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1. (WO2002008454) METHOD AND DEVICE FOR VIABLE AND NONVIABLE PROKARYOTIC AND EUKARYOTIC CELL QUANTITATION
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2002/008454    International Application No.:    PCT/US2001/023358
Publication Date: 31.01.2002 International Filing Date: 24.07.2001
Chapter 2 Demand Filed:    21.02.2002    
IPC:
C12Q 1/06 (2006.01)
Applicants: GENPRIME, INC. [US/US]; 9713 West Sunset Highway Spokane, WA 99224 (US) (For All Designated States Except US).
FLEMING, James, E. [US/US]; (US) (For US Only).
SOMES, Jason, Buck [US/US]; (US) (For US Only).
MCLEAN, Darby [US/US]; (US) (For US Only).
HOLCOMB, Jerad, R. [US/US]; (US) (For US Only)
Inventors: FLEMING, James, E.; (US).
SOMES, Jason, Buck; (US).
MCLEAN, Darby; (US).
HOLCOMB, Jerad, R.; (US)
Agent: HERMANNS, Karl, R.; Seed Intellectual Property Law Group PLLC Suite 6300 701 Fifth Avenue Seattle, WA 98104-7092 (US).
GOWSHALL, Jon, V.; Forrester & Boehmert Pettenkoferstrasse 20-22 80336 Munchen (DE)
Priority Data:
60/220,298 24.07.2000 US
Title (EN) METHOD AND DEVICE FOR VIABLE AND NONVIABLE PROKARYOTIC AND EUKARYOTIC CELL QUANTITATION
(FR) TECHNIQUE ET APPAREIL PERMETTANT D'EVALUER QUANTITATIVEMENT DES CELLULES EUCARYOTES ET PROCARYOTES VIABLES ET NON VIABLES
Abstract: front page image
(EN)A rapid method for the quantitation of various live cell types is described. The method may include a variety of steps including: 1) suspending the cells in a detergent-like compound; 2) isolating the washed cells by centrifugation or filtration; 3) resuspending the cells in a solution that contains a preservative, a fluorescent dye and a compound such as dequalinium which can be taken up by the cells; 4) measuring the fluorescence increase over time of the cell-dye mixture with a simple fluorometer; and 5) measuring the native fluorescence of the cells. This new cell fluorescence method correlates with other methods of enumerating cells such as the standard plate count, the methylene blue method and the slide viability technique. The method is particularly useful in several applications such as: a) quantitating bacteria in milk, yogurt, cheese, meat and other foods; b) quantitating yeast cells in brewing, fermentation and bread making; c) quantitating mammalian cells in research, food and clinical settings. The method is especially useful when both total and viable cell counts are required such as in the brewing industry. The method can also be employed to determine the metabolic activity of cells in a sample. The device, and/or system used for cell quantitation is also disclosed.
(FR)La présente invention concerne une technique rapide permettant d'évaluer quantitativement divers types de cellules vivantes. Cette technique peut comprendre diverses étapes: (1) suspension des cellules dans un composé de type détergent, (2) isolation des cellules lavées par centrifugation ou filtration, (3) nouvelle suspension des cellules dans une solution contenant un conservateur, un colorant fluorescent et un composé tel que du déqualinium qui peut être repris par les cellules, (4) mesure de l'augmentation de fluorescence durant la période du mélange colorant cellule avec un simple fluoromètre, et (5) mesure de la fluorescence endogène des cellules. Cette nouvelle technique de fluorescence cellulaire peut être mise en corrélation avec d'autres techniques de numération cellulaire telles que le comptage sur plaque de microtitration standard, la méthode au bleu de méthylène et la technique de viabilité sur lame. Cette technique convient particulièrement pour plusieurs applications telles que: (a) l'évaluation quantitative des bactéries dans le yaourt, le fromage, la viande ou d'autres aliments, (b) l'évaluation quantitative des cellules de levure dans le brassage, dans la fermentation et dans la fabrication du pain, (c) l'évaluation quantitative des cellules mammaliennes dans la recherche, l'alimentation et dans les paramètres cliniques. Cette technique convient tout particulièrement lorsque deux numérations totales des cellules viables sont requises comme dans le secteur des brasseries. On peut aussi employer cette technique pour déterminer l'activité métabolique des cellules dans un échantillon. Cette invention concerne aussi un appareil, un dispositif et/ou un système utilisés pour évaluer quantitativement des cellules.
Designated States: AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, BZ, CA, CH, CN, CO, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EC, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, MZ, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VN, YU, ZA, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (GH, GM, KE, LS, MW, MZ, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE, TR)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)