66 (d, 1H, J=7.8Hz) 。

EI -MS m/e: 409.9 [Ml, 378.9, 244.9, 201.9, 175.0, 120.9, 77.0, 70.0。

实施例 22: 4-{4- [2- (4-叔丁基 -苯氧基)-乙基] -哌嗪基- 1-基 }- 3, 6-二氯哒嗪

按 1.3方法制备该化合物,将所用的酚替换为 4-叔丁基苯酚。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 49°/。, m. p.97 - 99 °C。

^-NMR ( 400MHz, CDC13) δρριη: 1.30 ( s, 9H), 2.78 - 2.80 ( m, 4H) , 2.88-2.91 ( t, 2H, J=5.6Hz ) , 3.35 ~ 3.37 ( m, 4H ) ,

4.12-4.15 ( t, 2H, J=5.6Hz ), 6.85 ~ 6.87 ( dd, 2H, J=9Hz ) , 6.86 ( s, 1H) , 7.30 - 7.32 (dd, 2H, J=9Hz ) 。

EI -MS m/e: 408.0 [M+] , 244.9, 259.0, 175.0, 91.0, 70.0。

实施例 23: 3, 6-二氯- 4- {4- [2-( 4-乙氧基 -苯氧基)-乙基] -哌嗪 -1-基} -哒嗪

按 1.3方法制备该化合物,将所用的酚替换为 4-乙氧基苯酚。 得到标题化合物,其为白色固体,收率: 54.5%, m. p.93 - 95 °C。

'H-NMR ( 400MHz, CDC13) δρριη: 1.38 - 1.42 ( t, 3H, J=7Hz ) , 3.07(brs, 6H), 3.53(brs, 4H ) , 3.96~4.01(t, 2H, J=7Hz ) , 6.85 - 6.92 (m, 5H) 。

EI -MS m/e: 396.1 [Ml , 259.0, 245.0, 202.0, 175.1, 109.0, 70.1。

实施例 24: 4- {2- [4- ( 3, 6 -二氯哒嗪- 4-基) -哌嗪 -1-基] -乙氧基 }-苯曱醛

按 1.3方法制备该化合物,将所用的酚替换为 4-羟基苯曱醛。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 52.5%, m. p. 110-112 °C。—NMR ( 400MHz, CDC13) 6ppm: 2.81 (brs, 4H ) , 2.95 (brs, 2H) , 3.38 (brs, 4H ) , 4.24 ( brs, 2H ) , 7.02-7.04 (dd, 2H, J=8.7Hz ) , 7.85 - 7.87 ( dd, 2H, J=8.7Hz ) , 9.9 ( s, 1H) 。

EI -MS in/e: 380.0 [Ml , 245.0, 229.9, 201.9, 175.0, 70.0。

实施例 25: 4-{2-[l- (3, 6-二氯哒嗪 -4-基) -哌啶 -4-基] -乙氧基 } -苯腈的合成

25.1: 2-C1- ( 3, 6-二氯-哒嗪- 4-基) -哌啶- 4 -基] -乙醇 于 50 mL圆底瓶中加入 9.18 g ( 0.05 mol ) 3, 4, 6-三氯哒 嗪, 5.30 g ( 0.05 mol ) 无水碳酸钠和 20 mL N, N-二甲基乙酰 胺(DMA) ,室温下搅拌,然后慢慢滴加 6.54 g ( 0.05 raol) 4-哌啶乙醇 (溶于 lOmLDMA) ,滴毕后搅拌过夜,次日反应液倒入 100 mL蒸馏水中,用 200 mL二氯甲烷分三次萃取, 合并萃取液, 用无水 NaS04干燥。浓缩,经柱层析分离(洗脱剂石油醚:丙酮 =10: 3)得到 2 - [1- ( 3, 6-二氯-哒嗪 -4-基) -哌啶 -4 -基] -乙醇 6 g, 收率: 43.6%, ^-NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) δρριη: 1.21 -1.31 (m, 2H) , 1.39 - 1.43 (m, 2H ) , 1.59 - 1.67 ( m, 1H) , 1.76~1.79(dbrs, 2H), 2.82 ~ 2.88 ( dt , 2H, J=llHz) , 3.45-3.49 (ra, 2H) , 3.70 - 3.73 (dbrs, 2H ) , 4.40 - 4.42 ( t, 1H, J=5Hz) , 7.35 ( s, 1H) 。

