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1. WO1996002629 - PROCESS FOR RELEASING HETEROLOG PROTEINS OF SACCHAROMYCES CEREVISIAE STRAINS

Publication Number WO/1996/002629
Publication Date 01.02.1996
International Application No. PCT/ES1995/000088
International Filing Date 14.07.1995
IPC
C12N 1/06 2006.01
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
1Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
06Lysis of microorganisms
CPC
C12N 1/063
CCHEMISTRY; METALLURGY
12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
1Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof
06Lysis of microorganisms
063of yeast
Applicants
  • UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID [ES]/[ES] (AllExceptUS)
  • NOMBELA CANO, César [ES]/[ES] (UsOnly)
  • ALVAREZ ALVAREZ, Pablo [ES]/[ES] (UsOnly)
  • SAMPEDRO MARTINEZ, Marta [ES]/[ES] (UsOnly)
  • DE LA FUENTE CARRETERO, Jesús [ES]/[ES] (UsOnly)
  • MOLINA MARTIN, María [ES]/[ES] (UsOnly)
Inventors
  • NOMBELA CANO, César
  • ALVAREZ ALVAREZ, Pablo
  • SAMPEDRO MARTINEZ, Marta
  • DE LA FUENTE CARRETERO, Jesús
  • MOLINA MARTIN, María
Priority Data
P 940153614.07.1994ES
Publication Language Spanish (ES)
Filing Language Spanish (ES)
Designated States
Title
(EN) PROCESS FOR RELEASING HETEROLOG PROTEINS OF SACCHAROMYCES CEREVISIAE STRAINS
(ES) PROCEDIMIENTO DE LIBERACION DE PROTEINAS HETEROLOGAS DE CEPAS DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE
(FR) PROCEDE DE LIBERATION DE PROTEINES HETEROLOGUES DE SOUCHES DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE
Abstract
(EN)
The invention relates to a process for releasing intracellular heterolog proteins in the $i(Saccharomyces Cerevisiae) yeast based on the osmotic sensitivity which confers the mutation $i(slt2) at the temperature of 37 °C. Said osmotic sensitivity may be used for releasing the intracellular content either by change of temperature of the culture from 24° to 37° C, or by transfer of grown cells in an osmotically stabilized medium at said second temperature to a non-stabilized medium. In both cases, the cells undergo a lysis and release their intracellular content and, after centrifugation to eliminate the cellular rests, a preparation of proteins is obtained which is appropriate to initiate a process of purification of the protein of interest. This process results in a cost reduction since the use of equipment is avoided and the preparation of proteins which is obtained contains less impurities than that which is obtained through other processes.
(ES)
Se describe un procedimiento para lograr la liberación de proteínas heterólogas intracelulares en la levadura $i(Saccharomyces cerevisiae) basado en la sensibilidad osmótica que confiere la mutación $i(slt2) a la temperatura de 37 °C. Esta sensibilidad osmótica puede ser utilizada para la liberación del contenido intracelular bien por cambio en la temperatura del cultivo de 24° a 37 °C, o bien por transferencia de células crecidas en medio estabilizado osmóticamente a esta ultima temperatura a un medio no estabilizado. En ambos casos las células se lisan liberando su contenido intracelular obteniéndose, tras una centrifugación que elimina los restos celulares, una preparación de proteínas apta para iniciar un proceso de purificación de la proteína de interés. Este procedimiento resulta en un abaratamiento del proceso al evitar el uso de maquinaria, y la preparación de proteínas que se obtiene contiene menos impurezas que la obtenida por otros procesos.
(FR)
L'invention décrit un procédé permettant la libération de protéines hétérologues intracellulaires dans la levure $i(Saccharomyces Cerevisiae), ce procédé se basant sur la sensibilité osmotique que confère la mutation $i(slt2) à la température de 37 °C. Cette sensibilité osmotique peut être utilisée pour la libération du contenu intracellulaire soit par changement de température de la culture de 24 °C à 37 °C, soit par transfert de cellules développées en milieu stabilisé osmotiquement à cette dernière température vers un milieu non stabilisé. Dans les deux cas, les cellules subissent une lyse libérant leur contenu intracellulaire, ce qui permet d'obtenir, après centrifugation afin d'éliminer les restes cellulaires, une préparation de protéines qui permet de commencer un processus de purification de la protéine d'intérêt. Ce procédé se traduit par une réduction des coûts en évitant l'utilisation d'équipement, et la préparation de protéines qu'on obtient contient moins d'impuretés que celle obtenue par d'autres procédés.
Also published as
Latest bibliographic data on file with the International Bureau