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1. WO1996041176 - IMMUNOASSAY FOR DETERMINING BLOOD CELL ACTIVATION

Publication Number WO/1996/041176
Publication Date 19.12.1996
International Application No. PCT/US1996/008776
International Filing Date 05.06.1996
Chapter 2 Demand Filed 07.01.1997
IPC
G01N 33/569 2006.01
GPHYSICS
01MEASURING; TESTING
NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
33Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/-G01N31/131
48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
569for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
CPC
G01N 33/56966
GPHYSICS
01MEASURING; TESTING
NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
33Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
48Biological material, e.g. blood, urine
50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
569for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
56966Animal cells
Applicants
  • THE MILWAUKEE HEART PROJECT [US]/[US]
Inventors
  • AMRANI, David, L.
Agents
  • COOPER, John, C.
Priority Data
08/473,52007.06.1995US
Publication Language English (EN)
Filing Language English (EN)
Designated States
Title
(EN) IMMUNOASSAY FOR DETERMINING BLOOD CELL ACTIVATION
(FR) DOSAGE IMMUNOLOGIQUE POUR DETERMINER L'ACTIVATION DES CELLULES DU SANG
Abstract
(EN)
A method for determining the activation level of platelets and other types of blood cells that undergo activation by ELISA and other immunoassay techniques includes the step of reacting a sample containing the blood cells in a liquid phase with an excess quantity of an activation-specific primary antibody prior to allowing the cells in the sample to bind to a solid surface. This differs from typical ELISA procedures, wherein the cells are bound to the surface of a plastic test tube or microtiter plate prior to addition of the primary antibody. It has been discovered according to the invention that binding the cells to a surface prior to reaction with the primary antibody changes the activation level of the cells, making the assay less accurate. In addition, whole platelet ELISA, like flow cytometric analyses, can sensitively detect activated platelets.
(FR)
La présente invention décrit un procédé de détermination du niveau d'activation des plaquettes et autres types de cellules du sang qui sont soumises à une activation par la technique ELISA ou par d'autres techniques de dosage immunologique. Ce procédé consiste à faire réagir un échantillon contenant les cellules du sang dans une phase liquide avec une quantité excessive d'anticorps primaires spécifiques à l'activation avant de permettre aux cellules dans l'échantillon de se lier à une surface solide. Cette procédure diffère des procédures traditionnelles d'ELISA, dans lesquelles les cellules sont fixées à la surface d'un tube à essai en plastique ou à une plaque de microtitrage avant d'ajouter l'anticorps primaire. Selon l'invention, il s'est révélé que le fait de lier les cellules à une surface avant la réaction avec l'anticorps primaire modifie le niveau d'activation des cellules rendant ainsi le dosage moins précis. En outre, la technique ELISA sur les plaquettes entières peut, tout comme les analyses cytométriques de flux, détecter par sensibilité les plaquettes activées.
Also published as
Latest bibliographic data on file with the International Bureau