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Pub. No.:    WO/2000/029558    International Application No.:    PCT/US1999/026807
Publication Date: 25.05.2000 International Filing Date: 11.11.1999
Chapter 2 Demand Filed:    12.06.2000    
C12N 9/10 (2006.01)
Applicants: CLAUSEN, Henrick [DK/DK]; (DK).
AMADO, Margarida [PT/US]; (US) (For US Only)
Inventors: CLAUSEN, Henrick; (DK).
AMADO, Margarida; (US)
Agent: CORUZZI, Laura, A.; Pennie & Edmonds LLP 1155 Avenue of the Americas New York, NY 10036 (US)
Priority Data:
PA 1998 01483 13.11.1998 DK
Abstract: front page image
(EN)A novel gene defining a novel enzyme in the UDP-D-galactose: $g(b)-$i(N)-acetylglucosamine/$g(b)-N-acetylgalactosamine $g(b)1,3galactosyltransferase family, termed $g(b)3Gal-T5, with unique enzymatic properties is disclosed. The enzymatic activity of $g(b)3Gal-T5 is shown to be distinct from that of previously identified enzymes of this gene family. The invention discloses isolated DNA molecules and DNA constructs encoding $g(b)3Gal-T5 and derivatives thereof by way of amino acid deletion, substitution or insertion exhibiting $g(b)3Gal-T5 activity, as well as cloning and expression vectors including such DNA, cells tranfected with the vectors, and recombinant methods for providing $g(b)3Gal-T5. The enzyme $g(b)3Gal-T5 and $g(b)3Gal-T5-active derivatives thereof are disclosed, in particular soluble derivatives comprising the catalytically active domain of $g(b)3Gal-T5. Further, the invention discloses methods of obtaining $g(b)1,3galactosyl glycosylated saccharides, glycopeptides or glycoproteins by use of an enzymically active $g(b)3Gal-T5 protein or fusion protein thereof or by using cells stably transfected with a vector including DNA encoding an enzymatically active $g(b)3Gal-T5 protein as an expression system for recombinant production of such glycopeptides or glycoproteins. Also a method for the identification of DNA sequence variations in the $g(b)3Gal-T5 gene by isolating DNA from a patient, amplifying $g(b)3Gal-T5-coding exons by PCR, and detecting the presence of DNA sequence variation, are disclosed.
(FR)La présente invention concerne un gène définissant une nouvelle enzyme de l'UDP-D-galactose, en l'occurrence la famille des $g(b)-$i(N)-acétyle-glucosamine et $g(b)-N-acétyle-galactosamine $g(b)1,3 galactosyle-transférase ou '3Gal-T5', lesquelles transférases présentent des propriétés enzymatiques uniques. L'activité enzymatique du 3Gal-T5 s'avère distincte de celle d'enzymes déjà identifiées dans cette famille de gènes. L'invention concerne également des molécules d'ADN isolées et des constructions d'ADN codant $g(b)3Gal-T5 et certains de leurs dérivés par suppression, substitution ou insertion d'acide aminé présentant une activité $g(b)3Gal-T5. L'invention concerne en outre des vecteurs de clonage et d'expression incluant un tel ADN, des cellules transfectées de ces vecteurs et des techniques de recombinaison donnent une telle $g(b)3Gal-T5. L'invention concerne de plus l'enzyme $g(b)3Gal-T5 et certains de ses dérivés à activité $g(b)3Gal-T5, en particulier des dérivés solubles comportant le domaine catalytiquement actif de la $g(b)3Gal-T5. L'invention concerne aussi des procédés d'obtention de saccharides, glycopeptides ou de glycoprotéines glycosylées du $g(b)1,3galactosyle par utilisation d'une protéine $g(b)3Gal-T5 enzymatiquement active, ou de l'une de ses protéines de fusion, ou par utilisation de cellules transfectées de façon stable d'un vecteur, et notamment un ADN codant une protéine $g(b)3Gal-T5 enzymatiquement active sous forme d'un système d'expression pour production par recombinaison de telles glycopeptides ou glycoprotéines. L'invention concerne enfin l'identification de variations des séquences d'ADN dans le gène $g(b)3Gal-T5 par isolation d'ADN d'un patient, amplification des exons codant la $g(b)3Gal-T5 (par réaction en chaîne de la polymérase, et détection de la présence d'une variation de séquence d'ADN.
Designated States: AE, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CR, CU, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, UA, UG, US, UZ, VN, YU, ZA, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (GH, GM, KE, LS, MW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZW)
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African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)