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1. (WO2005116245) CDNA PRODUCTION FROM CELLS AFTER LASER MICRODISSECTION
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2005/116245    International Application No.:    PCT/DE2005/000979
Publication Date: 08.12.2005 International Filing Date: 27.05.2005
Chapter 2 Demand Filed:    14.02.2006    
IPC:
C12Q 1/68 (2006.01), C12N 15/10 (2006.01)
Applicants: PHILIPPS-UNIVERSITÄT MARBURG [DE/DE]; Biegenstrasse 10, 35032 Marburg (DE) (For All Designated States Except US).
LISS, Birgit [DE/DE]; (DE) (For US Only)
Inventors: LISS, Birgit; (DE)
Agent: DR. MEYER-DULHEUER & PARTNER; Barckhausstrasse 12-16, 60325 Frankfurt am Main (DE)
Priority Data:
10 2004 026 744.8 28.05.2004 DE
Title (DE) ERFINDUNG BETREFFEND CDNA-HERSTELLUNG AUS ZELLEN NACH LASER-MIKRODISSEKTION
(EN) CDNA PRODUCTION FROM CELLS AFTER LASER MICRODISSECTION
(FR) PRODUCTION D'ADN COMPLEMENTAIRE A PARTIR DE CELLULES APRES MICRODISSECTION AU LASER
Abstract: front page image
(DE)Die Erfindung stellt ein neues Verfahren zur Herstellung von cDNA aus Einzelzellen nach Mikrodissektion zur Verfügung. Es hat den Vorteil, dass es kostengünstig ist und schnell in wenigen Arbeitsschritten auch von weniger geschultem Laborpersonal durchgeführt wird. Erstmals entfällt bei der Herstellung von cDNA aus Einzelzellen der aufwendige und riskante Schritt der RNA Isolation, indem Lyse und cDNA-Synthese im selben Reaktionsgefäss in einer Pufferlösung durchgeführt werden, die sichere kontaminationsfreie Ergebnisse liefert. Die Zusammensetzung des Puffers besteht aus NP40, Carrier-RNA und Super RNAsin, sowie dNTPs und cDNA Syntheseprimern.
(EN)The invention relates to a novel method for producing cDNA from individual cells after microdissection. The inventive method is inexpensive, comprises few steps and can be carried out also by less skilled laboratory personnel. The novel method for producing cDNA from individual cells obviates the time-consuming and risky step of RNA isolation by allowing for lysis and cDNA synthesis to be carried out in the same reaction vessel in a buffer solution which yields reliable contamination-free results. The buffer is composed of NP40, carrier DNA and Super RNAsin©, as well as dNTPs and cDNA synthesis primers.
(FR)La présente invention concerne un nouveau procédé pour produire de l'ADN complémentaire à partir de cellules individuelles après une microdissection. Cette invention est avantageuse en ce qu'elle est économique et en ce qu'elle peut être mise en oeuvre rapidement en peu d'étapes de travail et ce, même par du personnel de laboratoire peu qualifié. Lors de la production d'ADN complémentaire à partir de cellules individuelles, l'étape coûteuse et risquée d'isolation d'ARN n'est plus nécessaire, en ce que la lyse et la synthèse d'ADN complémentaire ont lieu dans le même récipient de réaction dans une solution tampon qui donne des résultats plus sûrs et non contaminés. La composition du tampon est constituée de NP40, d'ARN porteur, de super ARNsine et de dNTP et d'amorces de synthèse d'ADN complémentaire.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KM, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NG, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SM, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IS, IT, LT, LU, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: German (DE)
Filing Language: German (DE)