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1. (WO2006082496) METHOD FOR DETERMINING HIV-1 VIRAL LOAD
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2006/082496    International Application No.:    PCT/IB2006/000182
Publication Date: 10.08.2006 International Filing Date: 01.02.2006
IPC:
C12Q 1/70 (2006.01)
Applicants: NATIONAL HEALTH LABORATORY SERVICE [ZA/ZA]; cnr De Korte and Hospital Streets, Braamfontein, 2001 Johannesburg (ZA) (For All Designated States Except US).
UNIVERSITY OF THE WITWATERSRAND [ZA/ZA]; 1 Jan Smuts Avenue, 2050 Johannesburg (ZA) (For All Designated States Except US).
REKHVIASHVILI, Natela [ZA/ZA]; (ZA) (For US Only).
STEVENS, Gwynneth [ZA/ZA]; (ZA) (For US Only).
STEVENS, Wendy [ZA/ZA]; (ZA) (For US Only)
Inventors: REKHVIASHVILI, Natela; (ZA).
STEVENS, Gwynneth; (ZA).
STEVENS, Wendy; (ZA)
Agent: GILSON, David, Grant; Spoor & Fisher, Building No. 13, Highgrove Office Park, Oak Avenue, Centurion, P.O. box 454, 0001 Pretoria (ZA)
Priority Data:
2005/0917 01.02.2005 ZA
Title (EN) METHOD FOR DETERMINING HIV-1 VIRAL LOAD
(FR) PROCEDE POUR DETERMINER UNE CHARGE VIRALE VIH-1
Abstract: front page image
(EN)The invention provides an HIV-1 viral load assay using real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT PCR). The assay includes the steps of extracting viral RNA from a plasma sample from a patient; adding at least two primers which are specific to a highly conserved region of the HIV-1 gag gene to the viral RNA from the patient, at least one of the primers being fluorescently-labeled; amplifying the viral RNA from the patient using a real-time reverse transcription (RT) polymerase chain reaction (PCR) method; and applying the results from the amplification step to a standard curve prepared using at least one external standard of known concentration, the external standard comprising an external standard molecule including a RNA sequence equivalent to a highly conserved region of the HIV-1 gag gene. The fluorescently-labeled primer is typically a LUX primer. An internal control may be added to a duplicate sample of viral RNA from the patient, so as to detect false negative results. A kit for performing the assay is also described.
(FR)L'invention concerne une analyse de charge virale VIH-1 réalisée au moyen de la réaction en chaîne par polymérase-transcriptase inverse en temps réel (RT PCR). L'analyse comprend les opérations suivantes : extraire un ARN viral d'un échantillon de plasma d'un patient; ajouter au moins deux amorces spécifiques d'une zone hautement conservée du gène gag du VIH-1 à l'ARN viral du patient, au moins une des amorces étant marquée par fluorescence; amplifier l'ARN viral du patient par le procédé de réaction en chaîne par polymérase (PCR)- transcription inverse en temps réel (RT); appliquer les résultats de l'amplification à une courbe d'étalonnage préparée au moyen d'au moins un standard externe de concentration connue, ce standard externe comprenant une molécule standardisée externe contenant une séquence ARN équivalente à une zone hautement conservée du gène gag du VIH-1. L'amorce marquée par fluorescence est en général une amorce LUX. Un contrôle interne peut être ajouté à un double de l'échantillon d'ARN viral du patient, afin de détecter des résultats négatifs erronés. La présente invention porte également sur un kit pour réaliser cette analyse.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KN, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, LY, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, LV, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)