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1. (WO2004031355) METHODS FOR IDENTIFYING INHIBITORS OF BOTULINUM NEUROTOXINS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2004/031355    International Application No.:    PCT/US2003/030899
Publication Date: 15.04.2004 International Filing Date: 01.10.2003
Chapter 2 Demand Filed:    20.04.2004    
IPC:
C12Q 1/37 (2006.01)
Applicants: UNIVERSITY OF MARYLAND [US/US]; 515 West Lombard Street, 4th floor, Baltimore, MD 21201 (US) (For All Designated States Except US).
OYLER, George, A. [US/US]; (US) (For US Only).
TSAI, Yien, Che [US/US]; (US) (For US Only).
FISHMAN, Paul, S. [US/US]; (US) (For US Only).
KINCAID, Randall, L. [US/US]; (US) (For US Only)
Inventors: OYLER, George, A.; (US).
TSAI, Yien, Che; (US).
FISHMAN, Paul, S.; (US).
KINCAID, Randall, L.; (US)
Agent: GOTTS, Lawrence, J.; Shaw Pittman LLP, 1650 Tysons Boulevard, McLean, VA 22102-4859 (US)
Priority Data:
60/415,177 01.10.2002 US
Title (EN) METHODS FOR IDENTIFYING INHIBITORS OF BOTULINUM NEUROTOXINS
(FR) METHODES PERMETTANT D'IDENTIFIER DES INHIBITEURS DE NEUROTOXINES BOTULIQUES
Abstract: front page image
(EN)A system and method for identifying a botulinum neurotoxin inhibitor employing a botulinum neurotoxin substrate complex having a peptide substrate, preferably SNAP-25, a reporter domain on one side of said peptide substrate and an immobilization domain on the opposite side of said peptide substrate. The botulinum neurotoxin inhibitor is identified by its ability to decreases the relative amount of cleaved complex, detected through measuring a decrease in complex bound to a solid support. The method of the present invention also utilizes novel cells that express a botulinum neurotoxin substrate complex. The methods of the present ivnention are adapted for cell based screening to monitor the catalytic activity of a BoNT in living cells and to identify molecules that inhibit the catalytic activity of a BoNT in living cells. Also provided are novel stable cells lines that express the botulinum toxin substrate complex and viral vectors capable of efficiently expressing an active light chain of the BoNT within mammalian cells.
(FR)L'invention concerne un système et une méthode permettant d'identifier un inhibiteur de neurotoxine botulique (BoNT) utilisant un complexe de substrats de neurotoxine botulique qui comprend un substrat peptidique, de préférence SNAP-25, un domaine reporter disposé sur un côté du substrat peptidique et un domaine d'immobilisation disposé sur le côté opposé dudit substrat peptidique. L'inhibiteur de neurotoxine botulique est identifié par son aptitude à réduire la quantité relative de complexe clivé, détecté par mesure d'une diminution dans une liaison de complexe par rapport à un support solide. La méthode de l'invention utilise également de nouvelles cellules exprimant un complexe de substrats de neurotoxine botulique. Lesdites méthodes sont conçues pour effectuer un criblage à base de cellule afin de surveiller l'activité catalytique d'une BoNT dans des cellules vivantes et d'identifier des molécules inhibant l'activité catalytique d'une BoNT dans des cellules vivantes. L'invention concerne enfin de nouvelles lignées cellulaires stables exprimant le complexe de substrats de neurotoxine botulique et des vecteurs viraux capables d'exprimer efficacement une chaîne légère active de la BoNT dans des cellules de mammifère.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, EG, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NI, NO, NZ, OM, PG, PH, PL, PT, RO, RU, SC, SD, SE, SG, SK, SL, SY, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VC, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (GH, GM, KE, LS, MW, MZ, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, FR, GB, GR, HU, IE, IT, LU, MC, NL, PT, RO, SE, SI, SK, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)