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1. (WO1994014837) PURIFICATION OF PROTEINACEOUS MATERIAL
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/1994/014837    International Application No.:    PCT/US1993/012395
Publication Date: 07.07.1994 International Filing Date: 17.12.1993
Chapter 2 Demand Filed:    21.07.1994    
IPC:
A61K 38/00 (2006.01), C12N 9/24 (2006.01)
Applicants: ENZON, INC. [US/US]; 40 Kingsbridge Road, Piscataway, NJ 08854 (US)
Inventors: LEE, Lihsyng, S.; (US).
MUTHUKUMAR, Ganapathy; (US).
CZUBA, Barbara; (US).
SHORR, Robert, G., L.; (US)
Agent: MERCANTI, Michael, N.; Enzon, Inc., 40 Kingsbridge Road, Piscataway, NJ 08854 (US).
CARUSO, John, A.; Enzon, Inc., 40 Kingsbridge Road, Piscataway, NJ 08854 (US)
Priority Data:
07/993,774 21.12.1992 US
Title (EN) PURIFICATION OF PROTEINACEOUS MATERIAL
(FR) PURIFICATION DE MATIERES PROTEIQUES
Abstract: front page image
(EN)Methods for the purification of proteinaceous materials, such as recombinant glucocerebrosidase (GCS) expressed in an insect cell culture that had been previously infected with a baculovirus carrying GCS-encoding nucleic acid, are disclosed. According to one embodiment, the medium is first clarified by being passed through a hollowfiber cartridge, then bacteria is filtered out. The filtered media is then concentrated with a cation exchange column, followed by hydrophobic interaction chromatography (HIC) purification. In alternative embodiments, the eluate from the cation exchange column and/or the HIC column is passed through an anion exchange column for removal of residual DNA, lipids and endotoxins. The purification methods of the present invention are quicker, cheaper, and capable of handling greater quantities and greater starting purities of conditioned media than processes previously utilized. The various methods of the present invention are also capable of providing commercial quantities of purified GCS suitable for therapeutic uses. Purified forms of GCS are also disclosed.
(FR)L'invention porte sur des procédés de purification de matières protéiques telles que la glucocérébrosidase (GCS) recombinée exprimée dans un milieu de cultures de cellules d'insecte précédemment infectées par un baculovirus porteur d'acide nucléique codant la GCS. Dans un mode de réalisation, on clarifie d'abord le milieu en le faisant passer dans une cartouche à fibres creuses et on enlève les bactéries par filtrage. On concentre ensuite le milieu filtré au moyen d'une colonne échangeuse de cations et on procède à une purification par chromatographie hydrophobe. Dans un autre mode de réalisation, on fait passer l'éluat en provenance de la colonne échangeuse d'ions et/ou la colonne échangeuse d'anions afin d'extraire l'ADN, les lipides et les endotoxines résiduels. Les procédés de purification selon l'invention sont plus rapides, plus économiques et permettent de traiter des quantités plus grandes, ainsi que des milieux conditionnés initialement plus purs que les procédés existant jusqu'à maintenant. Les divers procédés selon l'invention permettent également de produire des quantités industrielles de GCS purifiée à des fins thérapeutiques. Des formes purifiées de GCS sont également décrites.
Designated States: AU, BG, BR, CA, CZ, FI, HU, JP, KP, KR, LK, MG, NO, NZ, PL, RO, RU, SK, UA.
European Patent Office (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FR, GB, GR, IE, IT, LU, MC, NL, PT, SE).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)