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1. (WO2006087465) METHOD FOR PREPARING SYNTHETIC FRAGMENTS OF BICATENARY NUCLEIC ACIDS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2006/087465    International Application No.:    PCT/FR2006/000342
Publication Date: 24.08.2006 International Filing Date: 15.02.2006
IPC:
C12N 15/66 (2006.01), C12Q 1/68 (2006.01), C12P 19/34 (2006.01), C07H 21/00 (2006.01)
Applicants: UNIVERSITE DE LA MEDITERRANEE (AIX-MARSEILLE II) [FR/FR]; Jardin du Pharo, 58, boulevard Charles Livon, F-13284 Marseille Cedex 07 (FR) (For All Designated States Except US).
ASSISTANCE PUBLIQUE - HOPITAUX DE MARSEILLE [FR/FR]; 80, rue Brochier, F-13354 Marseille Cedex 05 (FR) (For All Designated States Except US).
HENRY-MARY, Mireille [FR/FR]; (FR) (For US Only).
RAOULT, Didier [FR/FR]; (FR) (For US Only).
TAMALET, Catherine [FR/FR]; (FR) (For US Only)
Inventors: HENRY-MARY, Mireille; (FR).
RAOULT, Didier; (FR).
TAMALET, Catherine; (FR)
Agent: DOMANGE, Maxime; Cabinet Beau de Loménie, 232, avenue du Prado, F-13295 Marseille Cedex 08 (FR)
Priority Data:
0501495 15.02.2005 FR
Title (EN) METHOD FOR PREPARING SYNTHETIC FRAGMENTS OF BICATENARY NUCLEIC ACIDS
(FR) METHODE DE PREPARATION DE FRAGMENTS SYNTHETIQUES D'ACIDES NUCLEIQUES BICATENAIRES
Abstract: front page image
(EN)The invention relates to a method for preparing a synthetic fragment of nucleic acids, in which a large first fragment of double strand synthetic DNA of a determined sequence comprising a catemer concatenation in a determined order of a plurality of n second small adjacent synthetic DNA fragments is prepared. Said method comprises a first PCR-type amplification reaction step for a series of n oligonucleotides of determined sequences, without exogenous primers, in temperature conditions which enable the hybridisation of said oligonucleotides, followed by an elongation of the complex obtained, to be placed end-to-end in a determined order of said oligonucleotides, the sequences of said oligonucleotides corresponding successively and alternatively to the sense and antisense sequences of the different said second synthetic fragments, and each oligonucleotide containing, in the regions 5' and 3' thereof, sequences which are complementary to those of the following and preceding oligonucleotides, if necessary. The inventive method also comprises a second step for amplification by means of specific primers of the ends 5' and 3' of said direct strand of said large first synthetic fragment to be prepared, enabling identical copies of the large first fragment to be produced.
(FR)La présente invention concerne une méthode de préparation d'un fragment synthétique d'acides nucléiques dans laquelle on prépare un grand premier fragment d'ADN synthétique double brin de séquence déterminée comprenant un enchaînement dans un ordre déterminé d'une pluralité de n deuxièmes petits fragments d'ADN synthétiques contigus, comprenant : une première étape de réaction d'amplification de type PCR en d'une série de n oligonucléotides de séquences déterminées, sans amorces exogènes, dans des conditions de températures permettant l'hybridation des dits oligonucléotides entre eux , suivie d'une élongation du complexe obtenu, destinée à mettre bout à bout dans un ordre déterminé les dits oligonucléotides, les séquences desdits oligonucléotides correspondant succes sivement et alternativement aux séquences sens et anti-sens des différents dits deuxièmes fragments synthétiques, et chaque dit oligonucléotide contenant dans ses régions 5' et 3' des séquences complémentaires de celles des oligonucléotides suivants et précédents, le cas échéant, et une deuxième étape d'amplification à l'aide d'amorces spécifiques des extrémités 5' et 3' du dit brin directe dudit grand premier fragment synthétique à préparer, permettant de produire des copies identiques dudit grand premier fragment.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: French (FR)
Filing Language: French (FR)