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1. (WO1991007505) CLONING METHOD AND KIT
Latest bibliographic data on file with the International Bureau

Pub. No.: WO/1991/007505 International Application No.: PCT/EP1990/002013
Publication Date: 30.05.1991 International Filing Date: 20.11.1990
Chapter 2 Demand Filed: 21.06.1991
IPC:
C12N 15/10 (2006.01) ,C12Q 1/68 (2006.01)
C CHEMISTRY; METALLURGY
12
BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
N
MICRO-ORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICRO-ORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
15
Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
09
Recombinant DNA-technology
10
Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
C CHEMISTRY; METALLURGY
12
BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
Q
MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES OR MICRO-ORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
1
Measuring or testing processes involving enzymes or micro-organisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
68
involving nucleic acids
Applicants:
DYNAL A.S. [NO/NO]; P.O. Box 158 Skoyen N-01212 Oslo 2, NO (AllExceptUS)
HORNES, Erik [NO/NO]; NO (UsOnly)
UHLEN, Mathias [SE/SE]; SE (UsOnly)
Inventors:
HORNES, Erik; NO
UHLEN, Mathias; SE
Agent:
FRANK B. DEHN & CO.; Imperial House 15-19 Kingsway London WC2B 6UZ, GB
Priority Data:
8926269.521.11.1989GB
Title (EN) CLONING METHOD AND KIT
(FR) PROCEDE ET TROUSSE DE CLONAGE
Abstract:
(EN) A method of amplifying target DNA is disclosed wherein said DNA is first amplified by PCR, the amplified DNA then being contacted with a single stranded linearised plasmid vector having terminal regions which are complementary to terminal regions of the PCR amplified DNA, whereby a cyclic product is formed comprising single stranded sequences from said target DNA and said vector and two double stranded regions from the overlapping terminal regions of the vector and the PCR amplified DNA; the cyclic product then being introduced into a host organism. Two-stage PCR may be performed and site-specific mutagenesis may be effected between PCR amplification and formation of the cyclic product. The single-stranded linearised plasmid vector and/or the target DNA may be immobilised. Kits are disclosed for performing various aspects of the method which can be used in a method of diagnosis wherein the target DNA is characteristic of a physiological condition.
(FR) Est décrit un procédé pour amplifier de l'ADN cible, dans lequel ledit ADN est tout d'abord amplifié par réaction en chaîne de polymérase, l'ADN amplifié étant ensuite mis en contact avec un vecteur plasmidique linéarisé monocaténaire possédant des régions terminales qui sont complémentaires de régions terminales de l'ADN amplifié par réaction en chaîne de polymérase. Un produit cyclique est ainsi formé qui comprend des séquences monocaténaires provenant dudit ADN cible et dudit vecteur, et deux régions bicaténaires provenant des régions terminales à recouvrement du vecteur et de l'ADN amplifié par réaction en chaîne de polymérase; le produit cyclique étant ensuite introduit dans un organisme hôte. Une réaction en chaîne de polymérase en deux étapes peut être effectuée, et une mutagénèse spécifique du site peut être réalisée entre l'amplification par réaction en chaîne de polymérase et la formation du produit cyclique. Le vecteur plasmidique linéarisé monocaténaire et/ou l'ADN cible peuvent être immobilisés. Sont décrites également des trousses permettant la mise en ÷uvre de divers aspects du procédé et s'utilisant dans un procédé diagnostic où l'ADN cible est caractéristique d'un état physiologique.
Designated States: AU, CA, JP, NO, US
European Patent Office (AT, BE, CH, DE, DK, ES, FR, GB, GR, IT, LU, NL, SE)
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)
Also published as:
EP0502011US5525493JPH05501498CA2066663DE000069009774AU1990067403