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1. WO1996006355 - REAGENT FOR ASSAYING ANTIBODY AGAINST REDUCED ANTIGEN AND METHOD OF ASSAYING THEREWITH

Publication Number WO/1996/006355
Publication Date 29.02.1996
International Application No. PCT/JP1995/001634
International Filing Date 17.08.1995
Chapter 2 Demand Filed 15.03.1996
IPC
G01N 33/576 2006.01
GPHYSICS
01MEASURING; TESTING
NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
33Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/-G01N31/131
48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
576for hepatitis
CPC
G01N 33/5767
GPHYSICS
01MEASURING; TESTING
NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
33Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
48Biological material, e.g. blood, urine
50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
576for hepatitis
5767non-A, non-B hepatitis
Applicants
  • DAINABOT CO., LTD. [JP/JP]; Roppongi First Building 9-9, Roppongi 1-chome Minato-ku Tokyo 106, JP (AllExceptUS)
  • INOUE, Yuzo [JP/JP]; JP (UsOnly)
  • TAKEI, Toshinori [JP/JP]; JP (UsOnly)
  • TOKITA, Susumu [JP/JP]; JP (UsOnly)
Inventors
  • INOUE, Yuzo; JP
  • TAKEI, Toshinori; JP
  • TOKITA, Susumu; JP
Agents
  • MIZUNO, Akinobu; Gloria Miyamasuzaka III 305 10-7, Shibuya 1-chome Shibuya-ku Tokyo 150, JP
Priority Data
6/21678119.08.1994JP
Publication Language Japanese (JA)
Filing Language Japanese (JA)
Designated States
Title
(EN) REAGENT FOR ASSAYING ANTIBODY AGAINST REDUCED ANTIGEN AND METHOD OF ASSAYING THEREWITH
(FR) REACTIF POUR LE DOSAGE D'UN ANTICORPS DIRIGE CONTRE UN ANTIGENE REDUIT ET PROCEDE DE DOSAGE
Abstract
(EN)
A method of assaying an antibody which reacts immunologically with a hepatitis C virus (HCV) antigen in a specimen, wherein an anti-reduced HCV antibody, especially an antibody against 33C antigen, is assayed more accurately with a high sensitivity. As the antigen, use is made of at least a protein antigen coded in the NS3 domain of the HCV genome or a peptide having the activity substantially equivalent to that of the above antigen, and the antigen has been so converted or preserved as to substantially hold the form of a reduced NS3-related antigen. Examples of the treatment for the conversion and preservation include preservation of the NS3-related antigen in a dried state or in an inert gas atmosphere or in the presence of a deoxygenating agent, modification of the thiol group with a reagent for protecting or modifying the same, modification of the cystein residue by genetic recombination techniques, such as site-directed mutagenesis, to prepare a variant recombinant NS3-related antigen, preservation of the antigen in the presence of an antioxidant till just before the use thereof, treatment of the antigen with an enzyme capable of cleaving the disulfide bond (-S-S-) into thiol groups, and treatment of the antigen with a substance having a substrate affinity for the cystein residue.
(FR)
Procédé de dosage d'un anticorps réagissant immunologiquement avec l'antigène du virus de l'hépatite C (HCV) dans une éprouvette. Un anticorps anti-HCV réduit, notamment un anticorps dirigé contre l'antigène 33C, est dosé de manière plus précise et avec une sensibilité plus élevée. Comme antigène, on utilise au moins un antigène de protéine codé dans le domaine NS3 du génome de HCV ou un peptide exerçant une activité sensiblement équivalente à celle de l'antigène précité. L'antigène est converti ou préservé de manière à conserver essentiellement la forme d'un antigène réduit apparenté à NS3. On peut citer à titre d'exemple de traitement de conversion et de préservation, la préservation de l'antigène apparenté à NS3 à l'état déshydraté ou en atmosphère de gaz inerte ou encore en présence d'un agent désoxygénant, la modification du groupe thiol par un réactif destiné à sa protection ou sa modification, la modification d'un résidu de cystéine par des techniques de recombinaison génétique telles que la mutagenèse dirigée, pour obtenir un variant de recombinaison d'antigène apparenté à NS3, la préservation de l'antigène en présence d'un antioxydant jusqu'au moment précédant immédiatement son utilisation, le traitement de l'antigène par une enzyme capable de cliver la liaison bisulfure (-S-S-) en groupes thiol et le traitement de l'antigène par une substance présentant une affinité de substrat pour le résidu de cystéine.
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