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1. (WO1991017267) PROCESS FOR NUCLEIC ACID HYBRIDIZATION AND AMPLIFICATION
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Pub. No.: WO/1991/017267 International Application No.: PCT/US1991/002626
Publication Date: 14.11.1991 International Filing Date: 17.04.1991
IPC:
C12Q 1/68 (2006.01)
C CHEMISTRY; METALLURGY
12
BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
Q
MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES OR MICRO-ORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
1
Measuring or testing processes involving enzymes or micro-organisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
68
involving nucleic acids
Applicants:
SRI INTERNATIONAL [US/US]; 333 Ravenswood Avenue Menlo Park, CA 94025-3493, US
Inventors:
ZARLING, David, A.; US
SENA, Elissa, P.; US
GREEN, Christopher, J.; US
Agent:
LANGE, Richard, P.; SRI International 333 Ravenswood Avenue Menlo Park, CA 94025-3493 , US
Priority Data:
520,32107.05.1990US
Title (EN) PROCESS FOR NUCLEIC ACID HYBRIDIZATION AND AMPLIFICATION
(FR) PROCEDE D'HYBRIDATION ET D'AMPLIFICATION D'ACIDE NUCLEIQUE
Abstract:
(EN) The present invention is directed to a method of achieving RecA protein facilitated amplification of a double-stranded DNA target sequence having first and second complementary strands, each strand with 5' and 3' ends. The method involves complexing a primer complementary to a 5' end region of the first strand and a primer complementary to a 5' end region of the second strand with RecA protein in the presence of ATP-$g(g)-S. The complexed primers are then reacted in a mixture also containing the target sequence, all four dNTPs, RecA protein and DNA polymerase. The reaction is conducted below the temperature required for thermal dissociation of the two target strands and continued until a desired degree of amplification of the target sequence is achieved. The present invention further includes the cloning and identification of the coding sequences for the RecA protein of $i(Thermus aquaticus).
(FR) La présente invention se rapporte à un procédé pour effectuer l'amplification, facilitée par une protéine RecA, d'une séquence cible d'ADN bicaténaire possédant des premier et second brins complémentaires, chaque brin comportant des extrémités 5' et 3'. Ce procédé consiste à complexer une amorce complémentaire d'une région terminale 5' du premier brin, et une amorce complémentaire d'une région terminale 5' du second brin avec la protéine RecA et en présence d'ATP-$g(g)-S. Les amorces complexées sont amenées à réagir dans un mélange contenant aussi la séquence cible, les quatre dNTP, la protéine RecA et la polymérase d'ADN. La réaction se fait à une température inférieure à celle requise pour la dissociation thermique des deux brins cibles, et se poursuit jusqu'à ce qu'un degré d'amplification souhaité de la séquence cible soit atteint. La présente invention comprend en outre le clonage et l'identification des séquences codant pour la protéine RecA de $i(Thermus aquaticus).
Designated States: CA, JP
European Patent Office (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FR, GB, GR, IT, LU, NL, SE)
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)
Also published as:
EP0481065CA2056983