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1. (WO1996004391) METHOD FOR SELECTING HIGH-EXPRESSING HOST CELLS
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/1996/004391    International Application No.:    PCT/US1995/009576
Publication Date: 15.02.1996 International Filing Date: 28.07.1995
Chapter 2 Demand Filed:    08.01.1996    
IPC:
C07K 14/715 (2006.01), C07K 16/42 (2006.01), C12N 9/72 (2006.01), C12N 15/64 (2006.01), C12N 15/67 (2006.01), C12N 15/85 (2006.01)
Applicants: GENENTECH, INC. [US/US]; 460 Point San Bruno Boulevard, South San Francisco, CA 94080-4990 (US)
Inventors: CROWLEY, Craig, W.; (US)
Agent: LEE, Wendy, M.; Genentech, Inc., 460 Point San Bruno Boulevard, South San Francisco, CA 94080-4990 (US).
ARMITAGE, Ian, M.; Mewburn Ellis, York House, 23 Kingsway, London WC2B 6HP (GB)
Priority Data:
08/286,740 05.08.1994 US
Title (EN) METHOD FOR SELECTING HIGH-EXPRESSING HOST CELLS
(FR) PROCEDE DE SELECTION DE CELLULES HOTES A HAUT NIVEAU D'EXPRESSION
Abstract: front page image
(EN)A method for selecting recombinant host cells expressing high levels of a desired protein is described. This method utilizes eukaryotic host cells harboring a DNA construct comprising a selectable gene (preferably an amplifiable gene) and a product gene provided 3' to the selectable gene. The selectable gene is positioned within an intron defined by a splice donor site and a splice acceptor site and the selectable gene and product gene are under the transcriptional control of a single transcriptional regulatory region. The splice donor site is generally an efficient splice donor site and thereby regulates expression of the product gene using the transcriptional regulatory region. The transfected cells are cultured so as to express the gene encoding the product in a selective medium comprising an amplifying agent for sufficient time to allow amplification to occur, whereupon either the desired product is recovered or cells having multiple copies of the product gene are identified.
(FR)Procédé de sélection de cellules hôtes recombinantes exprimant des niveaux élevés d'une protéine souhaitée. Ce procédé utilise des cellules hôtes eucaryotes comportant un produit de recombinaison d'ADN comprenant un gène sélectionnable (de préférence, un gène amplifiable) et un gène de produit à 3' par rapport au gène sélectionnable. Celui-ci est positionné à l'intérieur d'un intron défini par un site donneur d'épissage et par un site accepteur d'épissage et le gène sélectionnable, ainsi que le gène de produit, se trouvent sous le contrôle de transcription d'une région unique de régulation de transcription. Le site donneur d'épissage est généralement un site donneur d'épissage efficace et, de ce fait, il régule l'expression du gène de produit au moyen de la région de régulation de transcription. Les cellules transfectées sont cultivées, de manière à exprimer le gène codant le produit, dans un milieu sélectif comprenant un agent d'amplification, pendant une durée suffisante pour permettre l'apparition de l'amplification, puis le produit souhaité est récupéré ou bien les cellules possédant des copies multiples du gène de produit sont identifiées.
Designated States: AU, CA, JP, MX.
European Patent Office (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)