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1. (WO2005017197) METHOD FOR EARLY DETECTION AND MONITORING OF DISEASES BY ANALYSIS OF CELL-SURFACE-BOUND NUCLEIC ACIDS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2005/017197    International Application No.:    PCT/EP2004/009218
Publication Date: 24.02.2005 International Filing Date: 17.08.2004
IPC:
C12Q 1/68 (2006.01), G01N 33/50 (2006.01), G01N 33/92 (2006.01)
Applicants: UNIVERSITÄTSKLINIKUM SCHLESWIG-HOLSTEIN [DE/DE]; Ratzeburger Allee 160, 23538 Lübeck (DE) (For All Designated States Except US).
SCZAKIEL, Georg [DE/DE]; (DE) (For US Only).
VLASSOV, Valentin [RU/RU]; (RU) (For US Only).
LAKTIONOV, Pavel [RU/RU]; (RU) (For US Only).
RYKOVA, Elena [RU/RU]; (RU) (For US Only).
TAMKOVIC, Svetlana [RU/RU]; (RU) (For US Only).
SKVORTSOVA, Tat'yana [RU/RU]; (RU) (For US Only)
Inventors: SCZAKIEL, Georg; (DE).
VLASSOV, Valentin; (RU).
LAKTIONOV, Pavel; (RU).
RYKOVA, Elena; (RU).
TAMKOVIC, Svetlana; (RU).
SKVORTSOVA, Tat'yana; (RU)
Agent: BIEHL, Christian; Boehmert & Boehmert, Niemannsweg 133, 24105 Kiel (DE)
Priority Data:
2003125486 18.08.2003 RU
Title (EN) METHOD FOR EARLY DETECTION AND MONITORING OF DISEASES BY ANALYSIS OF CELL-SURFACE-BOUND NUCLEIC ACIDS
(FR) PROCEDE DE DETECTION PRECOCE ET DE SURVEILLANCE DE MALADIES PAR L'ANALYSE D'ACIDES NUCLEIQUES LIES A LA SURFACE DES CELLULES
Abstract: front page image
(EN)The invention belongs to the field of diagnostic medicine, to be more exact to the field of development of noninvasive methods of early detection of different sickness, like precancerous state, early stages of cancer development, pathologies of pregnancy, monitoring of efficacy of anticancer therapy, etc. The method based on investigation of cell-surface-bound extracellular nucleic acids from human blood, namely the blood is divided into plasma and cellular fractions, cellular fraction is further divided into leucocytes and erythrocytes, cell-surface-bound extra-cellular nucleic acids are eluted form cell surface with PBS-EDTA treatment or treatment of cells with trypsin solution, eluted nucleic acids are isolated with convenient method and analyzed for presence of at least two specific sequences associated with illness of interest with use of corresponding method of investigation of nucleic acids such as PCR analysis, multiplex PCR, hybridization assay or other methods of investigation of specific sequences of nucleic acids. The method enables to increase the reliability of early detection of the diseases concerned with abnormal functioning of genetic apparatus of cells, due to increase of sensitivity of detection of specific DNA and RNA sequences in the fraction of nucleic acids associated with cell surface of blood cells in comparison with nucleic acids isolated from plasma fraction. This is especially important for early detection of early stages of pathologies when the most part of nucleic acids circulating in the blood are associated with cell surface of blood cells.
(FR)L'invention concerne le domaine du diagnostic médical et plus particulièrement le domaine du développement de méthodes non invasives de détection précoce de différentes maladies telles que les états précancéreux, les premières phases d'un développement cancéreux, les pathologies de la grossesse, ainsi que la surveillance de l'efficacité d'une thérapie anticancéreuse, etc. La méthode de l'invention est basée sur la recherche concernant des acides nucléiques extra-cellulaires liés à la surface des cellules du sang humain. Selon cette méthode, le sang est divisé en plasma et en fractions cellulaires, une fraction cellulaire est subdivisée en leucocytes et en érythrocytes, les acides nucléiques extra-cellulaires liés à la surface des cellules sont élués de la surface cellulaire par traitement PBS-EDTA ou par traitement des cellules au moyen d'une solution de trypsine, les acides nucléiques ainsi élués sont aisément isolés puis analysés quant à la présence d'au moins deux séquences spécifiques associées à la maladie concernée, en appliquant la méthode de recherche correspondante pour les acides nucléiques comme l'analyse PCR, le PCR multiplex, le test d'hybridation ou d'autres méthodes de recherche concernant des séquences spécifiques des acides nucléiques. Cette méthode permet d'augmenter la fiabilité de la détection précoce de maladies associées à un fonctionnement anormal de l'appareil génétique cellulaire, grâce à l'accroissement de la sensibilité de la détection de séquences spécifiques ADN et ARN dans la fraction d'acides nucléiques associés à la surface cellulaire des cellules sanguines, comparativement aux acides nucléiques isolés d'une fraction de plasma. Ceci est particulièrement important dans la détection précoce de premières phases pathologiques lorsque la plupart des acides nucléiques circulant dans le sang sont associés à la surface cellulaire des cellules sanguines.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BW, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NA, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (BW, GH, GM, KE, LS, MW, MZ, NA, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IT, LU, MC, NL, PL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)