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1. (WO1997009451) CLONED DNA POLYMERASES FROM THERMOTOGA AND MUTANTS THEREOF
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/1997/009451    International Application No.:    PCT/US1996/014189
Publication Date: 13.03.1997 International Filing Date: 06.09.1996
Chapter 2 Demand Filed:    08.04.1997    
IPC:
C12N 9/12 (2006.01)
Applicants: LIFE TECHNOLOGIES, INC. [US/US]; 9800 Medical Center Drive, Rockville, MD 20850 (US)
Inventors: CHATTERJEE, Deb, K.; (US).
HUGHES, A. John, Jr.; (US)
Agent: ESMOND, Robert, W.; Sterne, Kessler, Goldstein & Fox P.L.L.C., Suite 600, 1100 New York Avenue, N.W., Washington, DC 20005-3934 (US)
Priority Data:
08/525,057 08.09.1995 US
08/537,397 02.10.1995 US
08/537,400 02.10.1995 US
08/576,759 21.12.1995 US
08/689,818 14.08.1996 US
Title (EN) CLONED DNA POLYMERASES FROM THERMOTOGA AND MUTANTS THEREOF
(FR) ADN POLYMERASES CLONEES TIREES DE THERMOTOGA ET MUTANTS DE CES POLYMERASES
Abstract: front page image
(EN)The invention relates to a substantially pure thermostable DNA polymerase from $i(Thermotoga) ($i(Tne) and $i(Tma)) and mutants thereof. The $i(Tne) DNA polymerase has a molecular weight of about 100 kilodaltons and is more thermostable than $i(Taq) DNA polymerase. The mutant DNA polymerase has at least one mutation selected from the group consisting of (1) a first mutation that substantially reduces or eliminates 3'$m(7)5' exonuclease activity of said DNA polymerase; (2) a second mutation that subtantially reduces or eliminates 5'$m(7)3' exonuclease activity of said DNA polymerase; (3) a third mutation in the O helix of said DNA polymerase resulting in said DNA polymerase becoming non-discriminating against dideoxynucleotides. The present invention also relates to the cloning and expression of the wild type or mutant DNA polymerases in $i(E. coli), to DNA molecules containing the cloned gene, and to host cells which express said genes. The DNA polymerases of the invention may be used in well-known DNA sequencing, labeling, amplification and cDNA synthesis reactions.
(FR)Cette invention se rapporte à une ADN polymérase essentiellement pure tirée de $i(Thermotoga) ($i(Tne) and $i(Tma)) et à des mutants de cet enzyme. Cette ADN polymérase de $i(Tne) possède un poids moléculaire d'environ 100 kilodaltons et elle est plus thermostable que l'ADN polymérase de $i(Taq). L'ADN polymérase mutante comporte au moins une mutation choisie parmi: (1) une première mutation qui réduit ou élimine sensiblement l'activité d'exonucléase 3'$m(7)5' de cette ADN polymérase; (2) une seconde mutation qui réduit ou élimine sensiblement l'activité d'exonucléase 5'$m(7)3' de cette ADN polymérase; et (3) une troisième mutation dans l'hélice O de cette ADN polymérase, ce qui a pour conséquence que cette ADN polymérase devient moins discriminante contre les didésoxynucléotides. Cette invention se rapporte également au clonage et à l'expression d'ADN polymérases de type sauvage ou mutant dans $i(E. coli), à des molécules d'ADN contenant ce gène cloné, ainsi qu'à des cellules hôtes qui expriment de tels gènes. Ces ADN polymérases peuvent être utilisées dans des techniques bien connues de séquençage d'ADN, de marquage d'ADN, d'amplification d'ADN et de réactions par synthèse d'ADNc.
Designated States: AL, AM, AT, AU, AZ, BB, BG, BR, BY, CA, CH, CN, CU, CZ, DE, DK, EE, ES, FI, GB, GE, HU, IL, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MD, MG, MK, MN, MW, MX, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, TJ, TM, TR, TT, UA, UG, UZ, VN.
African Regional Intellectual Property Organization (KE, LS, MW, SD, SZ, UG)
Eurasian Patent Organization (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM)
European Patent Office (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE)
African Intellectual Property Organization (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, ML, MR, NE, SN, TD, TG).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)