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1. (WO1999010527) METHOD FOR ISOLATING ANIONIC ORGANIC SUBSTANCES FROM AQUEOUS SYSTEMS USING CATIONIC POLYMER NANOPARTICLES
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/1999/010527    International Application No.:    PCT/EP1998/005340
Publication Date: 04.03.1999 International Filing Date: 21.08.1998
Chapter 2 Demand Filed:    11.03.1999    
IPC:
B01J 41/04 (2006.01), C12N 15/10 (2006.01), C12Q 1/68 (2006.01)
Applicants: SKW TROSTBERG AKTIENGESELLSCHAFT [DE/DE]; Dr.-Albert-Frank-Strasse 32, D-83308 Trostberg (DE) (AT, BE, CA, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, JP, LU, MC, NL, PT, SE only).
BAYER, Ernst [DE/DE]; (DE) (For US Only).
FRITZ, Hans [DE/DE]; (DE) (For US Only).
MAIER, Martin [DE/US]; (US) (For US Only).
SCHEWITZ, Jens [DE/DE]; (DE) (For US Only).
GERSTER, Michael [DE/DE]; (DE) (For US Only)
Inventors: BAYER, Ernst; (DE).
FRITZ, Hans; (DE).
MAIER, Martin; (US).
SCHEWITZ, Jens; (DE).
GERSTER, Michael; (DE)
Agent: HANSEN, Bernd; Hoffmann . Eitle, Arabellastrasse 4, D-81925 München (DE)
Priority Data:
197 36 366.0 21.08.1997 DE
Title (DE) VERFAHREN ZUR ISOLIERUNG VON ANIONISCHEN ORGANISCHEN SUBSTANZEN AUS WÄSSRIGEN SYSTEMEN MIT KATIONISCHEN POLYMERNANOPARTIKELN
(EN) METHOD FOR ISOLATING ANIONIC ORGANIC SUBSTANCES FROM AQUEOUS SYSTEMS USING CATIONIC POLYMER NANOPARTICLES
(FR) PROCEDE PERMETTANT D'ISOLER DES SUBSTANCES ORGANIQUES ANIONIQUES A PARTIR DE SYSTEMES AQUEUX AU MOYEN DE NANOPARTICULES POLYMERES CATIONIQUES
Abstract: front page image
(DE)Das Verfahren beschreibt die Isolierung von anionischen organischen Substanzen aus wäßrigen Systemen unter Verwendung von Polymernanopartikeln mit kationischen pH-sensitiven Oberflächengruppen. Die Extraktion kann direkt aus verdünnten Lösungen, biologischen Medien (Blutplasma, Seren, Urin etc.) sowie aus komplexen Puffersystemen (z.B. detergenshaltigen PCR-Ansätzen) erfolgen, ohne daß eine vorhergehende Derivatisierung der Proben bzw. ein Zusatz von Bindungspuffern erforderlich ist. Die so erhaltenen Konjugate der entsprechenden Substanzen mit den Polymernanopartikeln können nach ihrer Abtrennung vom umgebenden Medium durch zusätzliche Waschschritte aufgereinigt und effektiv entsalzt werden. Die pH-Sensitivität der basischen Oberflächengruppen ermöglicht es, die gebundenen Substanzen nach ihrer Abtrennung gezielt durch eine pH-Änderung des Mediums freizusetzen. Durch die Verwendung leicht flüchtiger Basen kann eine Kontamination der freigesetzten Proben durch ionische Rückstände vermieden werden. Durch Zusatz von geringen Mengen von SDS und Acetonitril beim Ablösungsschritt kann insbesondere bei geringen Konzentrationen der zu isolierenden Substanzen (<1$g(m)mol/L) die Empfindlichkeit der Methode zusätzlich gesteigert werden. Das Verfahren stellt eine universelle Extraktionsmethode sowohl für niedermolekulare anionische Verbindungen als auch für Peptide, Nukleinsäuren und Nukleinsäurederivate dar. Die Wiederfindungsraten betragen bis zu 100 %.
(EN)The invention relates to a method for isolating anionic organic substances from aqueous systems using polymer nanoparticles with cationic pH-sensitive surface groups. Extraction can be carried out directly from diluted solutions, biological media (blood plasma, serum, urine, etc.) and complex buffer systems (e.g. PCR preparations containing detergents) without prior derivatization of the samples or addition of binding buffers. After separation from the surrounding medium the conjugates of the corresponding substances and polymer nanoparticles obtained in this manner can be purified through additional washing steps and effectively desalinated. Owing to the pH-sensitivity of the basic surface groups, the bound substances can be released in a targeted manner after separation by modification of the pH of the medium. By using volatile bases contamination of the released samples with ionic residues can be avoided. By adding small quantities of SDS and acetonitrile during the separation stage, the sensitivity of the method can be raised further, especially when the substances to be isolated are present in low concentrations (<1$g(m)mol/L). The method is a method of extraction with universal application, suitable for both low-molecular anionic compounds as well as peptides, nucleic acids and nucleic acid derivatives. Recovery rates are up to 100 %.
(FR)L'invention concerne un procédé qui permet d'isoler des substances organiques anioniques à partir de systèmes aqueux au moyen de nanoparticules polymères comportant des groupes de surface cationiques sensibles au pH. L'extraction peut se faire directement à partir de solutions diluées et de milieux biologiques (plasma sanguin, sérum, urine, etc.), ainsi que de systèmes tampons complexes (préparations pour PCR contenant des détergents, par exemple), sans qu'il soit nécessaire ni de dérivatiser préalablement les échantillons, ni d'ajouter des tampons de liaison. Les conjugués des substances correspondantes avec les nanoparticules polymères ainsi obtenus peuvent, après leur séparation du milieu environnant, être purifiés par des étapes de lavage supplémentaires et débarrassés de leurs sels. De par la sensibilité au pH des groupes de surface basiques il est possible, après séparation, de libérer de façon ciblée les substances liées en modifiant le pH du milieu. L'utilisation de bases facilement volatiles permet d'éviter une contamination des échantillons libérés par des résidus ioniques. L'ajout de petites quantités de SDS et d'acétonitrile à l'étape de séparation peut, notamment en cas de faible concentration des substances à isoler (<1$g(m)mol/l), augmenter encore la sensibilité du procédé. Celui-ci représente une technique d'extraction universelle convenant aussi bien aux composés anioniques de faible poids moléculaire qu'aux peptides, aux acides nucléiques et aux dérivés de ces derniers. Le taux de récupération peut atteindre 100 %.
Designated States: CA, JP, US.
European Patent Office (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE).
Publication Language: German (DE)
Filing Language: German (DE)