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1. (WO1989003889) DETECTION OF MICROBIAL BETA-LACTAMASE
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/1989/003889    International Application No.:    PCT/US1988/003765
Publication Date: 05.05.1989 International Filing Date: 25.10.1988
IPC:
C12Q 1/18 (2006.01), C12Q 1/34 (2006.01)
Applicants: WASHINGTON RESEARCH FOUNDATION [US/US]; 4225 Roosevelt Way N.E., Suite 303, Seattle, WA 98105 (US)
Inventors: CHEN, Kirk, C., S.; (US)
Agent: OSTER, Jeffrey, B. @; Seed and Berry, 6300 Columbia Center, Seattle, WA 98104-7092 (US)
Priority Data:
114,696 29.10.1987 US
Title (EN) DETECTION OF MICROBIAL BETA-LACTAMASE
(FR) DETECTION DE LACTAMASE BETA MICROBIENNE
Abstract: front page image
(EN)An improved developer for a method for the specific detection of the presence of beta-lactamase from microbial sources is disclosed. The method utilizes a beta-lactam ring-containing substrate whose amide bond is hydrolyzed in the presence of beta-lactamase. A substrate which includes a beta-lactam antibiotic with an acyl side chain containing an alpha-amino group and an alpha-phenyl group or its derivatives is first contacted with an organism thought to produce beta-lactamase or a cell-free beta-lactamase preparation, and, subsequently, it is determined whether the reaction product between the unhydrolyzed substrate, the end products and the organism or the preparation fluoresces. Fluorescence is the indication of $g(b)-lactamase activity. The developer comprises the addition of an oxidizing agent (preferably also containing formaldehyde) to the reaction product to enhance the fluorescence. The oxidizing agent is selected from the group consisting of Ag+, Hg++, H2O2, I3-, IO4-, persulfate, Pd++, p-hydroxymercuribenzoate, and mixtures thereof.
(FR)Le révélateur amélioré décrit est destiné à être utilisé dans un procédé servant à détecter spécifiquement la présence de lactamase bêta dans des sources microbiennes. Ledit procédé utilise un substrat contenant un anneau de lactame bêta, dont la liaison amide est hydrolisée en présence de lactamase bêta. Un substrat, qui contient un antibiotique de lactame bêta avec une chaîne latérale acyle contenant un groupe alpha-amino et un groupe alpha-phényle ou ses dérivés, est d'abord mis en contact avec un organisme censé produire de la lactamase bêta ou une préparation de lactamase bêta non cellulaire, puis on détermine si le produit de réaction entre le substrat non-hydrolisé, les produits finaux et l'organisme ou la préparation émet une fluorescence. La fluorescence indique l'activité de la lactamase bêta. Le révélateur comprend un agent oxydant (contenant de préférence également du formaldhéhyde) ajouté au produit de réaction pour améliorer la fluorescence. L'agent oxydant est choisi dans le groupe composé de Ag+, de Hg++, de H2O2, de I3-, de IO4-, de persulfate, de Pd++, de p-hydroxymercuribenzoate, et de mélanges de ces différents composés.
Designated States: AU, DK, FI, JP, KR, NO.
European Patent Office (AT, BE, CH, DE, FR, GB, IT, LU, NL, SE).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)