25.2: 4- {2- [1- (3, 6-二氯-哒嗪 -4-基-) -哌啶 -4-基〗 -乙 氧基 } -苯腈

50 mL干燥的三颈瓶中加入 0.554 g ( 0.002 mol ) 自制 2- [1- ( 3, 6 -二氯 -哒嗪 -4-基) -哌啶 -4-基]-乙醇, 0.20g( 0.002 mol) 对羟基苯腈, Q.612 g 三苯基膦,冰浴同时氮气保护条件下向瓶 中注入 15 mL的无水四氢呋喃, 然后向瓶中滴加溶于 5mL无水四 氢呋喃的偶氮二甲酸二乙酯(DEAD) 0.35 mL, 滴加完毕后,升至 室温, 搅拌过夜。次日,旋干溶剂,剩余物倒入 100 mL水中,用 150 mL二氯甲烷分三次萃取, 合并萃取液用无水 NaS04干燥。浓 缩, 经柱层析(洗脱剂石油醚:乙酸乙酯:甲醇 =10: 3: 0.1) 分离, 得到 0.26 g 4-{2-[1- ( 3, 6 -二氯 -哒嗪 -4-基-) -哌啶 -4-基] -乙氧基}-苯腈,白色固体。收率: 34.0%, m. p.l38~139°C0 'HNMR ( 400MHz, CDC13) 6ppm: 1.49 - 1.55 ( m, 2H ) , 1.83-1.86 (m, 3H) , 1.91 - 1.94 (dbrs, 2H ) , 2.82 - 2.87 (dt, 2H, J=ll.4Hz) , 3.76 - 3.79 (dbrs, 2H ) , 4.08 4.11 (t, 2H, J=5.8Hz) , 6.85 ( s, 1H) , 6.94 - 6.96 (d, 2H, J=8.8Hz ) , 7.58-7.61 (d, 2H, J=8.8Hz ) , 7.40 (s, 1H) 。

EI-MS m/e: 376 [Ml , 258, 244, 228, 176, 119, 112。

实施例 26: 1- ( 4-{2-[l- ( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基) -哌啶 -4-基] -乙氧基}-苯基) -乙酮

按 25.2方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 1- ( 4-羟基-苯基) -乙酮。得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 42.5%, m. p.99 - 100 °C。 ^-NMR ( 400MHz, CDC13) 6ppm: 1.49-1.52 (m, 2H) , 1.84 - 1.86 ( m, 3H ) , 1.92 - 1.95 (m, 2H) , 2.57 ( s, 3H) , 2.81 - 2.88 ( m, 2H ) , 3.76 ~ 3.79 ( m, 2H ) , 4.11 ~ 4.14 ( t, 2H, J=5.9Hz), 6.85 (s, 1H), 6.92-6.95 ( m, 2H ) , 7.93 - 7.96 (m, 2H) 。 EI-MS m/e: 393.0 [M+] , 378.0, 358.0,

258.0, 227.9, 201.9, 175.9, 121.0, 77.0

实施例 27: 化合物 3, 6-二氯 -4-{4-[2- ( 4-硝基-苯基) -乙基] -哌啶 - 1-基} -哒漆

按 25.2方法制备该化合物,将所用的酚替换为 4-硝基苯酚。 得到标题化合物, 其为白色固体, 收率: 30.5%, m. p.162-164 °C。 ^-NMR ( 400MHz, CDC13) 6ppm: 1.47 - 1.56 ( m, 2H ) ,

1.82 - 1.94 (m, 5H) , 2.81 - 2.87 ( m, 2H ) , 3.76 - 3.79 ( m, 2H) , 4.11-4.14 ( t, 2H, J=5.9Hz ) , 6.85 (s, 1H) , 6.93-6.97 (m, 2H) , 8.18-8.22 (in, 2H ) 。

EI -MS m/e: 396 [M+] , 258, 228, 244, 176, 109, 67。

实施例 28: 4- {2-[1- ( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基) -哌啶 -4-基] -乙氧基 } -苯甲酸甲酯

按 25.2方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 4-羟基苯甲 酸甲酯。得到标题化合物,其为白色固体,收率: 36.5%, m. p.115 ~ 117 °C。 -NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) δρριη: 1.32 - 1.40 (m, 2Η) , 1.75 (brs, 3Η), 1.83~1.86(d, 2Η, J=12.3Hz ) , 2.85- 2.91 (m, 2H) , 3.72- 3.75 (d, 2H, J=12.3Hz ) , 4.12-4.15 ( t, 2H, J=6.2Hz) , 7.05 ~ 7.07 ( dd, 2H, J=8.7Hz ) , 7.36 ( s, 1H) , 7.90 - 7.92 (dd, 2H, J=8.7Hz ) 。

EI -MS m/e: 409.0 [Ml , 374.1, 258.0, 228.0, 175.9, 121.0。

实施例 29: 4-{2-[l- ( 3, 6 -二氯哒嗪- 4-基) -哌啶 -4-基] - 乙氧基 } -苯甲酸乙酯

按 25.2方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 4-羟基苯曱 酸乙酯。得到标题化合物,其为白色固体,收率 :26.5%, m. p.153-

