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1. (WO1987006264) EXPRESSION OF THE CLONED LYSOSTAPHIN GENE
Latest bibliographic data on file with the International Bureau   

Pub. No.:    WO/1987/006264    International Application No.:    PCT/US1987/000873
Publication Date: 22.10.1987 International Filing Date: 15.04.1987
IPC:
C12N 9/52 (2006.01)
Applicants: PUBLIC HEALTH RESEARCH INSTITUTE OF THE CITY OF NE [US/US]; W YORK;, 455 First Avenue;, New York, NY 10016 (US)
Inventors: RECSEI, Paul, A.; (US)
Agent: RYAN, M., Andrea @; Brumbaugh, Graves, Donohue & Raymond, 30 Rockefeller Plaza, New York, NY 10112 (US)
Priority Data:
852,407 16.04.1986 US
034,464 10.04.1987 US
Title (EN) EXPRESSION OF THE CLONED LYSOSTAPHIN GENE
(FR) EXPRESSION DU GENE CLONE DE LYSOSTAPHINE
Abstract: front page image
(EN)Recombinant plasmids which in transformant microbial hosts express lysostaphin, a bacteriocin that kills most known staphylococcal species. The invention also provides lysostaphin, substantially free from non-lysostaphin contaminants. Recombinant plasmids, pRG5, pJP1, pDF8 and pRP1, were derived by inserting a 1.5 kilobase segment of DNA coding for lysostaphin into the cloning vectors, pUC8, pBC16, pBD64 and pSPV1, respectively. $i(E. coli) strain JM105 transformed by pRG5 and members of $i(Bacillus) species, including $i(B. subtilis) and $i(B. sphaericus) transformed by pJP1, pDF8 and pRP1 produce lysostaphin which is immunologically and electrophoretically indistinguishable from that produced by $i(S. simulans), the natural source. Furthermore, $i(B sphaericus) strain 00/pJP1 transformants produce five times the amount of lysostaphin as $i(S. simulans). The invention also provides the 1.5 kbp DNA fragment coding for lysostaphin. The sequence of the DNA encodes prepolysostaphin, a monomeric 389 amino acid protein, which is post-translationally processed to mature lysostaphin.
(FR)Des plasmides recombinants dans des hôtes microbiens transformés expriment la lysostaphine, une bactériocine qui détruit la plupart des espèces connues de staphylocoques. L'invention permet également d'obtenir de la lysostaphine essentiellement dépourvue de contaminants autres que la lysostaphine. On obtient les plasmides recombinants, pRGS, pJP1, pDF8 et pRP1 par dérivation en insérant un segment de 1,5 kilobase d'ADN de codage de lysostaphine dans les vecteurs de clonage, pUG8, pBC16, pBD64 et pSPV1, respectivement. Des souches d'$i(E. coli) JM105 transformées par pRG5 et des membres de l'espèce $i(Bacillus), y compris $i(B. subtilis) et $i(B. sphaericus), transformés par pJP1, pDF8 et pRP1, produisent de la lysostaphine immunologiquement et électrophorétiquement identique à celle produite par la source naturelle, $i(S. simulans). En outre, les transformés de la souche 00/pJP1 de $i(B. sphaericus) produisent cinq fois plus de lysostaphine que $i(S. simulans). L'invention concerne également le fragment d'1,5 kbp d'ADN de codage de la lysostaphine. La séquence d'ADN code la prépolysostaphine, une protéine monomère d'acide aminé 389, traitée par post-translation pour devenir de la lysostaphine mature.
Designated States: AU, DK, FI, HU, JP.
European Patent Office (AT, BE, CH, DE, FR, GB, IT, LU, NL, SE).
Publication Language: English (EN)
Filing Language: English (EN)