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1. (WO2005037858) TEMPLATE-DIRECTED ASSEMBLY OF RECEPTOR SIGNALING COMPLEXES
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2005/037858    International Application No.:    PCT/US2004/034201
Publication Date: 28.04.2005 International Filing Date: 15.10.2004
IPC:
A61K 39/385 (2006.01), A61K 39/108 (2006.01), C07K 1/00 (2006.01)
Applicants: UNIVERSITY OF MASSACHUSETTS [US/US]; One Beacon Street, Boston, MA 02108 (US) (For All Designated States Except US).
WEIS, Robert, M. [US/US]; (US) (For US Only).
SHROUT, Anthony, L. [US/US]; (US) (For US Only).
MONTEFUSCO, David, J. [US/US]; (US) (For US Only)
Inventors: WEIS, Robert, M.; (US).
SHROUT, Anthony, L.; (US).
MONTEFUSCO, David, J.; (US)
Agent: DEKRUIF, Rodney, D.; Reinhart Boerner Van Deuren s.c., 1000 North Water Street, Suite 2100, Milwaukee, WI 53202 (US)
Priority Data:
60/511,997 16.10.2003 US
Title (EN) TEMPLATE-DIRECTED ASSEMBLY OF RECEPTOR SIGNALING COMPLEXES
(FR) ASSEMBLAGE ORIENTE VERS UN MODELE DE COMPLEXES DE SIGNALISATION DE RECEPTEUR
Abstract: front page image
(EN)Transmembrane receptors in the signaling pathways of bacterial chemotaxis systems influence cell motility by forming noncovalent complexes with the cytoplasmic signaling proteins to regulate their activity. The requirements for receptor-mediated activation of CheA, the principal kinase of the Escherichia coli chemotaxis signaling pathway, can be demonstrated using self-assembled clusters of a receptor fragment (CF) derived from the cytoplasmic domain of the aspartate receptor, Tar. Histidine-tagged Tar CF can be assembled on the surface of unilamellar vesicles via a lipid containing the Nickel-nitrilotriacetic acid moiety as a headgroup. The stability of such a complex can be controlled by the properties of the template including the size and composition, which can be used, for example, to vary the 2-dimensional concentration of receptor fragments. Surface-assembled CF is also found to serve as a substrate for receptor methylation, which is catalyzed by the receptor transferase. Since neither CheA activation nor CF methylation is observed in comparable samples in the absence of vesicles, it is concluded that surface-templating generates the organization among CF subunits required for biochemical activity.
(FR)L'invention concerne des récepteurs transmembranaires de voies de signalisation de systèmes chimiotaxiques bactériens influençant une motilité cellulaire, par la formation de complexes non covalents, à l'aide de protéines de signalisation cytoplasmiques, pour en réguler l'activité. Les exigences de l'activation médiée par un récepteur de CheA, la kinase principale de la voie de signalisation chimiotaxique d'<i>Escherichia coli</i>, peut être démontrée au moyen de groupes autoassemblés d'un fragment de récepteur (CF) dérivé du domaine cytoplasmique du récepteur d'aspartate, Tar. Le CF Tar marqué d'histidine peut être assemblé à la surface de vésicules unilamellaires par un lipide contenant une fraction d'acide nitrilotriacétique de nickel, en tant que groupe de tête. La stabilité d'un tel complexe peut être contrôlée par les propriétés du modèle, notamment la taille et la composition, qui peuvent être utilisées, par exemple, pour faire varier la concentration bidimensionnelle des fragments de récepteur. Le CF assemblé en surface peut également servir de substrat pour une méthylation de récepteur catalysée par la transférase du récepteur. Puisque, ni l'activation de CheA, ni la méthylation de CF n'est observée dans des échantillons comparables, en l'absence de vésicules, on en conclut que la création de modèle en surface génère l'organisation de sous-unités CF requise pour une activité biochimique.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
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European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IT, LU, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)