155 °C。 ^NMR ( 400MHz, DMS0-D6 ) δρριπ: 1.16-1.19 ( t, 3H, J=7Hz) , 1.23 - 1.40 (m, 3H) , 1.75 ~ 1.76 ( brs, 2H), 1.83-1.86 (d, 2H, J=12.3Hz ) , 2.85-2.91 (dt, 2H, J=12.3Hz ) , 3.72 ~ 3.76 ( d, 2H, J=12.3Hz ), 4.12-4.15( t, 2H, J=6.2Hz ), 4.24 - 4.30 (q, 2H, J=7Hz ) , 7.05 - 7.07 (dd, 2H, J=9Hz ) , 7.36 ( s, 1H) , 7.90 - 7.92 (dd, 2H, J=9Hz ) 。

EI -MS m/e: 423 [M+], 379.0, 351.0, 257.9, 227.9, 175.9, 120.9。

实施例 30: 3, 6 -二氯 -4- {4- [2- (4-甲氧基 -苯氧基)-乙基〗 -哌啶 -1-基} -哒嗪

按 25.2方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 4-甲氧基苯 酚。得到标题化合物, 其为白色固体,收率: 37.5%, m. p.119-120 。C。 ^-NMIU 400MHz, CDC13) 6ppm: 1.44 - 1.53 (m, 2H ),

1.77 - 1.82 (m, 3H ) , 1.91 ~ 1.94 ( d, 2H, J=12.3Hz ) , 2.81 - 2.87 (m, 2H), 3.75 - 3.77 (d, 2H, J=9.8Hz ), 3.77 ( s, 3H ) , 3.98-4.01 (t, 2H, J=5.6Hz ) , 6.83 - 6.85 (m, 5H ) 。

EI- MS m/e: 381 [M+] , 346, 258, 229.9, 201.9, 175.9, 124.0, 109.0。

实施例 31: 化合物 mcl040709 6- {2- [4- ( 3, 6-二氯 -哒嗪 -4 -基)哌嗪- 1 -基] -乙氧基} -尼克酸乙酯

31.1 6-羟基尼克酸乙酯

100 raL三颈瓶中加入 0.84 g ( 0.006 mol ) 的 6-羟基尼克酸, 30 mL无水乙醇,搅拌下滴加 3 mL浓硫酸,回流过夜,减压蒸除 过多的乙醇, 倒入水中, 用乙酸乙酯萃取,用饱和的碳酸氢钠溶 液洗涤, 用无水的硫酸钠干燥。 浓缩后得到 0.8 g6-羟基尼克酸 乙酯。 收率: 80%。

31.26-{2-[4-( 3, 6-二氯-哒嗪 -4-基)哌嗪- 1-基] -乙氧基} -尼克酸乙酯

50 mL干燥的三颈瓶中加入 0.554 g ( 0.002 mol ) 自制 2-[4- ( 3, 6-二氯-哒嗪- 4-基 )-哌嗪 -1-基]-乙醇, 0.28 g (0.002 mol) 6-羟基尼克酸乙酯, 0.612 g 三苯基膦,冰浴同时氮气保护条件下 向瓶中注入 15 raL 的无水四氢呋喃,然后向瓶中滴加溶于 5 mL 无水四氢呋喃的偶氮二曱酸二乙酯(DEAD) 0.35 mL, 滴加完毕后, 升至室温, 搅拌过夜。次日旋干溶剂, 剩余物倒入 100 mL水中, 用 150 mL二氯甲烷分三次萃取, 合并萃取液用无水 NaS04干燥。 浓缩,经柱层析(洗脱剂 石油醚: 乙酸乙酯:曱醇 =10: 5: 0.15) 分离, 得到 0.32 g 4- {2- [4- ( 3, 6 -二氯 -哒嗪 -4-基-) -哌嗪 -1-基] -乙氧基}-苯乙酸甲酯, 白色固体。收率: 42.3%, m. p.140-141。C。 -腿( 400MHz, CDC13) δρριη: 1.37-1.41 ( t, 3Η, J=7.3Hz) , 2.79 (brs, 4Η ) , 2.91 (brs, 2Η ) , 3.36 (brs, 4H) , 4.35 - 4.40 (q, 2H, J=7.3Hz ), 4.57 (brs, 2H ), 6.78-6.80 ( d, 2H, J=8.7Hz) , 6.86 ( s, 1H ) , 8.16 - 8.18 (dd, 1H, J!=8.7Hz, J2=2.2Hz) 。

