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1. (WO2005035751) METHOD OF QUICKLY AND EFFICIENTLY SELECTING HIGH-FUNCTIONING PROTEIN, HIGH-FUNCTIONING PROTEIN THUS OBTAINED, METHOD OF PRODUCING THE SAME AND METHOD OF USING THE SAME
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2005/035751    International Application No.:    PCT/JP2004/015290
Publication Date: 21.04.2005 International Filing Date: 15.10.2004
IPC:
C12N 15/10 (2006.01), G01N 33/68 (2006.01)
Applicants: KEIO UNIVERSITY [JP/JP]; 15-45, Mita 2-chome Minato-ku, Tokyo 108-8345 (JP) (For All Designated States Except US).
YANAGAWA, Hiroshi [JP/JP]; (JP) (For US Only).
TABATA, Noriko [JP/JP]; (JP) (For US Only).
KOJOH, Kanehisa [JP/JP]; (JP) (For US Only)
Inventors: YANAGAWA, Hiroshi; (JP).
TABATA, Noriko; (JP).
KOJOH, Kanehisa; (JP)
Agent: KAWAGUCHI, Yoshiyuki; Acropolis 21 Building 6th Floor 4-10, Higashi Nihonbashi 3-chome Chuo-ku, Tokyo 103-0004 (JP)
Priority Data:
2003-355702 15.10.2003 JP
Title (EN) METHOD OF QUICKLY AND EFFICIENTLY SELECTING HIGH-FUNCTIONING PROTEIN, HIGH-FUNCTIONING PROTEIN THUS OBTAINED, METHOD OF PRODUCING THE SAME AND METHOD OF USING THE SAME
(FR) PROCEDE DE SELECTION RAPIDE ET EFFICACE DE PROTEINES A HAUTE FONCTIONNALITE, PROTEINES A HAUTE FONCTIONNALITE OBTENUES PAR CE PROCEDE, ET PROCEDE DE PRODUCTION ET D'UTILISATION DESDITES PROTEINES
(JA) 高機能性タンパク質の迅速、高効率な選択法、それによって得られる高機能性タンパク質、およびその製造方法と利用方法
Abstract: front page image
(EN)A method of quickly and efficiently selecting a high-functioning protein or a nucleic acid encoding the same by selecting a protein interacting with a target molecule or a nucleic acid encoding the same through the following steps (a) to (d). (a) The step of constructing a protein-encoding DNA library. (b) The step of transcribing DNAs in the library constructed in the above (a), attaching a spacer carrying puromycin to the 3’-end of the transcribed RNAs, and then constructing a library of molecules assigned to genotype and phenotype in a cell-free translation system. (c) The step of heating the library of the assigned molecules. (d) The step of bonding each assigned molecule to the target molecule, thoroughly washing, eluting and then amplifying the nucleic acid moiety by reverse transcription -PCR or PCR.
(FR)L'invention concerne un procédé de sélection rapide et efficace d'une protéine à haute fonctionnalité ou d'un acide nucléique codant la protéine, par sélection d'une protéine interagissant avec une molécule cible ou d'un acide nucléique codant la protéine. Le procédé consiste à: a) créer une bibliothèque d'ADN codant la protéine; b) transcrire les ADN dans la bibliothèque créée en a), attacher un bras contenant puromycine à l'extrémité 3' des ARN transcrits, puis créer une bibliothèque de molécules affectées au génotype et au phénotype dans un système de traduction exempt de cellules; c) chauffer la bibliothèque de molécules affectées; d) lier chaque molécule affectée à la molécule cible, puis laver à fond, éluer et amplifier le fragment d'acide nucléique par RT-PCR ou PCR.
(JA) 以下の工程(a)~(d)により、標的分子と相互作用するタンパク質またはそれをコードする核酸を選択することにより高機能性タンパク質またはそれをコードする核酸を迅速かつ高効率に選択する方法。 (a)タンパク質をコードするDNAのライブラリーを調製する工程。 (b)(a)で調製されたライブラリーのDNAを転写し、転写されたRNAの3'末端にピューロマイシンのついたスペーサーを連結した後、無細胞翻訳系において遺伝子型と表現型の対応付け分子のライブラリーを構築する工程。 (c)対応付け分子のライブラリーを加熱処理する工程。 (d)対応付け分子を標的分子に対して結合させ、十分洗浄した後、溶出し、核酸部を逆転写-PCRまたはPCRによって増幅させる工程。
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
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European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IT, LU, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
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Publication Language: Japanese (JA)
Filing Language: Japanese (JA)