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1. (WO1997038128) METHOD OF IMMEDIATELY DISCRIMINATING BACTERIA AND APPARATUS THEREFOR
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/1997/038128    International Application No.:    PCT/JP1996/002370
Publication Date: 16.10.1997 International Filing Date: 26.08.1996
IPC:
C12Q 1/04 (2006.01), G02B 21/16 (2006.01)
Applicants: NIPPON MIZUSHORIGIKEN CO., LTD. [JP/JP]; 1-19, Wakamatu-cho 3-chome, Fuchu-shi, Tokyo 183 (JP) (For All Designated States Except US).
TOKUDA, Yoshiyuki [JP/JP]; (JP) (For US Only).
PARK, Jongchul [KR/JP]; (JP) (For US Only)
Inventors: TOKUDA, Yoshiyuki; (JP).
PARK, Jongchul; (JP)
Priority Data:
8/125218 11.04.1996 JP
Title (EN) METHOD OF IMMEDIATELY DISCRIMINATING BACTERIA AND APPARATUS THEREFOR
(FR) TECHNIQUE DE DIFFERENCIATION IMMEDIATE DE BACTERIES ET APPAREIL CORRESPONDANT
Abstract: front page image
(EN)A method of immediately discriminating bacteria which comprises mixing bacteria sampled from a specimen into a staining solution prepared by mixing physiological saline with a fluorescent dye comprising fluoresceine or a derivative thereof and another fluorescent dye comprising propidium iodide each in a required concentration and further with a staining accelerator in a given concentration, heating the resultant mixture to a required temperature to stain live and dead bacteria by causing the fluorescent dyes to penetrate into and disperse in the cells of the bacteria selectively, mixing the resultant mixture with an efflux inhibitor in a required concentration to prepare a stained bacteria solution, dropping this solution onto a light-transmitting plate which has been rendered light-scattering, irradiating the solution from under the plate with an exciting light having a central wavelength of 488 nm, and observing the fluorescent light emitted by the absorption of the exciting light, the configuration and size of the fluorescent emission, and the number of fluorescent spots through a magnifier from above, thereby determining the difference between live and dead bacteria, the type of bacteria, and the bacterial count; an apparatus for immediately discriminating bacteria which is provided with a source of an exciting light having a central wavelength of 488 nm in the lower part of a casing whose inside is kept in a state of darkroom, a magnifier above on the optical axis of the exciting light, and a light-transmitting plate which has been rendered light-scattering in the intermediate part; and another apparatus for immediately discriminating bacteria which is further provided with a band-pass filter for selecting the wavelengths of 520 nm and 625 nm above the magnifier and a video camera on the upper end of the filter, thereby converting the images which have passed the magnifier into electric signals and synthesizing the signals with a computer for image processing.
(FR)L'invention porte sur une technique permettant une différenciation immédiate de bactéries consistant à introduire un échantillonnage de bactéries dans une solution de coloration issue du mélange d'une solution saline physiologique, d'un colorant fluorescent tel que de la fluorescéine ou un dérivé de cette substance, d'un autre colorant fluorescent contenant un iodure de propidium, chacun selon la concentration exigée, et d'un accélérateur de coloration selon une concentration donnée, à chauffer le mélange obtenu à la température requise pour colorer des bactéries vivantes et mortes, ces bactéries se colorant du fait de la pénétration et de la dispersion des colorants fluorescents dans leurs cellules et ce, sélectivement. On ajoute alors au mélange résultant un inhibiteur d'écoulement, selon une concentration requise, afin de préparer une solution contenant les bactéries colorées, puis l'on fait tomber goutte-à-goutte cette solution sur une plaque translucide dont on a fait en sorte qu'elle diffuse la lumière. On soumet cette solution aux rayons d'une lumière d'excitation ayant une longueur d'onde centrale de 488 nm et dont la source se trouve en dessous de la plaque. On est ainsi en mesure d'observer, à l'aide d'un microscope, la lumière fluorescente émise du fait de l'absorption de la lumière d'excitation, la configuration et les dimensions de cette émission fluorescente ainsi que le nombre des points fluorescents, ce qui permet de constater les différences existant entre les bactéries vivantes et mortes, de déterminer le type de bactérie et d'établir la numération bactérienne. L'invention porte également sur un appareil permettant d'effectuer une différenciation immédiate de bactéries, lequel appareil comporte une source de lumière d'excitation, d'une longueur d'onde centrale de 488 nm, située dans la partie inférieure d'un boîtier dont l'intérieur est maintenu dans des conditions similaires de celles d'une chambre noire, un microscope se trouvant au-dessus de l'axe optique de la lumière d'excitation et une plaque translucide dont on a fait en sorte qu'elle diffuse la lumière, cette plaque se trouvant dans la partie intermédiaire de l'appareil. Elle porte également sur un autre appareil permettant d'effectuer cette différenciation immédiate, lequel appareil est, en outre, pourvu d'un filtre passe-bande surmontant le microscope et servant à sélectionner des ondes d'une longueur comprise entre 520 et 625 nm ainsi que d'une caméra vidéo située au-dessus du filtre, ce qui permet de convertir les images ayant traversé le microscope en signaux électriques et de synthétiser ces signaux au moyen d'un ordinateur pour traitement d'image.
Designated States: AU, CN, KR, US.
European Patent Office (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE).
Publication Language: Japanese (JA)
Filing Language: Japanese (JA)