WIPO logo
Mobile | Deutsch | Español | Français | 日本語 | 한국어 | Português | Русский | 中文 | العربية |
PATENTSCOPE

Search International and National Patent Collections
World Intellectual Property Organization
Search
 
Browse
 
Translate
 
Options
 
News
 
Login
 
Help
 
Machine translation
1. (WO2004033669) METHODS OF MANIPULATING NUCLEIC ACIDS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2004/033669    International Application No.:    PCT/US2003/033319
Publication Date: 22.04.2004 International Filing Date: 10.10.2003
IPC:
C12Q 1/68 (2006.01), C12P 19/34 (2006.01), C07H 21/02 (2006.01)
Applicants: THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA AS REPRESENTED BY THE SECRETARY OF THE DEPARTMENT OF [US/US]; National Institutes of Health, Office of Technology Transfer, 6011 Executive Boulevard, Suite 325-, Rockville, MD 20852-3804 (US) (For All Designated States Except US).
XIANG, Charlie [CA/US]; (US) (For US Only).
BROWNSTEIN, Michael, J. [US/US]; (US) (For US Only)
Inventors: XIANG, Charlie; (US).
BROWNSTEIN, Michael, J.; (US)
Agent: HARDING, Tanya, M.; Klarquist Sparkman, LLP, One World Trade Center, 121 S.W. Salmon Street, Suite 1600, Portland, OR 97204 (US)
Priority Data:
10/269,515 11.10.2002 US
Title (EN) METHODS OF MANIPULATING NUCLEIC ACIDS
(FR) PROCEDES DE MANIPULATION D'ACIDES NUCLEIQUES
Abstract: front page image
(EN)Methods are provided for labeling nucleic acid molecules for use in hybridization reactions, and kits employing these methods. The level of labeling is increased by including one or more reactive modification, such as amine-modifications, into the primers used to initiate synthesis of the nucleic acid molecule, for instance through random-primed reverse transcription. Also provided are modified random primers (such as amine-modified random primers) useful in these methods, labeling and hybridization kits comprising such primers, labeled nucleic acid molecules and mixtures of molecules, and methods for using them. Methods are also provided for amplifying a nucleic acid template contained within extremely small samples, in some cases as little as one cell. In particular embodiments, a single random primer is used for all steps of the amplification method. The nucleic acid template can either be of cellular or viral origin. The disclosure also provides an improved method of fixing cells or tissue sections, from which RNA can be obtained for subsequent use as RNA templates or for generating labeled probe.
(FR)L'invention concerne des procédés de marquage de molécules d'acides nucléiques que l'on utilise dans les réactions d'hybridation et les kits utilisant ces procédés. Le niveau de marquage augmente par l'ajout d'une ou plusieurs modifications réactives, notamment des modifications d'amine, dans les amorces utilisées pour initialiser la synthèse de la molécule d'acide nucléique, par exemple au moyen de la transcription inverse amorcée de manière aléatoire. L'invention concerne en outre des amorces aléatoires modifiées (telles que des amorces aléatoires modifiées par une amine) utilisées dans ces procédés, des kits de marquage et d'hybridation comprenant lesdites amorces, des molécules d'acide nucléique marquées et des mélanges desdites molécules ainsi que des procédés utilisant celles-ci. L'invention concerne par ailleurs des procédés d'amplification d'une matrice d'acide nucléique contenue dans des échantillons extrêmement petits, dans certains cas aussi petits qu'une cellule. Dans des modes de réalisation particuliers, une amorce aléatoire unique est utilisée pour toutes les étapes du procédé d'amplification. La matrice d'acide nucléique peut être soit d'origine cellulaire soit d'origine virale. L'invention concerne finalement un procédé amélioré de fixation de cellules ou de sections tissulaires, à partir desquelles on peut obtenir un ARN en vue d'une utilisation ultérieure comme matrices d'ARN ou en vue de la génération d'une sonde marquée.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (GH, GM, KE, LS, MW, MZ, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IT, LU, MC, NL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)