WIPO logo
Mobile | Deutsch | Español | Français | 日本語 | 한국어 | Português | Русский | 中文 | العربية |
PATENTSCOPE

Search International and National Patent Collections
World Intellectual Property Organization
Search
 
Browse
 
Translate
 
Options
 
News
 
Login
 
Help
 
Machine translation
1. (WO2003002978) DIRECTED ENZYMATIC MODIFICATION OF ANALYTES FOR AFFINITY CAPTURE AND ANALYSIS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2003/002978    International Application No.:    PCT/US2002/020500
Publication Date: 09.01.2003 International Filing Date: 27.06.2002
Chapter 2 Demand Filed:    02.01.2003    
IPC:
G01N 33/68 (2006.01)
Applicants: SURROMED, INC. [US/US]; 2375 Garcia Avenue Mountain View, CA 94043 (US)
Inventors: SCHULMAN, Howard; (US)
Agent: SWANSON, Barry, J.; Swanson & Bratschun, L.L.C. Suite 330 1745 Shea Center Drive Highlands Ranch, CO 80129 (US)
Priority Data:
60/301,683 27.06.2001 US
Title (EN) DIRECTED ENZYMATIC MODIFICATION OF ANALYTES FOR AFFINITY CAPTURE AND ANALYSIS
(FR) MODIFICATION ENZYMATIQUE DIRIGEE D'ANALYTES EN VUE DE LEUR CAPTURE PAR AFFINITE ET DE LEUR ANALYSE
Abstract: front page image
(EN)Proteins are selectively extracted from complex biological mixtures for subsequent analysis by methods such as mass spectrometry. Protein-binding (e.g., PDZ or SH2)or cellular compartmentalizing (e.g., membrane-targeting) domains are provided to target specific proteins, and targeted proteins are enzymatically modified by attachment of modification molecules. For example, targeted proteins can be biotinylated by the enzyme biotin protein ligase. The protein-targeting domain and protein-modifying enzyme can be immobilized on a solid surface (macroscopic planar surface or particle surface), provided as a fusion protein, or chemically coupled. The modified proteins are then exposed to complementary molecules (e.g., avidin or streptavidin) that bind strongly to the modification molecule, resulting in affinity capture of the selected proteins. Because the protein-targeting domain brings the protein in proximity to the active site of the enzyme, the method effectively broadens the substrate specificity of the enzyme, allowing affinity capture of any desired protein subset.
(FR)Des protéines sont extraites sélectivement de mélanges biologiques complexes en vue de leur analyse ultérieure selon des procédés tels que la spectrométrie de masse. Les protéines spécifiques d'une cible sont dotées de domaines de liaison à des protéines (par exemple, PDZ ou SH2) ou de compartimentage cellulaire (par exemple, ciblage de membrane), et les protéines ciblées sont modifiées par voie enzymatique au moyen de la fixation de molécules de modification. Par exemple, les protéines ciblées peuvent être biotinylées par l'enzyme biotine-protéine ligase. Le domaine de ciblage des protéines et l'enzyme de modification des protéines peuvent être immobilisés sur une surface solide (surface plane macroscopique ou surface de particule), utilisés en tant que protéine de fusion ou couplés chimiquement. Les protéines modifiées sont ensuite exposées à des molécules complémentaires (par exemple, avidine ou streptavidine) qui se lient fortement à la molécule de modification, ce qui aboutit à une capture par affinité des protéines sélectionnées. Du fait que le domaine de ciblage des protéines amène la protéine à proximité du site actif de l'enzyme, ce procédé permet d'élargir efficacement la spécificité de l'enzyme vis-à-vis d'un substrat, ceci autorisant une capture par affinité de tout sous-ensemble de protéines souhaité.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NO, NZ, OM, PH, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TN, TR, TT, TZ, UA, UG, UZ, VN, YU, ZA, ZM, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (GH, GM, KE, LS, MW, MZ, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZM, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)