EI-MS ra/e: 425 [M+] , 258, 244.9, 223, 194.0, 175.0, 82.0, 70.0。

实施例 32: 6- {2- [4- ( 3, 6-二氯哒嗪 -4-基)哌嗪 -1-基〗 -乙氧基 } -尼克酸甲酯

按 31.2方法制备该化合物, 将所用的酚替换为 6-羟基尼克 酸曱酯。得到标题化合物,其为白色固体,收率: 36.5%, in. p.145-146 °C。—NMR ( 400MHz, CDC13) 6ppm: 2.65 - 2.66 ( ra, 4H ) , 2.77 - 2.80 ( t, 2H, J=5.6Hz ) , 3.33 - 3.34 ( ra, 4H) , 4.48-4.51 ( t, 2H, J=5.6Hz ) , 6.94-6.96 ( d, 1H, J=8.7Hz ), 7.38 ( s, 1H) , 8.15 ~ 8· 18 (m, 1H ) , 8.74 ~ 8.75 ( d, 1H, J=2.2Hz ) , EI-MS ra/e: 411.1[M+], 376.1, 258.1, 245.1, 223.1, 202.1, 180.1, 82.1, 70.1。

实施例 33: 本发明化合物在体外模型上的抗小 RNA病毒活性 实验材料

HeLa细胞(本实验室自存)

鼻病毒 3 ( HRV-3 ) ( ATCC: VR— 1113 )

大耳白兔(军事医学科学院实验动物中心提供)

预防给药

原理: 药物与病毒预先混合温育, 以阻止病毒脱壳侵入细胞 这一过程。

方法: 药物以 lOOng/ml浓度加入到 12孔板中, 而后加入 TCID5。值约为 100的病毒剂量, 0.5h后,向每个孔中加入 50万细 胞, 于 33°C孵育,三天后在病毒对照组呈现 100%细胞病变效应 (CPE)时,考察药物保护细胞免遭吞噬的效果, 以细胞保护率(%) 表示。 预防给药结果表明, 不同化合物对防止细胞吞噬均有不同 程度的保护作用; 其中药效较好的为实施例 4、 13、 31和 32化合 物 (见图 1) 。

治疗给药

目的: 对预防给药中效果较好的药物进行进一步筛选。

方法: 每个孔中加入 50万细胞,于 33。C孵育过夜以贴壁, 而后加入 TCID5。值约为 100的病毒剂量, 0.5h后吸去培养液,药 物以 100ng/ml浓度加入到 12孔板中,反应体系总体积为 2ml, 三天后在病毒对照组呈现 100%细胞吞噬作用(CPE)时,考察药物

保护细胞免遭吞噬的效果。 结果表明, 化合物对防止细胞吞噬均 有不同程度的保护作用;其中效果较好的药物为实施例 31化合物 (见图 2) 。

离体水平抗鼻病毒药物筛选初步结果

气管环的制备: 兔子经静脉注射过量戊巴比妥钠处死, 而后 取出气管,剥去与其相连的组织和上皮细胞,将气管分成 6至 8腿 宽的环。

药物处理方法: 将气管环放入 1640+2%FCS营养液中,同时加入药 物(终浓度 lOO g/ml)和鼻病毒(终浓度 106), 33°C 反应 90min 后,再用 23°C反应 24h。 lO g/ml无明显疗效。

收缩与舒张强度测定: 气管环纵向悬于三角支架上, 在 37°C Havard 20- ml organ bath 水浴中达到平衡。暴露于 AChlO-7 - 10-3M,记录每一浓度的最大收缩或最大舒张力,结果见表 1和图 3。

表 1.实施例 31化合物的离体水平实验数据 (1)

ACh浓度 ( log M)

张力 (g) -7 -6 -5.7 -5.3 -5 -4.7 -4.3 -4 -3.7 -3 药物 31 0.00 0.11 0.35 0.73 1.00 1.30 1.54 1.72 1.86 1.95 平均值

病毒 0.00 0.11 0.53 1.06 1.66 1.92 2.32 2.62 2.87 3.05 平均值

对照 0.00 0.13 0.40 0.61 0.86 1.29 1.50 1.79 2.07 2.34 平均值

SD

(实施例 0.00 0.09 0.31 0.43 0.45 0.48 0.52 0.58 0.59 0.56 31化合物 )

SD

0.12 0.23 0.48 0.56 0.84 0.92 0.91 0.96 1.05 1.12

(病毒)

SD

0.06 0.21 0.37 0.54 0.63 0.57 0.63 0.55 0.56 0.65 (对照)

如图 3所示, Ach可引起剂量依赖性的平滑肌张力增加, 鼻 病毒可增强 Ach诱导的气管平滑肌张力增加的幅度,实施例 31化 合物可明显拮抗鼻病毒引起的 Ach诱导的气管平滑肌张力过度增 加。