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1. (WO2000024929) LINEAR AMPLIFICATION MEDIATED PCR (LAM PCR)
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/2000/024929    International Application No.:    PCT/EP1999/008077
Publication Date: 04.05.2000 International Filing Date: 26.10.1999
Chapter 2 Demand Filed:    26.05.2000    
IPC:
C12Q 1/68 (2006.01)
Applicants: VON KALLE, Christof [DE/DE]; (DE).
SCHMIDT, Manfred [DE/DE]; (DE)
Inventors: VON KALLE, Christof; (DE).
SCHMIDT, Manfred; (DE)
Agent: VOSSIUS & PARTNER; Siebertstrasse 4 D-81675 München (DE)
Priority Data:
198 49 348.7 26.10.1998 DE
Title (DE) ÜBER LINEARE AMPLIFIKATION VERMITTELTE PCR (=LAM PCR)
(EN) LINEAR AMPLIFICATION MEDIATED PCR (LAM PCR)
(FR) REACTION PCR ETABLIE PAR AMPLIFICATION LINEAIRE
Abstract: front page image
(DE)Es wird ein hochsensitives Verfahren zur Identifikation und/oder Sequenzierung einer unbekannten DNA- oder RNA-Sequenz beschrieben, die an eine bekannte DNA- oder RNA-Region angrenzt, bei dem man (a) in einer ersten Stufe ein oder mehrere DNA- oder RNA-Fragmente einer oder mehrerer linearen PCR-Stufen unter Verwendung eines oder mehrerer Primer unterzieht (b) die erhaltenen Einzelstränge zu Doppelsträngen auffüllt (c) die Doppelstränge mit einem oder mehreren Restriktionsenzymen schneidet, um glatte und/oder kohäsive Enden zu erzeugen (d) an die geschnittenen Enden ein Oligonukleotid bekannter Sequenz anfügt und (e) die erhaltenen DNA-Fragmente vermehrt und nachweist.
(EN)The invention relates to a highly sensitive method for identifying and/or sequencing an unknown DNA or RNA sequence which borders on a known DNA or RNA region. Said method is characterized by the following steps: (a) subjecting in a first step one or more DNA or RNA fragments to one or more linear PCR steps using one or more primers, (b) complementing the obtained single strands to give double strands, (c) digesting the double strands with one or more restriction enzymes to generate smooth and/or cohesive ends, (d) adding an oligonucleotide of known sequence to the digested ends and (e) propagating and detecting the DNA fragments thus obtained.
(FR)L'invention concerne un procédé à grande sensibilité pour l'identification ou la détermination d'une séquence d'ADN ou d'ARN inconnue, contiguë à une région d'ADN ou d'ARN connue. Dans le procédé selon l'invention, (a) on soumet, lors d'une première étape, un ou plusieurs fragments d'ADN ou d'ARN à une ou à plusieurs phases PCR linéaires en utilisant une ou plusieurs amorces, (b) on complète les brins individuels obtenus en doubles brins, (c) on coupe les brins doubles à l'aide d'une ou de plusieurs enzymes de restriction afin de générer des extrémités lises ou cohésives, (d) on adjoint un oligonucléotide de séquence connue aux extrémités coupées et (e) on multiplie et on identifie les fragments d'ADN obtenus.
Designated States: AE, AL, AM, AT, AU, AZ, BA, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CR, CU, CZ, DK, DM, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VN, YU, ZA, ZW.
African Regional Intellectual Property Organization (GH, GM, KE, LS, MW, SD, SL, SZ, TZ, UG, ZW)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: German (DE)
Filing Language: German (DE)