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1. (WO1999038999) METHOD AND COMPOSITIONS FOR DETECTING LUCIFERASE IN BIOLOGICAL SAMPLES
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/1999/038999    International Application No.:    PCT/US1999/000988
Publication Date: 05.08.1999 International Filing Date: 18.01.1999
Chapter 2 Demand Filed:    04.08.1999    
IPC:
C12Q 1/66 (2006.01)
Applicants: PACKARD INSTRUMENT COMPANY, INC. [US/US]; 2200 Warrenville Road Downers Grove, IL 60515 (US)
Inventors: ROELANT, Christiaan; (BE)
Agent: RUDISILL, Stephen, G.; Arnold, White & Durkee P.O. Box 4433 Houston, TX 77210 (US)
Priority Data:
09/015,090 29.01.1998 US
Title (EN) METHOD AND COMPOSITIONS FOR DETECTING LUCIFERASE IN BIOLOGICAL SAMPLES
(FR) TECHNIQUE ET COMPOSITION PERMETTANT UNE DETECTION DE LA LUCIFERASE DANS DES ECHANTILLONS BIOLOGIQUES
Abstract: front page image
(EN)The presence of renilla luciferase alone or both renilla luciferase and firefly luciferase is detected by adding reagent mixture(s) to a biological sample and producing glow luminescence having a duration of at least an hour. In producing luminescence from renilla luciferase alone, a reagent is added comprising coelenterazine, and dithiothreitol (DTT) and EDTA, or functional equivalents of DTT and EDTA. Luminescence from samples containing both firefly luciferase and renilla luciferase is produced by first adding a reagent comprising firefly luciferin, ATP, co-factors necessary for firefly luciferase activity (e.g., Ca?+2¿ and Mg?+2¿), dithiothreitol (DTT) or functional equivalents thereof, and AMP. Following measurement of the firefly luciferase, coelenterazine and EDTA, or functional equivalents of EDTA, are added, and the luminescence produced by renilla luciferase is measured.
(FR)La présence de luciférase de la rénilla seule ou celle des luciférases de la rénilla et de la luciole sont décelées à la suite de l'adjonction d'un ou de plusieurs mélange de réactifs à un échantillon biologique, la luminescence produite perdurant pendant au moins une heure. On ajoute, pour obtenir une luminescence produite par la luciférase de la rénilla seule, un réactif comprenant de la coelentérazine, du dithiothreitol (DTT) et de l'acide éthylène diamine tétracétique (EDTA) ou des équivalents fonctionnels du DTT et de l'EDTA. Pour obtenir une luminescence produite par des échantillons renfermant à la fois de la luciférase de la rénilla et de la luciférase de la luciole, on ajoute, dans un premier temps un réactif contenant de la luciférine de la luciole, du triphosphate d'adénosine (ATP) des cofacteurs indispensables au déclenchement de l'activité de la luciférase de la luciole (par ex., Ca?+2¿ et Mg?+2¿), du dithiothreitol (DTT), ou leurs équivalents fonctionnels, et du monophosphate d'adénosine (AMP). Une fois mesurée la luciférase de la luciole, et après avoir ajouté de la coelentérazine et de l'EDTA ou des équivalents fonctionnels de cet acide, on mesure la luminescence produite par la luciférase de la rénilla.
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Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)