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1. (WO2006084754) VECTORS, CELL LINES AND THEIR USE IN OBTAINING EXTENDED EPISOMAL MAINTENANCE REPLICATION OF HYBRID PLASMIDS AND EXPRESSION OF GENE PRODUCTS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2006/084754    International Application No.:    PCT/EP2006/001275
Publication Date: 17.08.2006 International Filing Date: 13.02.2006
IPC:
C12N 15/86 (2006.01), C12N 5/10 (2006.01)
Applicants: RAKUVABRIK OÜ [EE/EE]; Nooruse 9, EE-50411 Tartu (EE) (For All Designated States Except US).
SILLA, Toomas [EE/EE]; (EE) (For US Only).
TAGEN, Ingrid [EE/EE]; (EE) (For US Only).
GEIMANEN, Jelizaveta [EE/EE]; (EE) (For US Only).
JANIKSON, Kadri [EE/EE]; (EE) (For US Only).
ABROI, Aare [EE/EE]; (EE) (For US Only).
USTAV, Ene [EE/EE]; (EE) (For US Only).
USTAV, Mart [EE/EE]; (EE) (For US Only).
MANDEL, Tiiu [EE/EE]; (EE) (For US Only)
Inventors: SILLA, Toomas; (EE).
TAGEN, Ingrid; (EE).
GEIMANEN, Jelizaveta; (EE).
JANIKSON, Kadri; (EE).
ABROI, Aare; (EE).
USTAV, Ene; (EE).
USTAV, Mart; (EE).
MANDEL, Tiiu; (EE)
Agent: SEPPO LAINE OY; Itämerenkatu 3 B, FI-00180 Helsinki (FI)
Priority Data:
60/652,390 11.02.2005 US
Title (EN) VECTORS, CELL LINES AND THEIR USE IN OBTAINING EXTENDED EPISOMAL MAINTENANCE REPLICATION OF HYBRID PLASMIDS AND EXPRESSION OF GENE PRODUCTS
(FR) VECTEURS, LIGNEES CELLULAIRES ET LEUR UTILISATION POUR OBTENIR UNE REPLICATION DE MAINTENANCE EPISOMIQUE ETENDUE DE PLASMIDES HYBRIDES ET EXPRESSION DE PRODUITS GENIQUES
Abstract: front page image
(EN)This disclosure shows that the BPV-1 E2 protein-dependent minichromosome maintenance element (MME) comprised of E2 multimeric binding sites can provide the stable maintenance replication function to the mouse polyomavirus (PyV) core origin plasmids in the presence of BPV-1 E2 protein and PyV large T-antigen (LT). MME dependent plasmids are lost with the frequency of 6% per generation. Significanly long stable maintenance replication can also be provided without selection pressure. We also demonstrate that PyV core origin maintenance function/replication activation could be provided by Epstein-Barr virus Family of repeats and EBNA1 protein. The maintenance of the Polyomavirus core origin plasmid was characterized by 13% loss of the plasmid during one cell generation in the case of EBV FR harboring plasmids. Our data clearly indicate that maintenance functions from different viruses can provide segregation/partitioning function to different heterologous origins in variety of cells and can be used in expression of gene products.
(FR)L'invention indique que l'élément de maintenance de minichromosome protéine-dépendant BPV-1 E2 (MME) comprenant des sites de liaison multimères E2 peut offrir une fonction de réplication de maintenance stable aux plasmides originaux de base du polyomavirus de la souris (PyV) en présence de la protéine BPV-1 E2 et l'antigène T important du PyV (LT). Les plasmides MME dépendants sont perdus à la fréquence de 6 % par génération. La réplication de maintenance stable prolongée de manière significative peut également être obtenu sans pression de sélection. L'invention indique également que l'activation de la fonction/réplication de maintenance originale de base du PyV peut être obtenue par la famille du virus d'Epstein-Barr de séquences nucléotidiques répétées et de la protéine EBNA1. La maintenance du plasmide orignal de base du polyomavirus se caractérise par 13 % de perte de plasmide au cours d'une génération cellulaire dans le cas de plasmides hébergeant EBV FR. Les données de l'invention indiquent nettement que les fonctions de maintenance provenant de différents virus peuvent offrir une fonction de ségrégation/séparation à différentes origines hétérologues dans une variété de cellules et peuvent s'utiliser dans l'expression de produits géniques.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)